樣本收集及儲存:
1. 細(xì)胞培養(yǎng)上清:
將細(xì)胞培養(yǎng)基移至無菌離心管,在 4℃條件下 1000 ×g 離心 10 min,然后將上清等量分裝于小 EP 管并于-20℃下保存(24 小時內(nèi)檢測可放入 2-8℃儲存),避免反復(fù)凍融。
2. 血清樣本:
室溫血液自然凝固 20 min 后,在 4℃條件下 1000×g 離心 10 min,然后將上清等量分裝于小 EP 管并于-20℃下保存(24 小時內(nèi)檢測可放入 2-8℃儲存),保存過程中如有沉淀,請再次離心,避免反復(fù)凍融。
3. 血漿樣本:
將全血收集到含抗血凝劑的管中,根據(jù)標(biāo)本的實(shí)際要求選擇 EDTA,檸檬酸鈉或肝素作為抗凝劑,混合 20 min,在 4℃條件下 1000×g 離心 10 min,然后將上清等量分裝于小 EP 管并于-20℃下保存(24小時內(nèi)檢測可放入 2-8℃儲存),避免反復(fù)凍融。
公司產(chǎn)品僅供體外研究使用,不用于臨床診斷!
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產(chǎn)品名稱
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MPO人髓過氧化物酶ELISA檢測試劑盒
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英文名稱
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Human myeloperoxidase,MPO ELISA Kit
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貨號
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PH096972
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包裝規(guī)格:液體盒裝 96T/48T
保存條件:2-8℃(長期不使用時,部分試劑應(yīng)放在-20℃條件下)。
有效期:6個月
存儲運(yùn)輸:低溫避光,請勿重壓,輕拿輕放(現(xiàn)貨供應(yīng),一般為快遞運(yùn)輸,江浙滬隔天到,外地及偏遠(yuǎn)地方三至五天時間到貨。)
Elisa試劑盒可測種屬:人、大鼠、小鼠、兔子、豬、犬、猴、馬、牛、羊、雞、鴨、魚等。
Elisa試劑盒適用范圍:此試劑盒僅用于科研實(shí)驗(yàn),禁用于臨床。
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2400 ng/L
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5 號標(biāo)準(zhǔn)品
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150μl 的原倍標(biāo)準(zhǔn)品加入 150μl 標(biāo)準(zhǔn)品稀釋液
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1200ng/L
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4 號標(biāo)準(zhǔn)品
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150μl 的 5 號標(biāo)準(zhǔn)品加入 150μl 標(biāo)準(zhǔn)品稀釋液
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600ng/L
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3 號標(biāo)準(zhǔn)品
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150μl 的 4 號標(biāo)準(zhǔn)品加入 150μl 標(biāo)準(zhǔn)品稀釋液
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300ng/L
