樣本收集及儲(chǔ)存:
1. 細(xì)胞培養(yǎng)上清:
將細(xì)胞培養(yǎng)基移至無(wú)菌離心管,在 4℃條件下 1000 ×g 離心 10 min,然后將上清等量分裝于小 EP 管并于-20℃下保存(24 小時(shí)內(nèi)檢測(cè)可放入 2-8℃儲(chǔ)存),避免反復(fù)凍融。
2. 血清樣本:
室溫血液自然凝固 20 min 后,在 4℃條件下 1000×g 離心 10 min,然后將上清等量分裝于小 EP 管并于-20℃下保存(24 小時(shí)內(nèi)檢測(cè)可放入 2-8℃儲(chǔ)存),保存過(guò)程中如有沉淀,請(qǐng)?jiān)俅坞x心,避免反復(fù)凍融。
3. 血漿樣本:
將全血收集到含抗血凝劑的管中,根據(jù)標(biāo)本的實(shí)際要求選擇 EDTA,檸檬酸鈉或肝素作為抗凝劑,混合 20 min,在 4℃條件下 1000×g 離心 10 min,然后將上清等量分裝于小 EP 管并于-20℃下保存(24小時(shí)內(nèi)檢測(cè)可放入 2-8℃儲(chǔ)存),避免反復(fù)凍融。
公司產(chǎn)品僅供體外研究使用,不用于臨床診斷!
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產(chǎn)品名稱
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SDH人山梨醇脫氫酶ELISA檢測(cè)試劑盒
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英文名稱
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Human sorbitol dehydrogenase,SDH ELISA Kit
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貨號(hào)
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PH097090
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包裝規(guī)格:液體盒裝 96T/48T
保存條件:2-8℃(長(zhǎng)期不使用時(shí),部分試劑應(yīng)放在-20℃條件下)。
有效期:6個(gè)月
存儲(chǔ)運(yùn)輸:低溫避光,請(qǐng)勿重壓,輕拿輕放(現(xiàn)貨供應(yīng),一般為快遞運(yùn)輸,江浙滬隔天到,外地及偏遠(yuǎn)地方三至五天時(shí)間到貨。)
Elisa試劑盒可測(cè)種屬:人、大鼠、小鼠、兔子、豬、犬、猴、馬、牛、羊、雞、鴨、魚等。
Elisa試劑盒適用范圍:此試劑盒僅用于科研實(shí)驗(yàn),禁用于臨床。
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2400 ng/L
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5 號(hào)標(biāo)準(zhǔn)品
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150μl 的原倍標(biāo)準(zhǔn)品加入 150μl 標(biāo)準(zhǔn)品稀釋液
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1200ng/L
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4 號(hào)標(biāo)準(zhǔn)品
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150μl 的 5 號(hào)標(biāo)準(zhǔn)品加入 150μl 標(biāo)準(zhǔn)品稀釋液
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600ng/L
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3 號(hào)標(biāo)準(zhǔn)品
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150μl 的 4 號(hào)標(biāo)準(zhǔn)品加入 150μl 標(biāo)準(zhǔn)品稀釋液
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300ng/L
