公司產(chǎn)品僅供體外研究使用,不用于臨床診斷!
|
產(chǎn)品名稱
|
LF/LTF人乳鐵傳遞蛋白/乳鐵蛋白ELISA方法
|
|
英文名稱
|
Human Lactoferrin,LTF/LF ELISA Kit
|
|
貨號
|
PH097123
|
包裝規(guī)格:液體盒裝 96T/48T
保存條件:2-8℃(長期不使用時,部分試劑應(yīng)放在-20℃條件下)。
有效期:6個月
存儲運輸:低溫避光,請勿重壓,輕拿輕放(現(xiàn)貨供應(yīng),一般為快遞運輸,江浙滬隔天到,外地及偏遠(yuǎn)地方三至五天時間到貨。)
Elisa試劑盒可測種屬:人、大鼠、小鼠、兔子、豬、犬、猴、馬、牛、羊、雞、鴨、魚等。
Elisa試劑盒適用范圍:此試劑盒僅用于科研實驗,禁用于臨床。
樣本要求:
1.標(biāo)本采集后盡早進(jìn)行提取,提取按相關(guān)文獻(xiàn)進(jìn)行,提取后應(yīng)盡快進(jìn)行實驗。若不能馬上進(jìn)行試驗,可將標(biāo)本放于-20℃保存,但應(yīng)避免反復(fù)凍融。
2.不能檢測含 NaN3 的樣品,因 NaN3 抑制辣根過氧化物酶的(HRP)活性。
|
2400 ng/L
|
5 號標(biāo)準(zhǔn)品
|
150μl 的原倍標(biāo)準(zhǔn)品加入 150μl 標(biāo)準(zhǔn)品稀釋液
|
|
1200ng/L
|
4 號標(biāo)準(zhǔn)品
|
150μl 的 5 號標(biāo)準(zhǔn)品加入 150μl 標(biāo)準(zhǔn)品稀釋液
|
|
600ng/L
|
3 號標(biāo)準(zhǔn)品
|
150μl 的 4 號標(biāo)準(zhǔn)品加入 150μl 標(biāo)準(zhǔn)品稀釋液
|
|
300ng/L
|
2 號標(biāo)準(zhǔn)品
|
150μl 的 3 號標(biāo)準(zhǔn)品加入 150μl 標(biāo)準(zhǔn)品稀釋液
|
|
150ng/L
|
1 號標(biāo)準(zhǔn)品
|
150μl 的 2 號標(biāo)準(zhǔn)品加入 150μl 標(biāo)準(zhǔn)品稀釋液
|
組成及試劑配制 :
1. 酶聯(lián)板:一塊(96孔)
2. 標(biāo)準(zhǔn)品(凍干品):2瓶,每瓶臨用前以樣品稀釋液稀釋至1ml,蓋好后靜置10分鐘以上,然后反復(fù)顛倒/搓動以助溶解,其濃度為100 ng/ml,做系列倍比稀釋(注:不要直接在板中進(jìn)行倍比稀釋)后,分別稀釋成100 ng/ml,50 ng/ml,25 ng/ml,12.5 ng/ml,6.25 ng/ml,3.12 ng/ml,1.56 ng/ml,樣品稀釋液直接作為標(biāo)準(zhǔn)濃度0 ng/ml,臨用前15分鐘內(nèi)配制。
如配制50 ng/ml標(biāo)準(zhǔn)品:取0.5ml (不要少于0.5ml ) 100 ng/ml的上述標(biāo)準(zhǔn)品加入含有0.5ml樣品稀釋液的Eppendorf管中,混勻即可,其余濃度以此類推。
3. 樣品稀釋液:1×20ml/瓶。
4. 檢測稀釋液A:1×10ml/瓶。
5. 檢測稀釋液B:1×10ml/瓶。
6. 檢測溶液A:1×120ul/瓶(1:100)臨用前以檢測稀釋液A 1:100稀釋,稀釋前根據(jù)預(yù)先計算好的每次實驗所需的總量配制(100ul/孔),實際配制時應(yīng)多配制0.1-0.2ml。如10ul檢測溶液A加990ul檢測稀釋液A的比例配制,輕輕混勻,在使用前一小時內(nèi)配制。
7. 檢測溶液B:1×120ul/瓶(1:100)臨用前以檢測稀釋液B 1:100稀釋。稀釋方法同檢測溶液A。
8. 底物溶液:1×10ml/瓶。
