公司產(chǎn)品僅供體外研究使用,不用于臨床診斷!
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產(chǎn)品名稱
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HPA人乙酰肝素酶ELISA檢測試劑盒
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英文名稱
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Human Heparanase,HPA ELISA Kit
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貨號(hào)
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PH096533
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包裝規(guī)格:液體盒裝 96T/48T
保存條件:2-8℃(長期不使用時(shí),部分試劑應(yīng)放在-20℃條件下)。
有效期:6個(gè)月
存儲(chǔ)運(yùn)輸:低溫避光,請(qǐng)勿重壓,輕拿輕放(現(xiàn)貨供應(yīng),一般為快遞運(yùn)輸,江浙滬隔天到,外地及偏遠(yuǎn)地方三至五天時(shí)間到貨。)
Elisa試劑盒可測種屬:人、大鼠、小鼠、兔子、豬、犬、猴、馬、牛、羊、雞、鴨、魚等。
Elisa試劑盒適用范圍:此試劑盒僅用于科研實(shí)驗(yàn),禁用于臨床。
樣本要求:
1.標(biāo)本采集后盡早進(jìn)行提取,提取按相關(guān)文獻(xiàn)進(jìn)行,提取后應(yīng)盡快進(jìn)行實(shí)驗(yàn)。若不能馬上進(jìn)行試驗(yàn),可將標(biāo)本放于-20℃保存,但應(yīng)避免反復(fù)凍融。
2.不能檢測含 NaN3 的樣品,因 NaN3 抑制辣根過氧化物酶的(HRP)活性。
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2400 ng/L
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5 號(hào)標(biāo)準(zhǔn)品
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150μl 的原倍標(biāo)準(zhǔn)品加入 150μl 標(biāo)準(zhǔn)品稀釋液
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1200ng/L
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4 號(hào)標(biāo)準(zhǔn)品
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150μl 的 5 號(hào)標(biāo)準(zhǔn)品加入 150μl 標(biāo)準(zhǔn)品稀釋液
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600ng/L
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3 號(hào)標(biāo)準(zhǔn)品
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150μl 的 4 號(hào)標(biāo)準(zhǔn)品加入 150μl 標(biāo)準(zhǔn)品稀釋液
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300ng/L
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2 號(hào)標(biāo)準(zhǔn)品
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150μl 的 3 號(hào)標(biāo)準(zhǔn)品加入 150μl 標(biāo)準(zhǔn)品稀釋液
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150ng/L
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1 號(hào)標(biāo)準(zhǔn)品
