樣本收集及儲(chǔ)存:
1. 細(xì)胞培養(yǎng)上清:
將細(xì)胞培養(yǎng)基移至無菌離心管,在 4℃條件下 1000 ×g 離心 10 min,然后將上清等量分裝于小 EP 管并于-20℃下保存(24 小時(shí)內(nèi)檢測可放入 2-8℃儲(chǔ)存),避免反復(fù)凍融。
2. 血清樣本:
室溫血液自然凝固 20 min 后,在 4℃條件下 1000×g 離心 10 min,然后將上清等量分裝于小 EP 管并于-20℃下保存(24 小時(shí)內(nèi)檢測可放入 2-8℃儲(chǔ)存),保存過程中如有沉淀,請(qǐng)?jiān)俅坞x心,避免反復(fù)凍融。
3. 血漿樣本:
將全血收集到含抗血凝劑的管中,根據(jù)標(biāo)本的實(shí)際要求選擇 EDTA,檸檬酸鈉或肝素作為抗凝劑,混合 20 min,在 4℃條件下 1000×g 離心 10 min,然后將上清等量分裝于小 EP 管并于-20℃下保存(24小時(shí)內(nèi)檢測可放入 2-8℃儲(chǔ)存),避免反復(fù)凍融。
公司產(chǎn)品僅供體外研究使用,不用于臨床診斷!
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產(chǎn)品名稱
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BH4人四氫生物蝶呤ELISA檢測試劑盒
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英文名稱
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Human tetrahydrobiopterin,BH4 ELISA Kit
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貨號(hào)
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PH096980
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包裝規(guī)格:液體盒裝 96T/48T
保存條件:2-8℃(長期不使用時(shí),部分試劑應(yīng)放在-20℃條件下)。
有效期:6個(gè)月
存儲(chǔ)運(yùn)輸:低溫避光,請(qǐng)勿重壓,輕拿輕放(現(xiàn)貨供應(yīng),一般為快遞運(yùn)輸,江浙滬隔天到,外地及偏遠(yuǎn)地方三至五天時(shí)間到貨。)
Elisa試劑盒可測種屬:人、大鼠、小鼠、兔子、豬、犬、猴、馬、牛、羊、雞、鴨、魚等。
Elisa試劑盒適用范圍:此試劑盒僅用于科研實(shí)驗(yàn),禁用于臨床。
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2400 ng/L
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5 號(hào)標(biāo)準(zhǔn)品
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150μl 的原倍標(biāo)準(zhǔn)品加入 150μl 標(biāo)準(zhǔn)品稀釋液
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1200ng/L
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4 號(hào)標(biāo)準(zhǔn)品
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150μl 的 5 號(hào)標(biāo)準(zhǔn)品加入 150μl 標(biāo)準(zhǔn)品稀釋液
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600ng/L
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3 號(hào)標(biāo)準(zhǔn)品
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150μl 的 4 號(hào)標(biāo)準(zhǔn)品加入 150μl 標(biāo)準(zhǔn)品稀釋液
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300ng/L