9. 濃洗滌液:1×30ml/瓶,使用時每瓶用蒸餾水稀釋25倍。
10. 終止液:1×10ml/瓶(2N H2SO4)。

樣本收集及儲存:
1. 細(xì)胞培養(yǎng)上清:
將細(xì)胞培養(yǎng)基移至無菌離心管,在 4℃條件下 1000 ×g 離心 10 min,然后將上清等量分裝于小 EP 管并于-20℃下保存(24 小時內(nèi)檢測可放入 2-8℃儲存),避免反復(fù)凍融。
2. 血清樣本:
室溫血液自然凝固 20 min 后,在 4℃條件下 1000×g 離心 10 min,然后將上清等量分裝于小 EP 管并于-20℃下保存(24 小時內(nèi)檢測可放入 2-8℃儲存),保存過程中如有沉淀,請再次離心,避免反復(fù)凍融。
3. 血漿樣本:
將全血收集到含抗血凝劑的管中,根據(jù)標(biāo)本的實際要求選擇 EDTA,檸檬酸鈉或肝素作為抗凝劑,混合 20 min,在 4℃條件下 1000×g 離心 10 min,然后將上清等量分裝于小 EP 管并于-20℃下保存(24小時內(nèi)檢測可放入 2-8℃儲存),避免反復(fù)凍融。
豚鼠趨化因子樣因子(CKLF)酶聯(lián)吸附測定試劑盒核果尾孢Human Anti-AlaRS (Anti-Alanyl-tRNA Synthetase/Anti-PL12-Antibody) ELISA Kit
豚鼠生長分化因子5(GDF5)酶聯(lián)吸附測定試劑盒新月彎孢Human TARS (Threonyl tRNA Synthetase, cytoplasmic) ELISA Kit
豚鼠轉(zhuǎn)錄激活因子6(ATF6)酶聯(lián)吸附測定試劑盒 亞美尼亞小脆柄菇Human GTF2A1 (General Transcription Factor IIA, Polypeptide 1) ELISA Kit
豚鼠I型前膠原羧基端原肽(PICP)酶聯(lián)吸附測定試劑盒潮濕學(xué)校擬諾卡氏Human GUCA2A (Guanylate Cyclase Activator 2A) ELISA Kit
豚鼠半乳凝集素1(GAL1)酶聯(lián)吸附測定試劑盒蒼白桿Human INSL3 (Insulin Like Protein 3) ELISA Kit
豚鼠基質(zhì)金屬蛋白酶12(MMP-12)酶聯(lián)吸附測定試劑盒肉糜 牛源性成分(定性)Human INSL5 (Insulin Like Protein 5) ELISA Kit
豚鼠神經(jīng)營養(yǎng)因子受體3型(NTRK3)酶聯(lián)吸附測定試劑盒島生異擔(dān)子Human iPLA2 (Phospholipidase A2, Calcium Independent) ELISA Kit
豚鼠周期素D3(CCND3)酶聯(lián)吸附測定試劑盒 枯草芽胞桿Human GUCA2B (Guanylate Cyclase Activator 2B) ELISA Kit
豚鼠I型膠原交聯(lián)氨基端肽(NTXI)酶聯(lián)吸附測定試劑盒 灰葡萄孢(灰霉病)Human GZMK (Granzyme K) ELISA Kit
豚鼠擴張性共濟失調(diào)突變因子(ATM)酶聯(lián)吸附測定試劑盒 毛殼Human ALOXE3 (Arachidonate Lipoxygenase 3) ELISA Kit
豚鼠血小板衍生生長因子受體樣蛋白(PDGFRL)酶聯(lián)吸附測定試劑盒紅緣層孔Human CYP26A1 (Cytochrome P450, family 26, subfamily A, polypeptide 1) ELISA Kit
豚鼠糖盞蛋白(GC)酶聯(lián)吸附測定試劑盒馬泰勒蟲(青海湟源株)Human HB (Hemoglobin) ELISA Kit