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150μl 的 2 號(hào)標(biāo)準(zhǔn)品加入 150μl 標(biāo)準(zhǔn)品稀釋液
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組成及試劑配制 :
1. 酶聯(lián)板:一塊(96孔)
2. 標(biāo)準(zhǔn)品(凍干品):2瓶,每瓶臨用前以樣品稀釋液稀釋至1ml,蓋好后靜置10分鐘以上,然后反復(fù)顛倒/搓動(dòng)以助溶解,其濃度為100 ng/ml,做系列倍比稀釋(注:不要直接在板中進(jìn)行倍比稀釋)后,分別稀釋成100 ng/ml,50 ng/ml,25 ng/ml,12.5 ng/ml,6.25 ng/ml,3.12 ng/ml,1.56 ng/ml,樣品稀釋液直接作為標(biāo)準(zhǔn)濃度0 ng/ml,臨用前15分鐘內(nèi)配制。
如配制50 ng/ml標(biāo)準(zhǔn)品:取0.5ml (不要少于0.5ml ) 100 ng/ml的上述標(biāo)準(zhǔn)品加入含有0.5ml樣品稀釋液的Eppendorf管中,混勻即可,其余濃度以此類推。
3. 樣品稀釋液:1×20ml/瓶。
4. 檢測稀釋液A:1×10ml/瓶。
5. 檢測稀釋液B:1×10ml/瓶。
6. 檢測溶液A:1×120ul/瓶(1:100)臨用前以檢測稀釋液A 1:100稀釋,稀釋前根據(jù)預(yù)先計(jì)算好的每次實(shí)驗(yàn)所需的總量配制(100ul/孔),實(shí)際配制時(shí)應(yīng)多配制0.1-0.2ml。如10ul檢測溶液A加990ul檢測稀釋液A的比例配制,輕輕混勻,在使用前一小時(shí)內(nèi)配制。
7. 檢測溶液B:1×120ul/瓶(1:100)臨用前以檢測稀釋液B 1:100稀釋。稀釋方法同檢測溶液A。
8. 底物溶液:1×10ml/瓶。
9. 濃洗滌液:1×30ml/瓶,使用時(shí)每瓶用蒸餾水稀釋25倍。
10. 終止液:1×10ml/瓶(2N H2SO4)。

樣本收集及儲(chǔ)存:
1. 細(xì)胞培養(yǎng)上清:
將細(xì)胞培養(yǎng)基移至無菌離心管,在 4℃條件下 1000 ×g 離心 10 min,然后將上清等量分裝于小 EP 管并于-20℃下保存(24 小時(shí)內(nèi)檢測可放入 2-8℃儲(chǔ)存),避免反復(fù)凍融。
2. 血清樣本:
室溫血液自然凝固 20 min 后,在 4℃條件下 1000×g 離心 10 min,然后將上清等量分裝于小 EP 管并于-20℃下保存(24 小時(shí)內(nèi)檢測可放入 2-8℃儲(chǔ)存),保存過程中如有沉淀,請(qǐng)?jiān)俅坞x心,避免反復(fù)凍融。
3. 血漿樣本:
將全血收集到含抗血凝劑的管中,根據(jù)標(biāo)本的實(shí)際要求選擇 EDTA,檸檬酸鈉或肝素作為抗凝劑,混合 20 min,在 4℃條件下 1000×g 離心 10 min,然后將上清等量分裝于小 EP 管并于-20℃下保存(24小時(shí)內(nèi)檢測可放入 2-8℃儲(chǔ)存),避免反復(fù)凍融。
小鼠穿孔蛋白/穿孔素1(PRF1)酶聯(lián)吸附測定試劑盒卡坦正青霉Calreticulin Antibody
小鼠過氧化物酶膜蛋白3(PMP3)酶聯(lián)吸附測定試劑盒摩洛哥芽孢桿VEGF Receptor 1 Antibody
小鼠過氧化物酶體增殖因子活化受體γ( PPAR-γ)酶聯(lián)吸附測定試劑盒熱帶假絲酵母FGF Receptor 4 Antibody
小鼠過氧化物酶體增殖物激活受體α(PPAR-α)酶聯(lián)吸附測定試劑盒 發(fā)狀孢囊游動(dòng)放線CHOP (L63F7) Mouse mAb
小鼠百日咳病IgA(PT-IgA)酶聯(lián)吸附測定試劑盒秦氏蜜環(huán)CHOP (L63F7) Mouse mAb
小鼠磷脂酰肌抗體IgG/IgM(PI Ab-IgG/IgM)酶聯(lián)吸附測定試劑盒灰耳擔(dān)布勒酵母p18 INK4C (DCS118) Mouse mAb
小鼠磷脂酰絲氨酸(PS)酶聯(lián)吸附測定試劑盒 巴氏醋桿羅旺亞種p18 INK4C (DCS118) Mouse mAb
小鼠磷酸化蛋白激酶C(P-PKC)酶聯(lián)吸附測定試劑盒 傘枝犁頭霉Argonaute 2 (C34C6) Rabbit mAb
