樣本收集及儲存:
1. 細胞培養(yǎng)上清:
將細胞培養(yǎng)基移至無菌離心管,在 4℃條件下 1000 ×g 離心 10 min,然后將上清等量分裝于小 EP 管并于-20℃下保存(24 小時內(nèi)檢測可放入 2-8℃儲存),避免反復(fù)凍融。
2. 血清樣本:
室溫血液自然凝固 20 min 后,在 4℃條件下 1000×g 離心 10 min,然后將上清等量分裝于小 EP 管并于-20℃下保存(24 小時內(nèi)檢測可放入 2-8℃儲存),保存過程中如有沉淀,請再次離心,避免反復(fù)凍融。
3. 血漿樣本:
將全血收集到含抗血凝劑的管中,根據(jù)標本的實際要求選擇 EDTA,檸檬酸鈉或肝素作為抗凝劑,混合 20 min,在 4℃條件下 1000×g 離心 10 min,然后將上清等量分裝于小 EP 管并于-20℃下保存(24小時內(nèi)檢測可放入 2-8℃儲存),避免反復(fù)凍融。
公司產(chǎn)品僅供體外研究使用,不用于臨床診斷!
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產(chǎn)品名稱
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DAP/DAP1人死亡相關(guān)蛋白1ELISA方法
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英文名稱
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Human Death-associated protein 1,DAP/DAP1 ELISA kit
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貨號
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PH096982
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包裝規(guī)格:液體盒裝 96T/48T
保存條件:2-8℃(長期不使用時,部分試劑應(yīng)放在-20℃條件下)。
有效期:6個月
存儲運輸:低溫避光,請勿重壓,輕拿輕放(現(xiàn)貨供應(yīng),一般為快遞運輸,江浙滬隔天到,外地及偏遠地方三至五天時間到貨。)
Elisa試劑盒可測種屬:人、大鼠、小鼠、兔子、豬、犬、猴、馬、牛、羊、雞、鴨、魚等。
Elisa試劑盒適用范圍:此試劑盒僅用于科研實驗,禁用于臨床。
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2400 ng/L
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5 號標準品
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150μl 的原倍標準品加入 150μl 標準品稀釋液
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1200ng/L
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4 號標準品
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150μl 的 5 號標準品加入 150μl 標準品稀釋液
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600ng/L
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3 號標準品
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150μl 的 4 號標準品加入 150μl 標準品稀釋液
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300ng/L
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2 號標準品
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150μl 的 3 號標準品加入 150μl 標準品稀釋液
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150ng/L
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1 號標準品
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150μl 的 2 號標準品加入 150μl 標準品稀釋液
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組成及試劑配制 :
1. 酶聯(lián)板:一塊(96孔)
2. 標準品(凍干品):2瓶,每瓶臨用前以樣品稀釋液稀釋至1ml,蓋好后靜置10分鐘以上,然后反復(fù)顛倒/搓動以助溶解,其濃度為100 ng/ml,做系列倍比稀釋(注:不要直接在板中進行倍比稀釋)后,分別稀釋成100 ng/ml,50 ng/ml,25 ng/ml,12.5 ng/ml,6.25 ng/ml,3.12 ng/ml,1.56 ng/ml,樣品稀釋液直接作為標準濃度0 ng/ml,臨用前15分鐘內(nèi)配制。
如配制50 ng/ml標準品:取0.5ml (不要少于0.5ml ) 100 ng/ml的上述標準品加入含有0.5ml樣品稀釋液的Eppendorf管中,混勻即可,其余濃度以此類推。
3. 樣品稀釋液:1×20ml/瓶。
4. 檢測稀釋液A:1×10ml/瓶。
5. 檢測稀釋液B:1×10ml/瓶。