豚鼠GATA結(jié)合蛋白5(GATA5)酶聯(lián)吸附測定試劑盒絨毛栓Human HCCS (Holocytochrome C Synthase) ELISA Kit
豚鼠纖維蛋白原降解產(chǎn)物(FDP)酶聯(lián)吸附測定試劑盒 短短芽孢桿Human CAMK2α (Calcium/Calmodulin-Dependent Protein Kinase II Alpha) ELISA Kit
豚鼠纖溶抑制因子(TAFI)酶聯(lián)吸附測定試劑盒枯草芽孢桿Human BAG3 (Bcl2 Associated Athanogene 3) ELISA Kit
LF/LTF人乳鐵傳遞蛋白/乳鐵蛋白ELISA方法人類白抗原G抗體(N端)Human SLCO4C1 ELISA Kit二氫辣椒素
人類白抗原G抗體(C端)Human SLFNL1 ELISA Kit王不留行黃酮苷
缺氧誘導(dǎo)基因95抗體Human SLC43A1 ELISA Kit大車前苷
泛素蛋白連接酶E2抗體Human SLCO6A1 ELISA Kit蒺藜
同源盒蛋白HOXC9抗體Human SLC27A3 ELISA Kit依他尼酸
環(huán)化核苷酸調(diào)控陽離子通道蛋白亞型2/4抗體Human SLC30A6 ELISA Kit4-異丁基乙酰苯
轉(zhuǎn)錄因子HELT蛋白抗體Human RHOC(Rho-related GTP-binding protein RhoC) ELISA Kit小鼠胰島素原(PI)Elisa測定試劑盒
轉(zhuǎn)錄因子HES6抗體Human SLC35F2 ELISA Kit小鼠抗心肌抗體(AMA)Elisa測定試劑盒
操作步驟:
實驗開始前,請?zhí)崆芭渲煤盟性噭?,試劑或樣品稀釋時,均需混勻,混勻時盡量避免起泡。每次檢測都應(yīng)該做標(biāo)準(zhǔn)曲線。如樣品濃度過高時,用樣品稀釋液進(jìn)行稀釋,以使樣品符合試劑盒的檢測范圍。
1. 加樣:分別設(shè)空白孔、標(biāo)準(zhǔn)孔、待測樣品孔??瞻卓准訕悠废♂屢?00μl,余孔分別加標(biāo)準(zhǔn)品或待測樣品100μl,注意不要有氣泡,加樣將樣品加于酶標(biāo)板孔底部,盡量不觸及孔壁,輕輕晃動混勻,酶標(biāo)板加上蓋或覆膜,37℃反應(yīng)120分鐘。
為保證實驗結(jié)果有效性,每次實驗請使用新的標(biāo)準(zhǔn)品溶液。
2. 棄去液體,甩干,不用洗滌。每孔加生物素標(biāo)記抗體工作液100μl(取1μl生物素標(biāo)記抗體加99μl生物素標(biāo)記抗體稀釋液的比例配制,輕輕混勻,在使用前一小時內(nèi)配制),37℃,60分鐘。
3. 溫育60分鐘后,棄去孔內(nèi)液體,甩干,洗板3次,每次浸泡1-2分鐘,350μl/每孔,甩干。
4. 每孔加辣根過氧化物酶標(biāo)記親和素工作液(同生物素標(biāo)記抗體工作液)100μl,37℃,60分鐘。
5. 溫育60分鐘后,棄去孔內(nèi)液體,甩干,洗板5次,每次浸泡1-2分鐘,350μl/每孔,甩干。
6. 依序每孔加底物溶液90μl,37℃避光顯色(30分鐘內(nèi),此時肉眼可見標(biāo)準(zhǔn)品的前3-4孔有明顯的梯度藍(lán)色,后3-4孔梯度不明顯,即可終止)。
7. 依序每孔加終止溶液50μl,終止反應(yīng)(此時藍(lán)色立轉(zhuǎn)黃色)。終止液的加入順序應(yīng)盡量與底物液的加入順序相同。為了保證實驗結(jié)果的準(zhǔn)確性,底物反應(yīng)時間到后應(yīng)盡快加入終止液。
8. 用酶聯(lián)儀在450nm波長依序測量各孔的光密度(OD值)。 在加終止液后15分鐘以內(nèi)進(jìn)行檢測。