樣本收集及儲存:
1. 細(xì)胞培養(yǎng)上清:
將細(xì)胞培養(yǎng)基移至無菌離心管,在 4℃條件下 1000 ×g 離心 10 min,然后將上清等量分裝于小 EP 管并于-20℃下保存(24 小時內(nèi)檢測可放入 2-8℃儲存),避免反復(fù)凍融。
2. 血清樣本:
室溫血液自然凝固 20 min 后,在 4℃條件下 1000×g 離心 10 min,然后將上清等量分裝于小 EP 管并于-20℃下保存(24 小時內(nèi)檢測可放入 2-8℃儲存),保存過程中如有沉淀,請再次離心,避免反復(fù)凍融。
3. 血漿樣本:
將全血收集到含抗血凝劑的管中,根據(jù)標(biāo)本的實(shí)際要求選擇 EDTA,檸檬酸鈉或肝素作為抗凝劑,混合 20 min,在 4℃條件下 1000×g 離心 10 min,然后將上清等量分裝于小 EP 管并于-20℃下保存(24小時內(nèi)檢測可放入 2-8℃儲存),避免反復(fù)凍融。
公司產(chǎn)品僅供體外研究使用,不用于臨床診斷!
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產(chǎn)品名稱
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hnRNPE人異質(zhì)性胞核核糖核蛋白EELISA方法
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英文名稱
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Human heterogeneous nuclear ribonucleoprotein E,hnRNP E ELISA Kit
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貨號
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PH096508
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包裝規(guī)格:液體盒裝 96T/48T
保存條件:2-8℃(長期不使用時,部分試劑應(yīng)放在-20℃條件下)。
有效期:6個月
存儲運(yùn)輸:低溫避光,請勿重壓,輕拿輕放(現(xiàn)貨供應(yīng),一般為快遞運(yùn)輸,???浙滬隔天到,外地及偏遠(yuǎn)地方三至五天時間到貨。)
Elisa試劑盒可測種屬:人、大鼠、小鼠、兔子、豬、犬、猴、馬、牛、羊、雞、鴨、魚等。
Elisa試劑盒適用范圍:此試劑盒僅用于科研實(shí)驗(yàn),禁用于臨床。
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2400 ng/L
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5 號標(biāo)準(zhǔn)品
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150μl 的原倍標(biāo)準(zhǔn)品加入 150μl 標(biāo)準(zhǔn)品稀釋液
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1200ng/L
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4 號標(biāo)準(zhǔn)品
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150μl 的 5 號標(biāo)準(zhǔn)品加入 150μl 標(biāo)準(zhǔn)品稀釋液
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600ng/L
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3 號標(biāo)準(zhǔn)品
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150μl 的 4 號標(biāo)準(zhǔn)品加入 150μl 標(biāo)準(zhǔn)品稀釋液