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2 號標(biāo)準(zhǔn)品
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150μl 的 3 號標(biāo)準(zhǔn)品加入 150μl 標(biāo)準(zhǔn)品稀釋液
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150ng/L
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1 號標(biāo)準(zhǔn)品
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150μl 的 2 號標(biāo)準(zhǔn)品加入 150μl 標(biāo)準(zhǔn)品稀釋液
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組成及試劑配制 :
1. 酶聯(lián)板:一塊(96孔)
2. 標(biāo)準(zhǔn)品(凍干品):2瓶,每瓶臨用前以樣品稀釋液稀釋至1ml,蓋好后靜置10分鐘以上,然后反復(fù)顛倒/搓動以助溶解,其濃度為100 ng/ml,做系列倍比稀釋(注:不要直接在板中進(jìn)行倍比稀釋)后,分別稀釋成100 ng/ml,50 ng/ml,25 ng/ml,12.5 ng/ml,6.25 ng/ml,3.12 ng/ml,1.56 ng/ml,樣品稀釋液直接作為標(biāo)準(zhǔn)濃度0 ng/ml,臨用前15分鐘內(nèi)配制。
如配制50 ng/ml標(biāo)準(zhǔn)品:取0.5ml (不要少于0.5ml ) 100 ng/ml的上述標(biāo)準(zhǔn)品加入含有0.5ml樣品稀釋液的Eppendorf管中,混勻即可,其余濃度以此類推。
3. 樣品稀釋液:1×20ml/瓶。
4. 檢測稀釋液A:1×10ml/瓶。
5. 檢測稀釋液B:1×10ml/瓶。
6. 檢測溶液A:1×120ul/瓶(1:100)臨用前以檢測稀釋液A 1:100稀釋,稀釋前根據(jù)預(yù)先計算好的每次實(shí)驗(yàn)所需的總量配制(100ul/孔),實(shí)際配制時應(yīng)多配制0.1-0.2ml。如10ul檢測溶液A加990ul檢測稀釋液A的比例配制,輕輕混勻,在使用前一小時內(nèi)配制。
7. 檢測溶液B:1×120ul/瓶(1:100)臨用前以檢測稀釋液B 1:100稀釋。稀釋方法同檢測溶液A。
8. 底物溶液:1×10ml/瓶。
9. 濃洗滌液:1×30ml/瓶,使用時每瓶用蒸餾水稀釋25倍。
10. 終止液:1×10ml/瓶(2N H2SO4)。

操作步驟:
實(shí)驗(yàn)開始前,請?zhí)崆芭渲煤盟性噭?,試劑或樣品稀釋時,均需混勻,混勻時盡量避免起泡。每次檢測都應(yīng)該做標(biāo)準(zhǔn)曲線。如樣品濃度過高時,用樣品稀釋液進(jìn)行稀釋,以使樣品符合試劑盒的檢測范圍。
1. 加樣:分別設(shè)空白孔、標(biāo)準(zhǔn)孔、待測樣品孔??瞻卓准訕悠废♂屢?00μl,余孔分別加標(biāo)準(zhǔn)品或待測樣品100μl,注意不要有氣泡,加樣將樣品加于酶標(biāo)板孔底部,盡量不觸及孔壁,輕輕晃動混勻,酶標(biāo)板加上蓋或覆膜,37℃反應(yīng)120分鐘。
為保證實(shí)驗(yàn)結(jié)果有效性,每次實(shí)驗(yàn)請使用新的標(biāo)準(zhǔn)品溶液。
2. 棄去液體,甩干,不用洗滌。每孔加生物素標(biāo)記抗體工作液100μl(取1μl生物素標(biāo)記抗體加99μl生物素標(biāo)記抗體稀釋液的比例配制,輕輕混勻,在使用前一小時內(nèi)配制),37℃,60分鐘。
3. 溫育60分鐘后,棄去孔內(nèi)液體,甩干,洗板3次,每次浸泡1-2分鐘,350μl/每孔,甩干。
4. 每孔加辣根過氧化物酶標(biāo)記親和素工作液(同生物素標(biāo)記抗體工作液)100μl,37℃,60分鐘。
5. 溫育60分鐘后,棄去孔內(nèi)液體,甩干,洗板5次,每次浸泡1-2分鐘,350μl/每孔,甩干。