6. 檢測溶液A:1×120ul/瓶(1:100)臨用前以檢測稀釋液A 1:100稀釋,稀釋前根據(jù)預(yù)先計算好的每次實驗所需的總量配制(100ul/孔),實際配制時應(yīng)多配制0.1-0.2ml。如10ul檢測溶液A加990ul檢測稀釋液A的比例配制,輕輕混勻,在使用前一小時內(nèi)配制。
7. 檢測溶液B:1×120ul/瓶(1:100)臨用前以檢測稀釋液B 1:100稀釋。稀釋方法同檢測溶液A。
8. 底物溶液:1×10ml/瓶。
9. 濃洗滌液:1×30ml/瓶,使用時每瓶用蒸餾水稀釋25倍。
10. 終止液:1×10ml/瓶(2N H2SO4)。

操作步驟:
實驗開始前,請?zhí)崆芭渲煤盟性噭?,試劑或樣品稀釋時,均需混勻,混勻時盡量避免起泡。每次檢測都應(yīng)該做標準曲線。如樣品濃度過高時,用樣品稀釋液進行稀釋,以使樣品符合試劑盒的檢測范圍。
1. 加樣:分別設(shè)空白孔、標準孔、待測樣品孔??瞻卓准訕悠废♂屢?00μl,余孔分別加標準品或待測樣品100μl,注意不要有氣泡,加樣將樣品加于酶標板孔底部,盡量不觸及孔壁,輕輕晃動混勻,酶標板加上蓋或覆膜,37℃反應(yīng)120分鐘。
為保證實驗結(jié)果有效性,每次實驗請使用新的標準品溶液。
2. 棄去液體,甩干,不用洗滌。每孔加生物素標記抗體工作液100μl(取1μl生物素標記抗體加99μl生物素標記抗體稀釋液的比例配制,輕輕混勻,在使用前一小時內(nèi)配制),37℃,60分鐘。
3. 溫育60分鐘后,棄去孔內(nèi)液體,甩干,洗板3次,每次浸泡1-2分鐘,350μl/每孔,甩干。
4. 每孔加辣根過氧化物酶標記親和素工作液(同生物素標記抗體工作液)100μl,37℃,60分鐘。
5. 溫育60分鐘后,棄去孔內(nèi)液體,甩干,洗板5次,每次浸泡1-2分鐘,350μl/每孔,甩干。
6. 依序每孔加底物溶液90μl,37℃避光顯色(30分鐘內(nèi),此時肉眼可見標準品的前3-4孔有明顯的梯度藍色,后3-4孔梯度不明顯,即可終止)。
7. 依序每孔加終止溶液50μl,終止反應(yīng)(此時藍色立轉(zhuǎn)黃色)。終止液的加入順序應(yīng)盡量與底物液的加入順序相同。為了保證實驗結(jié)果的準確性,底物反應(yīng)時間到后應(yīng)盡快加入終止液。
8. 用酶聯(lián)儀在450nm波長依序測量各孔的光密度(OD值)。 在加終止液后15分鐘以內(nèi)進行檢測。
樣本要求:
1.標本采集后盡早進行提取,提取按相關(guān)文獻進行,提取后應(yīng)盡快進行實驗。若不能馬上進行試驗,可將標本放于-20℃保存,但應(yīng)避免反復(fù)凍融。
2.不能檢測含 NaN3 的樣品,因 NaN3 抑制辣根過氧化物酶的(HRP)活性。
兔膜聯(lián)蛋白A5(ANXA5 )酶聯(lián)吸附測定試劑盒 仁果殼小圓孢VERSO CDNA KIT
兔果糖二磷酸縮酶C(ALDOC)酶聯(lián)吸附測定試劑盒 嗜熱脂肪地芽孢桿VERSO 1-STEP RT-PCR REDDYMIX
兔血栓烷受體(TP/TXA2R)酶聯(lián)吸附測定試劑盒耐寒短桿10X BUFFER CFR9I
兔性結(jié)合球蛋白(SHBG)酶聯(lián)吸附測定試劑盒黑曲霉10X BUFFER CFR10I
兔C4結(jié)合蛋白(C4BP)酶聯(lián)吸附測定試劑盒 西宮皮生球10X BUFFER ECORI
兔蕈堿型乙酰膽堿受體亞型M3(M-AChR M3)酶聯(lián)吸附測定試劑盒阿魏側(cè)耳10X BUFFER BSP143I
兔脯氨酸/精氨酸豐富端亮氨酸豐富重復(fù)蛋白(PRELP)酶聯(lián)吸附測定試劑盒枯草芽孢桿10X TAQ BUFFER/KCL &15MM MGCL2
兔抗糖脂抗體(AGA)酶聯(lián)吸附測定試劑盒 蘇云金芽孢桿DILUTION BUFFER FOR RE
兔鳥氨酸脫羧酶(ODC)酶聯(lián)吸附測定試劑盒佛雷德里克斯堡假單胞10X BUFFER ECO52I
兔膽堿磷酸甘油酯(PC/CPG)酶聯(lián)吸附測定試劑盒 單胞屬10X BUFFER SDUI, PPU21I
兔Rho家族GTP酶1(RND1)酶聯(lián)吸附測定試劑盒灰略紅鏈霉10X BUFFER SDAI
兔胰島素樣生長因子1受體(IGF1R)酶聯(lián)吸附測定試劑盒大腸埃希氏10X BUFFER EAM1105I
兔轉(zhuǎn)鐵蛋白受體(TFR/CD71)酶聯(lián)吸附測定試劑盒草菇10X BUFFER ECL136II, PACI,SACI
兔肝配蛋白A4 (EFNA4)酶聯(lián)吸附測定試劑盒禿裸鏈霉10X BUF AARI,BPU10I,SCAI,PASI,AJII
兔三葉因子2(TFF2)酶聯(lián)吸附測定試劑盒Actinokineospora10X BUFFER TAQI
DAP/DAP1人死亡相關(guān)蛋白1ELISA方法腺苷酸環(huán)化酶Gα蛋白/Gαs/olf抗體Human VCPIP1 ELISA Kit內(nèi)皮抑素/內(nèi)皮他丁抗體流式組化
周期蛋白G相關(guān)激酶抗體Human VEZT ELISA Kit胰島素樣生長因子結(jié)合蛋白-2抗體流式組化
糖基轉(zhuǎn)移酶8結(jié)構(gòu)域1抗體Human VGLL4 ELISA Kit神經(jīng)生長因子抗體流式組化
環(huán)指蛋白27抗體Human CNDP1(Beta-Ala-His dipeptidase) ELISA Kit蛋白質(zhì)磷酸酶-2A抗體流式組化Anti-PP-2A
透明質(zhì)酸結(jié)合蛋白1抗體Human VILIP 3 ELISA KitD-鳥氨酸鹽酸鹽
G蛋白偶聯(lián)受體激酶6抗體Human VMAT2 ELISA Kitβ-葡萄糖苷酶
Rho GTP酶激活蛋白26抗體Human VMA21 ELISA Kit磷酸葡萄糖變位酶
G蛋白α抑制蛋白1抗體Human VASH2(Vasohibin-2) ELISA Kit甘油醛-3-磷酸脫氫酶