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300ng/L
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2 號標(biāo)準(zhǔn)品
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150μl 的 3 號標(biāo)準(zhǔn)品加入 150μl 標(biāo)準(zhǔn)品稀釋液
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150ng/L
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1 號標(biāo)準(zhǔn)品
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150μl 的 2 號標(biāo)準(zhǔn)品加入 150μl 標(biāo)準(zhǔn)品稀釋液
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組成及試劑配制 :
1. 酶聯(lián)板:一塊(96孔)
2. 標(biāo)準(zhǔn)品(凍干品):2瓶,每瓶臨用前以樣品稀釋液稀釋至1ml,蓋好后靜置10分鐘以上,然后反復(fù)顛倒/搓動以助溶解,其濃度為100 ng/ml,做系列倍比稀釋(注:不要直接在板中進(jìn)行倍比稀釋)后,分別稀釋成100 ng/ml,50 ng/ml,25 ng/ml,12.5 ng/ml,6.25 ng/ml,3.12 ng/ml,1.56 ng/ml,樣品稀釋液直接作為標(biāo)準(zhǔn)濃度0 ng/ml,臨用前15分鐘內(nèi)配制。
如配制50 ng/ml標(biāo)準(zhǔn)品:取0.5ml (不要少于0.5ml ) 100 ng/ml的上述標(biāo)準(zhǔn)品加入含有0.5ml樣品稀釋液的Eppendorf管中,混勻即可,其余濃度以此類推。
3. 樣品稀釋液:1×20ml/瓶。
4. 檢測稀釋液A:1×10ml/瓶。
5. 檢測稀釋液B:1×10ml/瓶。
6. 檢測溶液A:1×120ul/瓶(1:100)臨用前以檢測稀釋液A 1:100稀釋,稀釋前根據(jù)預(yù)先計算好的每次實(shí)驗(yàn)所需的總量配制(100ul/孔),實(shí)際配制時應(yīng)多配制0.1-0.2ml。如10ul檢測溶液A加990ul檢測稀釋液A的比例配制,輕輕混勻,在使用前一小時內(nèi)配制。
7. 檢測溶液B:1×120ul/瓶(1:100)臨用前以檢測稀釋液B 1:100稀釋。稀釋方法同檢測溶液A。
8. 底物溶液:1×10ml/瓶。
9. 濃洗滌液:1×30ml/瓶,使用時每瓶用蒸餾水稀釋25倍。
10. 終止液:1×10ml/瓶(2N H2SO4)。

操作步驟:
實(shí)驗(yàn)開始前,請?zhí)崆芭渲煤盟性噭?,試劑或樣品稀釋時,均需混勻,混勻時盡量避免起泡。每次檢測都應(yīng)該做標(biāo)準(zhǔn)曲線。如樣品濃度過高時,用樣品稀釋液進(jìn)行稀釋,以使樣品符合試劑盒的檢測范圍。
1. 加樣:分別設(shè)空白孔、標(biāo)準(zhǔn)孔、待測樣品孔。空白孔加樣品稀釋液100μl,余孔分別加標(biāo)準(zhǔn)品或待測樣品100μl,注意不要有氣泡,加樣將樣品加于酶標(biāo)板孔底部,盡量不觸及孔壁,輕輕晃動混勻,酶標(biāo)板加上蓋或覆膜,37℃反應(yīng)120分鐘。
為保證實(shí)驗(yàn)結(jié)果有效性,每次實(shí)驗(yàn)請使用新的標(biāo)準(zhǔn)品溶液。
2. 棄去液體,甩干,不用洗滌。每孔加生物素標(biāo)記抗體工作液100μl(取1μl生物素標(biāo)記抗體加99μl生物素標(biāo)記抗體稀釋液的比例配制,輕輕混勻,在使用前一小時內(nèi)配制),37℃,60分鐘。
3. 溫育60分鐘后,棄去孔內(nèi)液體,甩干,洗板3次,每次浸泡1-2分鐘,350μl/每孔,甩干。
4. 每孔加辣根過氧化物酶標(biāo)記親和素工作液(同生物素標(biāo)記抗體工作液)100μl,37℃,60分鐘。
5. 溫育60分鐘后,棄去孔內(nèi)液體,甩干,洗板5次,每次浸泡1-2分鐘,350μl/每孔,甩干。