6. 依序每孔加底物溶液90μl,37℃避光顯色(30分鐘內(nèi),此時肉眼可見標(biāo)準(zhǔn)品的前3-4孔有明顯的梯度藍(lán)色,后3-4孔梯度不明顯,即可終止)。
7. 依序每孔加終止溶液50μl,終止反應(yīng)(此時藍(lán)色立轉(zhuǎn)黃色)。終止液的加入順序應(yīng)盡量與底物液的加入順序相同。為了保證實(shí)驗(yàn)結(jié)果的準(zhǔn)確性,底物反應(yīng)時間到后應(yīng)盡快加入終止液。
8. 用酶聯(lián)儀在450nm波長依序測量各孔的光密度(OD值)。 在加終止液后15分鐘以內(nèi)進(jìn)行檢測。
樣本要求:
1.標(biāo)本采集后盡早進(jìn)行提取,提取按相關(guān)文獻(xiàn)進(jìn)行,提取后應(yīng)盡快進(jìn)行實(shí)驗(yàn)。若不能馬上進(jìn)行試驗(yàn),可將標(biāo)本放于-20℃保存,但應(yīng)避免反復(fù)凍融。
2.不能檢測含 NaN3 的樣品,因 NaN3 抑制辣根過氧化物酶的(HRP)活性。
兔腸三葉肽因子3(TFF3)酶聯(lián)吸附測定試劑盒球孢白僵Pro-Apoptosis Bcl-2 Family Antibody Sampler Kit II
兔X型膠原(COL10)酶聯(lián)吸附測定試劑盒芽孢桿屬GSK-3β (3D10) Mouse mAb
兔纖溶酶原激活物抑制因子2(PAI2)酶聯(lián)吸附測定試劑盒木素木霉NMNAT1 (D7O4N) Rabbit mAb
兔STAT蛋白抑制因子1(PIAS1)酶聯(lián)吸附測定試劑盒絨邊乳菇E-Cadherin (24E10) Rabbit mAb (Alexa Fluor® 647 Conjugate)
兔早期生長應(yīng)答蛋白4(EGR4)酶聯(lián)吸附測定試劑盒絳紅產(chǎn)色小單胞FoxP3 (D2W8E?) Rabbit mAb (IHC Specific)
兔肌球蛋白重鏈1(MYH1)酶聯(lián)吸附測定試劑盒 乳酸乳球乳亞種ID3 (D16D10) Rabbit mAb
兔內(nèi)皮素1(ET-1)酶聯(lián)吸附測定試劑盒枯斑擬盤多毛孢AMPK Subunit Antibody Sampler Kit
兔前列腺素內(nèi)過氧化物合酶1(PTGS1)酶聯(lián)吸附測定試劑盒石蕊殺素鏈霉Bisindolylmaleimide I
兔孕相關(guān)內(nèi)膜蛋白(PAEP)酶聯(lián)吸附測定試劑盒 日本裂殖酵母SimpleChIP® Human ZNF19 Intron 3 Primers
兔顆粒酶K(GZMK)酶聯(lián)吸附測定試劑盒 尖角凸臍蠕孢Tyrphostin AG 1478
兔剪切修復(fù)交叉互補(bǔ)基因1(ERCC1)酶聯(lián)吸附測定試劑盒 真姬菇Geldanamycin
兔趨化因子C-C-基元配體1(CCL1)酶聯(lián)吸附測定試劑盒總狀共頭霉H-89
兔血小板衍生生長因子AB(PDGF-AB)酶聯(lián)吸附測定試劑盒球形芽孢桿Coronin 1A (D6K5B) XP® Rabbit mAb (PE Conjugate)
兔纖維膠凝蛋白1(FCN1)酶聯(lián)吸附測定試劑盒 固氮Di-Methyl-Histone H3 Antibody Sampler Kit
兔優(yōu)球蛋白(EL)酶聯(lián)吸附測定試劑盒 尖孢鐮孢Phospho-Histone H3 (Mitotic Marker) Antibody Sampler Kit
MPO人髓過氧化物酶ELISA檢測試劑盒銜接蛋白γ/γ1-Adaptin抗體Human WDR92 ELISA Kit氟苯尼考
半乳糖瓦爾登轉(zhuǎn)化酶抗體Human WIT1 ELISA Kit正磷酸鐵二水物
半乳糖凝集素10抗體Human WNK4 ELISA KitDL-蘋果酸鈣
半乳糖激酶2抗體Human WNT3(Proto-oncogene Wnt-3) ELISA Kit3-氯苯甲酸
半乳糖脫氫酶抗體Human WRAP53 ELISA Kit四氧嘧啶
硫酸軟骨素裂解酶抗體Human WRN ELISA Kit補(bǔ)骨脂素
多肽N-乙酰氨基半乳糖轉(zhuǎn)移酶10抗體Human WDR81 ELISA Kitα-香附酮
多肽N-乙酰氨基半乳糖轉(zhuǎn)移酶11抗體Human WSB1 ELISA Kit五味子酯甲