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2 號(hào)標(biāo)準(zhǔn)品
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150μl 的 3 號(hào)標(biāo)準(zhǔn)品加入 150μl 標(biāo)準(zhǔn)品稀釋液
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150ng/L
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1 號(hào)標(biāo)準(zhǔn)品
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150μl 的 2 號(hào)標(biāo)準(zhǔn)品加入 150μl 標(biāo)準(zhǔn)品稀釋液
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組成及試劑配制 :
1. 酶聯(lián)板:一塊(96孔)
2. 標(biāo)準(zhǔn)品(凍干品):2瓶,每瓶臨用前以樣品稀釋液稀釋至1ml,蓋好后靜置10分鐘以上,然后反復(fù)顛倒/搓動(dòng)以助溶解,其濃度為100 ng/ml,做系列倍比稀釋(注:不要直接在板中進(jìn)行倍比稀釋)后,分別稀釋成100 ng/ml,50 ng/ml,25 ng/ml,12.5 ng/ml,6.25 ng/ml,3.12 ng/ml,1.56 ng/ml,樣品稀釋液直接作為標(biāo)準(zhǔn)濃度0 ng/ml,臨用前15分鐘內(nèi)配制。
如配制50 ng/ml標(biāo)準(zhǔn)品:取0.5ml (不要少于0.5ml ) 100 ng/ml的上述標(biāo)準(zhǔn)品加入含有0.5ml樣品稀釋液的Eppendorf管中,混勻即可,其余濃度以此類推。
3. 樣品稀釋液:1×20ml/瓶。
4. 檢測稀釋液A:1×10ml/瓶。
5. 檢測稀釋液B:1×10ml/瓶。
6. 檢測溶液A:1×120ul/瓶(1:100)臨用前以檢測稀釋液A 1:100稀釋,稀釋前根據(jù)預(yù)先計(jì)算好的每次實(shí)驗(yàn)所需的總量配制(100ul/孔),實(shí)際配制時(shí)應(yīng)多配制0.1-0.2ml。如10ul檢測溶液A加990ul檢測稀釋液A的比例配制,輕輕混勻,在使用前一小時(shí)內(nèi)配制。
7. 檢測溶液B:1×120ul/瓶(1:100)臨用前以檢測稀釋液B 1:100稀釋。稀釋方法同檢測溶液A。
8. 底物溶液:1×10ml/瓶。
9. 濃洗滌液:1×30ml/瓶,使用時(shí)每瓶用蒸餾水稀釋25倍。
10. 終止液:1×10ml/瓶(2N H2SO4)。

操作步驟:
實(shí)驗(yàn)開始前,請(qǐng)?zhí)崆芭渲煤盟性噭噭┗驑悠废♂寱r(shí),均需混勻,混勻時(shí)盡量避免起泡。每次檢測都應(yīng)該做標(biāo)準(zhǔn)曲線。如樣品濃度過高時(shí),用樣品稀釋液進(jìn)行稀釋,以使樣品符合試劑盒的檢測范圍。
1. 加樣:分別設(shè)空白孔、標(biāo)準(zhǔn)孔、待測樣品孔。空白孔加樣品稀釋液100μl,余孔分別加標(biāo)準(zhǔn)品或待測樣品100μl,注意不要有氣泡,加樣將樣品加于酶標(biāo)板孔底部,盡量不觸及孔壁,輕輕晃動(dòng)混勻,酶標(biāo)板加上蓋或覆膜,37℃反應(yīng)120分鐘。
為保證實(shí)驗(yàn)結(jié)果有效性,每次實(shí)驗(yàn)請(qǐng)使用新的標(biāo)準(zhǔn)品溶液。
2. 棄去液體,甩干,不用洗滌。每孔加生物素標(biāo)記抗體工作液100μl(取1μl生物素標(biāo)記抗體加99μl生物素標(biāo)記抗體稀釋液的比例配制,輕輕混勻,在使用前一小時(shí)內(nèi)配制),37℃,60分鐘。
3. 溫育60分鐘后,棄去孔內(nèi)液體,甩干,洗板3次,每次浸泡1-2分鐘,350μl/每孔,甩干。
4. 每孔加辣根過氧化物酶標(biāo)記親和素工作液(同生物素標(biāo)記抗體工作液)100μl,37℃,60分鐘。
5. 溫育60分鐘后,棄去孔內(nèi)液體,甩干,洗板5次,每次浸泡1-2分鐘,350μl/每孔,甩干。
6. 依序每孔加底物溶液90μl,37℃避光顯色(30分鐘內(nèi),此時(shí)肉眼可見標(biāo)準(zhǔn)品的前3-4孔有明顯的梯度藍(lán)色,后3-4孔梯度不明顯,即可終止)。