6. 依序每孔加底物溶液90μl,37℃避光顯色(30分鐘內(nèi),此時肉眼可見標(biāo)準(zhǔn)品的前3-4孔有明顯的梯度藍(lán)色,后3-4孔梯度不明顯,即可終止)。
7. 依序每孔加終止溶液50μl,終止反應(yīng)(此時藍(lán)色立轉(zhuǎn)黃色)。終止液的加入順序應(yīng)盡量與底物液的加入順序相同。為了保證實(shí)驗(yàn)結(jié)果的準(zhǔn)確性,底物反應(yīng)時間到后應(yīng)盡快加入終止液。
8. 用酶聯(lián)儀在450nm波長依序測量各孔的光密度(OD值)。 在加終止液后15分鐘以內(nèi)進(jìn)行檢測。
樣本要求:
1.標(biāo)本采集后盡早進(jìn)行提取,提取按相關(guān)文獻(xiàn)進(jìn)行,提取后應(yīng)盡快進(jìn)行實(shí)驗(yàn)。若不能馬上進(jìn)行試驗(yàn),可將標(biāo)本放于-20℃保存,但應(yīng)避免反復(fù)凍融。
2.不能檢測含 NaN3 的樣品,因 NaN3 抑制辣根過氧化物酶的(HRP)活性。
小鼠成纖維生長因子受體底物2(FRS2)酶聯(lián)吸附測定試劑盒鐮孢霉Rpb1 CTD (4H8) Mouse mAb
小鼠成纖維生長因子受體底物3(FRS3)酶聯(lián)吸附測定試劑盒漏斗狀側(cè)耳(鳳尾菇)Atg5 Antibody
小鼠纖調(diào)蛋白(FMOD)酶聯(lián)吸附測定試劑盒貝爾氏菌屬Phospho-Rpb1 CTD (Thr4) (D7L9W) Rabbit mAb
小鼠纖連蛋白富亮氨酸跨膜蛋白2(FLRT2)酶聯(lián)吸附測定試劑盒類黃假單胞菌Atg7 Antibody
小鼠纖連蛋白(FN)酶聯(lián)吸附測定試劑盒葡萄座腔菌Atg7 Antibody
小鼠細(xì)絲蛋白A(FLNa)酶聯(lián)吸附測定試劑盒粗糙脈孢菌MYPT1 Antibody
小鼠FMS樣酪氨酸激酶3(Flt3)酶聯(lián)吸附測定試劑盒 喜堿運(yùn)動節(jié)桿菌MYPT1 Antibody
小鼠粘著斑激酶(FAK)酶聯(lián)吸附測定試劑盒蠟樣狀芽孢桿菌DDX3 Antibody
小鼠促卵泡素(FSH)酶聯(lián)吸附測定試劑盒豬放線桿菌Radixin (C4G7) Rabbit mAb
小鼠卵泡抑素(FST)酶聯(lián)吸附測定試劑盒膜醭畢赤酵母Contactin-2 (D4M7G) Rabbit mAb
小鼠叉頭框蛋白P3(FXOP3)酶聯(lián)吸附測定試劑盒蘇云金芽胞桿菌BTAF1 Antibody
小鼠甲酰肽受體2(FPR2)酶聯(lián)吸附測定試劑盒羊肚伴生菌VEGF Receptor 3 (C28G5) Rabbit mAb
小鼠趨化因子Fractalkine(FK)酶聯(lián)吸附測定試劑盒黃棕色鏈霉菌Fibrillarin (C13C3) Rabbit mAb
小鼠谷氨酸脫羧酶自身抗體IgM(GAD-Ab-IgM)酶聯(lián)吸附測定試劑盒德爾布有孢酵母Fibrillarin (C13C3) Rabbit mAb
小鼠游離睪酮(F-TESTO)酶聯(lián)吸附測定試劑盒乳桿菌Phospho-PRAS40 (Thr246) Antibody
hnRNPE人異質(zhì)性胞核核糖核蛋白EELISA方法7號染色體開放閱讀框69抗體Human FAM72A ELISA Kit駱駝β內(nèi)啡肽(β-EP)ELISA試劑盒,
銅代謝結(jié)構(gòu)域蛋白3抗體Human FAM185A ELISA Kit轉(zhuǎn)谷氨酰酶2C多肽(TGM2)ELISA試劑盒--動物,人
19號染色體開放閱讀框71抗體Human FAM186B ELISA Kit抗環(huán)胍氨酸肽抗體(CCP)ELISA試劑盒--動物,人
異染色體同源蛋白1抗體Human FAM71F2 ELISA Kit營養(yǎng)瓊脂 (NA)
銅代謝結(jié)構(gòu)域蛋白8抗體Human FAM124B ELISA Kit葡萄球菌選擇性瓊脂
氯霉素抗體Human FAM127A ELISA Kit多粘菌素B
4號染色體開放閱讀款Human FAM127B ELISA KitTBB 培養(yǎng)基用于乳酪產(chǎn)品中梭菌的計數(shù)(Merck方法)
凋亡加強(qiáng)結(jié)構(gòu)域蛋白11抗體Human FAM129A ELISA KitN-硝基-L-精氨酸甲酯