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2 號(hào)標(biāo)準(zhǔn)品
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150μl 的 3 號(hào)標(biāo)準(zhǔn)品加入 150μl 標(biāo)準(zhǔn)品稀釋液
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150ng/L
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1 號(hào)標(biāo)準(zhǔn)品
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150μl 的 2 號(hào)標(biāo)準(zhǔn)品加入 150μl 標(biāo)準(zhǔn)品稀釋液
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組成及試劑配制 :
1. 酶聯(lián)板:一塊(96孔)
2. 標(biāo)準(zhǔn)品(凍干品):2瓶,每瓶臨用前以樣品稀釋液稀釋至1ml,蓋好后靜置10分鐘以上,然后反復(fù)顛倒/搓動(dòng)以助溶解,其濃度為100 ng/ml,做系列倍比稀釋(注:不要直接在板中進(jìn)行倍比稀釋)后,分別稀釋成100 ng/ml,50 ng/ml,25 ng/ml,12.5 ng/ml,6.25 ng/ml,3.12 ng/ml,1.56 ng/ml,樣品稀釋液直接作為標(biāo)準(zhǔn)濃度0 ng/ml,臨用前15分鐘內(nèi)配制。
如配制50 ng/ml標(biāo)準(zhǔn)品:取0.5ml (不要少于0.5ml ) 100 ng/ml的上述標(biāo)準(zhǔn)品加入含有0.5ml樣品稀釋液的Eppendorf管中,混勻即可,其余濃度以此類推。
3. 樣品稀釋液:1×20ml/瓶。
4. 檢測(cè)稀釋液A:1×10ml/瓶。
5. 檢測(cè)稀釋液B:1×10ml/瓶。
6. 檢測(cè)溶液A:1×120ul/瓶(1:100)臨用前以檢測(cè)稀釋液A 1:100稀釋,稀釋前根據(jù)預(yù)先計(jì)算好的每次實(shí)驗(yàn)所需的總量配制(100ul/孔),實(shí)際配制時(shí)應(yīng)多配制0.1-0.2ml。如10ul檢測(cè)溶液A加990ul檢測(cè)稀釋液A的比例配制,輕輕混勻,在使用前一小時(shí)內(nèi)配制。
7. 檢測(cè)溶液B:1×120ul/瓶(1:100)臨用前以檢測(cè)稀釋液B 1:100稀釋。稀釋方法同檢測(cè)溶液A。
8. 底物溶液:1×10ml/瓶。
9. 濃洗滌液:1×30ml/瓶,使用時(shí)每瓶用蒸餾水稀釋25倍。
10. 終止液:1×10ml/瓶(2N H2SO4)。

操作步驟:
實(shí)驗(yàn)開始前,請(qǐng)?zhí)崆芭渲煤盟性噭噭┗驑悠废♂寱r(shí),均需混勻,混勻時(shí)盡量避免起泡。每次檢測(cè)都應(yīng)該做標(biāo)準(zhǔn)曲線。如樣品濃度過(guò)高時(shí),用樣品稀釋液進(jìn)行稀釋,以使樣品符合試劑盒的檢測(cè)范圍。
1. 加樣:分別設(shè)空白孔、標(biāo)準(zhǔn)孔、待測(cè)樣品孔。空白孔加樣品稀釋液100μl,余孔分別加標(biāo)準(zhǔn)品或待測(cè)樣品100μl,注意不要有氣泡,加樣將樣品加于酶標(biāo)板孔底部,盡量不觸及孔壁,輕輕晃動(dòng)混勻,酶標(biāo)板加上蓋或覆膜,37℃反應(yīng)120分鐘。
為保證實(shí)驗(yàn)結(jié)果有效性,每次實(shí)驗(yàn)請(qǐng)使用新的標(biāo)準(zhǔn)品溶液。
2. 棄去液體,甩干,不用洗滌。每孔加生物素標(biāo)記抗體工作液100μl(取1μl生物素標(biāo)記抗體加99μl生物素標(biāo)記抗體稀釋液的比例配制,輕輕混勻,在使用前一小時(shí)內(nèi)配制),37℃,60分鐘。
3. 溫育60分鐘后,棄去孔內(nèi)液體,甩干,洗板3次,每次浸泡1-2分鐘,350μl/每孔,甩干。
4. 每孔加辣根過(guò)氧化物酶標(biāo)記親和素工作液(同生物素標(biāo)記抗體工作液)100μl,37℃,60分鐘。
5. 溫育60分鐘后,棄去孔內(nèi)液體,甩干,洗板5次,每次浸泡1-2分鐘,350μl/每孔,甩干。