7. 依序每孔加終止溶液50μl,終止反應(yīng)(此時(shí)藍(lán)色立轉(zhuǎn)黃色)。終止液的加入順序應(yīng)盡量與底物液的加入順序相同。為了保證實(shí)驗(yàn)結(jié)果的準(zhǔn)確性,底物反應(yīng)時(shí)間到后應(yīng)盡快加入終止液。
8. 用酶聯(lián)儀在450nm波長依序測量各孔的光密度(OD值)。 在加終止液后15分鐘以內(nèi)進(jìn)行檢測。
樣本要求:
1.標(biāo)本采集后盡早進(jìn)行提取,提取按相關(guān)文獻(xiàn)進(jìn)行,提取后應(yīng)盡快進(jìn)行實(shí)驗(yàn)。若不能馬上進(jìn)行試驗(yàn),可將標(biāo)本放于-20℃保存,但應(yīng)避免反復(fù)凍融。
2.不能檢測含 NaN3 的樣品,因 NaN3 抑制辣根過氧化物酶的(HRP)活性。
兔生長因子受體結(jié)合蛋白10(Grb10)酶聯(lián)吸附測定試劑盒環(huán)狀芽胞桿Brefeldin A
兔不均一核糖核蛋白U (HNRPU)酶聯(lián)吸附測定試劑盒耐寒短桿Cyclosporin A
兔骨成型蛋白受體II(BMPR2)酶聯(lián)吸附測定試劑盒 釀酒酵母FK-506
兔原鈣黏素β2(PCDHβ2)酶聯(lián)吸附測定試劑盒 紅根須腹Cleaved Caspase-3 (Asp175) (5A1E) Rabbit mAb (PE Conjugate)
兔載脂蛋白C2(ApoC2)酶聯(lián)吸附測定試劑盒 毛頭鬼傘(雞腿菇)Presenilin 2 (D30G3) Rabbit mAb
兔神經(jīng)膠質(zhì)纖維酸性蛋白(GFAP)酶聯(lián)吸附測定試劑盒沙漠畢赤酵母Presenilin 2 (D30G3) Rabbit mAb
兔粘蛋白4(MUC4)酶聯(lián)吸附測定試劑盒草假單胞Atg5 (D5G3) Rabbit mAb
兔鐵調(diào)素(Hepc)酶聯(lián)吸附測定試劑盒扶桑本森頓酵母CD14 (61D3) Mouse mAb (PerCP-Cy5.5® Conjugate)
兔凝血因子XIII B多肽(F13B)酶聯(lián)吸附測定試劑盒 串珠鐮孢CD45 (30-F11) Rat mAb (redFluor? 710 Conjugate)
兔肌營養(yǎng)**蛋白關(guān)聯(lián)糖蛋白1(DAG1)酶聯(lián)吸附測定試劑盒 鞘脂屬Phospho-Stat6 (Tyr641) (D8S9Y) Rabbit mAb (PE Conjugate)
兔甘氨酰tRNA合成酶(GARS)酶聯(lián)吸附測定試劑盒 植物乳桿LysRS (D16D1) Rabbit mAb
兔視黃結(jié)合蛋白4(RBP4)酶聯(lián)吸附測定試劑盒慢生根瘤His-Tag (27E8) Mouse mAb (HRP Conjugate)
兔大腦脂肪酸結(jié)合蛋白7(FABP7)酶聯(lián)吸附測定試劑盒裂褶PTMScan® IAP Buffer (10X)
兔窖蛋白(Cav-1)酶聯(lián)吸附測定試劑盒 假蜜環(huán)(蜜環(huán)、小蜜環(huán)、榛蘑)CD3ε (D4V8L) Rabbit mAb
兔CCAAT增強(qiáng)子結(jié)合蛋白γ(C/EBPγ)酶聯(lián)吸附測定試劑盒 羅輪隱球酵母CD3ε (D4V8L) Rabbit mAb
BH4人四氫生物蝶呤ELISA檢測試劑盒β半乳糖苷酶1樣蛋白3抗體Human VTA1 ELISA Kit美洛昔康(HPLC法)
糖皮質(zhì)誘導(dǎo)轉(zhuǎn)錄蛋白1抗體Human VPS24 ELISA Kit丁二酸洛沙平(琥珀酸洛沙平)
腦膠質(zhì)瘤發(fā)病相關(guān)蛋白2抗體Human VPS18 ELISA Kit谷氨酰
神經(jīng)節(jié)苷脂誘導(dǎo)分化相關(guān)蛋白1抗體Human VPS28 ELISA Kit可的松
G蛋白偶聯(lián)受體18抗體Human VPS28 ELISA Kit皂角LAMP鑒定試劑盒
G蛋白偶聯(lián)受體119抗體Human VPS33A ELISA Kit人靶向核糖核酸酶(TR)Elisa測定試劑盒
G蛋白偶聯(lián)受體88抗體Human VN1R4 ELISA Kit人脫氧尿三磷酸(DUTP)Elisa測定試劑盒
G蛋白偶聯(lián)受體125抗體Human VMO1 ELISA Kit小鼠血管內(nèi)皮粘附分子1(VCAM-1/CD106)Elisa測定試劑盒