小鼠磷酸化外信號(hào)調(diào)節(jié)激酶(pERK)酶聯(lián)吸附測定試劑盒 沙漠畢赤酵母Argonaute 2 (C34C6) Rabbit mAb
小鼠磷酸肌3激酶2a(PI3K2a)酶聯(lián)吸附測定試劑盒黑曲霉Bim (C34C5) Rabbit mAb (Alexa Fluor® 700 Conjugate)
小鼠磷脂酶A1(PL-A1)酶聯(lián)吸附測定試劑盒葡萄座腔CTCF Antibody
小鼠磷脂酶A2激活蛋白(PLAA)酶聯(lián)吸附測定試劑盒芽孢桿屬Phospho-YB1 (Ser102) (C34A2) Rabbit mAb
小鼠低密度脂蛋白受體(LDLR)酶聯(lián)吸附測定試劑盒短芽孢桿IQGAP1 (D6E3J) Rabbit mAb
小鼠磷脂酶Cg1(PLCg1)酶聯(lián)吸附測定試劑盒仙臺(tái)鏈霉Di-Methyl-Histone H3 (Lys36) (C75H12) Rabbit mAb
小鼠磷酸肌3激酶(PI3K)酶聯(lián)吸附測定試劑盒阪崎克羅諾桿Di-Methyl-Histone H3 (Lys36) (C75H12) Rabbit mAb
HPA人乙酰肝素酶ELISA檢測試劑盒幾丁質(zhì)酶3樣蛋白3抗體Human EFHD1 ELISA Kit人電子轉(zhuǎn)移黃素蛋白β肽(ETFB)ELISA試劑盒,
趨化素樣因子超家族成員2抗體Human EIF3C ELISA Kit人巨噬激蛋白(MSP)ELISA試劑盒,
趨化素樣因子超家族成員2亞型1抗體Human EFTUD1 ELISA Kit小鼠巨噬集落激因子(M-CSF)ELISA試劑盒,
18號(hào)染色體開放閱讀框1抗體Human EFS ELISA Kit小鼠L苯丙氨酸解氨酶(PAL)ELISA試劑盒,
色素c氧化酶VIIA亞型2抗體Human EFTUD2 ELISA Kit小鼠乳鐵傳遞蛋白/乳鐵蛋白(LF/LTF)ELISA試劑盒,
鈣離子通道a1F亞型抗體Human EFHA1 ELISA Kit小鼠孕/孕酮(PROG)ELISA試劑盒,
鈣調(diào)磷酸酶B亞基B1抗體Human EFHC1 ELISA Kit小鼠甲基化酶(Methylase)ELISA試劑盒,
鈣調(diào)蛋白激酶激酶α抗體CaMKKαHuman EIF1 ELISA Kit小鼠促甲狀腺素釋放(TRH)ELISA試劑盒,
操作步驟:
實(shí)驗(yàn)開始前,請(qǐng)?zhí)崆芭渲煤盟性噭?,試劑或樣品稀釋時(shí),均需混勻,混勻時(shí)盡量避免起泡。每次檢測都應(yīng)該做標(biāo)準(zhǔn)曲線。如樣品濃度過高時(shí),用樣品稀釋液進(jìn)行稀釋,以使樣品符合試劑盒的檢測范圍。
1. 加樣:分別設(shè)空白孔、標(biāo)準(zhǔn)孔、待測樣品孔。空白孔加樣品稀釋液100μl,余孔分別加標(biāo)準(zhǔn)品或待測樣品100μl,注意不要有氣泡,加樣將樣品加于酶標(biāo)板孔底部,盡量不觸及孔壁,輕輕晃動(dòng)混勻,酶標(biāo)板加上蓋或覆膜,37℃反應(yīng)120分鐘。
為保證實(shí)驗(yàn)結(jié)果有效性,每次實(shí)驗(yàn)請(qǐng)使用新的標(biāo)準(zhǔn)品溶液。
2. 棄去液體,甩干,不用洗滌。每孔加生物素標(biāo)記抗體工作液100μl(取1μl生物素標(biāo)記抗???加99μl生物素標(biāo)記抗體稀釋液的比例配制,輕輕混勻,在使用前一小時(shí)內(nèi)配制),37℃,60分鐘。
3. 溫育60分鐘后,棄去孔內(nèi)液體,甩干,洗板3次,每次浸泡1-2分鐘,350μl/每孔,甩干。
4. 每孔加辣根過氧化物酶標(biāo)記親和素工作液(同生物素標(biāo)記抗體工作液)100μl,37℃,60分鐘。
5. 溫育60分鐘后,棄去孔內(nèi)液體,甩干,洗板5次,每次浸泡1-2分鐘,350μl/每孔,甩干。
6. 依序每孔加底物溶液90μl,37℃避光顯色(30分鐘內(nèi),此時(shí)肉眼可見標(biāo)準(zhǔn)品的前3-4孔有明顯的梯度藍(lán)色,后3-4孔梯度不明顯,即可終止)。
7. 依序每孔加終止溶液50μl,終止反應(yīng)(此時(shí)藍(lán)色立轉(zhuǎn)黃色)。終止液的加入順序應(yīng)盡量與底物液的加入順序相同。為了保證實(shí)驗(yàn)結(jié)果的準(zhǔn)確性,底物反應(yīng)時(shí)間到后應(yīng)盡快加入終止液。
8. 用酶聯(lián)儀在450nm波長依序測量各孔的光密度(OD值)。 在加終止液后15分鐘以內(nèi)進(jìn)行檢測。