6. 依序每孔加底物溶液90μl,37℃避光顯色(30分鐘內(nèi),此時(shí)肉眼可見標(biāo)準(zhǔn)品的前3-4孔有明顯的梯度藍(lán)色,后3-4孔梯度不明顯,即可終止)。
7. 依序每孔加終止溶液50μl,終止反應(yīng)(此時(shí)藍(lán)色立轉(zhuǎn)黃色)。終止液的加入順序應(yīng)盡量與底物液的加入順序相同。為了保證實(shí)驗(yàn)結(jié)果的準(zhǔn)確性,底物反應(yīng)時(shí)間到后應(yīng)盡快加入終止液。
8. 用酶聯(lián)儀在450nm波長(zhǎng)依序測(cè)量各孔的光密度(OD值)。 在加終止液后15分鐘以內(nèi)進(jìn)行檢測(cè)。
樣本要求:
1.標(biāo)本采集后盡早進(jìn)行提取,提取按相關(guān)文獻(xiàn)進(jìn)行,提取后應(yīng)盡快進(jìn)行實(shí)驗(yàn)。若不能馬上進(jìn)行試驗(yàn),可將標(biāo)本放于-20℃保存,但應(yīng)避免反復(fù)凍融。
2.不能檢測(cè)含 NaN3 的樣品,因 NaN3 抑制辣根過(guò)氧化物酶的(HRP)活性。
豚鼠胰腺癌標(biāo)志物(CA242)酶聯(lián)吸附測(cè)定試劑盒釀酒酵母D-HMVEC-Cardiac MV Endo Cells Diab TypeI
豚鼠血清淀粉樣蛋白P(SAP)酶聯(lián)吸附測(cè)定試劑盒 黃曲霉HUVEC single donor S-part, EGM-2, amp
豚鼠白分化抗原CD109(CD109)酶聯(lián)吸附測(cè)定試劑盒 奇雄腐霉HMVEC-Bd Bladder MV Endo EGM-2MV cryoamp
豚鼠血小板衍生生長(zhǎng)因子受體α(PDGFRα)酶聯(lián)吸附測(cè)定試劑盒奧氏蜜環(huán)NHOst-Osteoblasts OGM, cryo amp
豚鼠胱天蛋白酶9(CASP9)酶聯(lián)吸附測(cè)定試劑盒 地衣芽孢桿HUVEC-Umbil Vein, Pooled ,EGM, amp
豚鼠II型前膠原氨基端原肽(PIINP)酶聯(lián)吸附測(cè)定試劑盒云芝栓孔 (變色栓)NHCF-A Human Cardiac Fibroblasts-Atrial
豚鼠蛋白酶激活受體3(PAR3)酶聯(lián)吸附測(cè)定試劑盒多汁乳菇NHDF-Ad-Der Fibroblasts FGM-2, cryo amp
豚鼠成纖維生長(zhǎng)因子結(jié)合蛋白1(FGFBP1)酶聯(lián)吸附測(cè)定試劑盒TardiphagaHPAEC-Pulmon. Artery Endo ,EGM-2, amp
豚鼠核孔蛋白98kda(NUP98)酶聯(lián)吸附測(cè)定試劑盒溶淀粉類芽孢桿NHEK-Neo-Kera Pooled KGM, cyro amp
豚鼠三葉因子2(TFF2)酶聯(lián)吸附測(cè)定試劑盒彎孢NHEK-Neo-Kera Pooled KGM-2, cryo amp
豚鼠粒趨化蛋白2(GCP-2)酶聯(lián)吸附測(cè)定試劑盒產(chǎn)紫青霉D-HMVEC-CardiacMV Endo Cells Diab TypeII
豚鼠層粘蛋白(LN)酶聯(lián)吸附測(cè)定試劑盒球孢白僵AoAF-Aortic Adven. Fibro SCGM, cryo amp
豚鼠滑行蛋白β(TXLNb)酶聯(lián)吸附測(cè)定試劑盒Brenneria salicisHSMM-Muscle Myoblasts SkGM-2, cryo amp
豚鼠皮膚T相關(guān)抗原(CLA/CTAGE)酶聯(lián)吸附測(cè)定試劑盒 黃白馬杜拉放線HMVEC-dBlNeo
豚鼠糖蛋白130(gp130)酶聯(lián)吸附測(cè)定試劑盒黑青霉HUVEC-Umbilical Vein Endo ,EGM,cryo amp
SDH人山梨醇脫氫酶ELISA檢測(cè)試劑盒結(jié)合球蛋白β抗體Human STIM2 ELISA Kit獐牙菜苦苷
海馬豐富基因轉(zhuǎn)錄蛋白1抗體Human STARD3NL ELISA Kit何首烏
組蛋白H2AZ抗體Human STEAP4(STEAP family member 4) ELISA Kit夏枯草
熱休克因子2結(jié)合蛋白抗體Human STARD5 ELISA Kit肉蓯蓉
HEATR2蛋白抗體Human STIP1 ELISA Kit江南卷柏
鐵硫簇整合同源物2蛋白抗體Human STEAP3 ELISA Kit槐角
麻疹病血凝素抗體Human STEAP2 ELISA Kit高良姜
同源盒蛋白HOXC5抗體Human STIM1 ELISA Kit紫色姜