公司產(chǎn)品僅供體外研究使用,不用于臨床診斷!
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產(chǎn)品名稱
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Shh-N人音猬因子N端ELISA檢測(cè)試劑盒
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英文名稱
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Human sonic hedgehog N-Terminus,Shh-N ELISA Kit
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貨號(hào)
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PH096492
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包裝規(guī)格:液體盒裝 96T/48T
保存條件:2-8℃(長(zhǎng)期不使用時(shí),部分試劑應(yīng)放在-20℃條件下)。
有效期:6個(gè)月
存儲(chǔ)運(yùn)輸:低溫避光,請(qǐng)勿重壓,輕拿輕放(現(xiàn)貨供應(yīng),一般為快遞運(yùn)輸,江浙滬隔天到,外地及偏遠(yuǎn)地方三至五天時(shí)間到貨。)
Elisa試劑盒可測(cè)種屬:人、大鼠、小鼠、兔子、豬、犬、猴、馬、牛、羊、雞、鴨、魚(yú)等。
Elisa試劑盒適用范圍:此試劑盒僅用于科研實(shí)驗(yàn),禁用于臨床。
樣本要求:
1.標(biāo)本采集后盡早進(jìn)行提取,提取按相關(guān)文獻(xiàn)進(jìn)行,提取后應(yīng)盡快進(jìn)行實(shí)驗(yàn)。若不能馬上進(jìn)行試驗(yàn),可將標(biāo)本放于-20℃保存,但應(yīng)避免反復(fù)凍融。
2.不能檢測(cè)含 NaN3 的樣品,因 NaN3 抑制辣根過(guò)氧化物酶的(HRP)活性。
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2400 ng/L
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5 ??標(biāo)準(zhǔn)品
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150μl 的原倍標(biāo)準(zhǔn)品加入 150μl 標(biāo)準(zhǔn)品稀釋液
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1200ng/L
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4 號(hào)標(biāo)準(zhǔn)品
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150μl 的 5 號(hào)標(biāo)準(zhǔn)品加入 150μl 標(biāo)準(zhǔn)品稀釋液
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600ng/L
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3 號(hào)標(biāo)準(zhǔn)品
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150μl 的 4 號(hào)標(biāo)準(zhǔn)品加入 150μl 標(biāo)準(zhǔn)品稀釋液
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300ng/L
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2 號(hào)標(biāo)準(zhǔn)品
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150μl 的 3 號(hào)標(biāo)準(zhǔn)品加入 150μl 標(biāo)準(zhǔn)品稀釋液
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150ng/L
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1 號(hào)標(biāo)準(zhǔn)品
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150μl 的 2 號(hào)標(biāo)準(zhǔn)品加入 150μl 標(biāo)準(zhǔn)品稀釋液
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組成及試劑配制 :
1. 酶聯(lián)板:一塊(96孔)
2. 標(biāo)準(zhǔn)品(凍干品):2瓶,每瓶臨用前以樣品稀釋液稀釋至1ml,蓋好后靜置10分鐘以上,然后反復(fù)顛倒/搓動(dòng)以助溶解,其濃度為100 ng/ml,做系列倍比稀釋(注:不要直接在板中進(jìn)行倍比稀釋)后,分別稀釋成100 ng/ml,50 ng/ml,25 ng/ml,12.5 ng/ml,6.25 ng/ml,3.12 ng/ml,1.56 ng/ml,樣品稀釋液直接作為標(biāo)準(zhǔn)濃度0 ng/ml,臨用前15分鐘內(nèi)配制。
如配制50 ng/ml標(biāo)準(zhǔn)品:取0.5ml (不要少于0.5ml ) 100 ng/ml的上述標(biāo)準(zhǔn)品加入含有0.5ml樣品稀釋液的Eppendorf管中,混勻即可,其余濃度以此類推。
3. 樣品稀釋液:1×20ml/瓶。
4. 檢測(cè)稀釋液A:1×10ml/瓶。
5. 檢測(cè)稀釋液B:1×10ml/瓶。
6. 檢測(cè)溶液A:1×120ul/瓶(1:100)臨用前以檢測(cè)稀釋液A 1:100稀釋,稀釋前根據(jù)預(yù)先計(jì)算好的每次實(shí)驗(yàn)所需的總量配制(100ul/孔),實(shí)際配制時(shí)應(yīng)多配制0.1-0.2ml。如10ul檢測(cè)溶液A加990ul檢測(cè)稀釋液A的比例配制,輕輕混勻,在使用前一小時(shí)內(nèi)配制。
7. 檢測(cè)溶液B:1×120ul/瓶(1:100)臨用前以檢測(cè)稀釋液B 1:100稀釋。稀釋方法同檢測(cè)溶液A。
8. 底物溶液:1×10ml/瓶。
9. 濃洗滌液:1×30ml/瓶,使用時(shí)每瓶用蒸餾水稀釋25倍。
10. 終止液:1×10ml/瓶(2N H2SO4)。

樣本收集及儲(chǔ)存:
1. 細(xì)胞培養(yǎng)上清:
將細(xì)胞培養(yǎng)基移至無(wú)菌離心管,在 4℃條件下 1000 ×g 離心 10 min,然后將上清等量分裝于小 EP 管并于-20℃下保存(24 小時(shí)內(nèi)檢測(cè)可放入 2-8℃儲(chǔ)存),避免反復(fù)凍融。
2. 血清樣本:
室溫血液自然凝固 20 min 后,在 4℃條件下 1000×g 離心 10 min,然后將上清等量分裝于小 EP 管并于-20℃下保存(24 小時(shí)內(nèi)檢測(cè)可放入 2-8℃儲(chǔ)存),保存過(guò)程中如有沉淀,請(qǐng)?jiān)俅坞x心,避免反復(fù)凍融。
3. 血漿樣本:
將全血收集到含抗血凝劑的管中,根據(jù)標(biāo)本的實(shí)際要求選擇 EDTA,檸檬酸鈉或肝素作為抗凝劑,混合 20 min,在 4℃條件下 1000×g 離心 10 min,然后將上清等量分裝于小 EP 管并于-20℃下保存(24小時(shí)內(nèi)檢測(cè)可放入 2-8℃儲(chǔ)存),避免反復(fù)凍融。
小鼠碳酸酐酶1(CA1)酶聯(lián)吸附測(cè)定試劑盒孔狀短小莖點(diǎn)霉PTCH1 (C53A3) Rabbit mAb
小鼠碳酸酐酶2(CA2)酶聯(lián)吸附測(cè)定試劑盒枯草芽孢桿菌PTCH1 (C53A3) Rabbit mAb
小鼠I型前膠原羧基端原肽(PICP)酶聯(lián)吸附測(cè)定試劑盒申氏不動(dòng)桿菌*eIF4G (C45A4) Rabbit mAb
小鼠癌胚抗原(CEA)酶聯(lián)吸附測(cè)定試劑盒 單色下皮黑孔菌eIF4G (C45A4) Rabbit mAb
小鼠I型前膠原氨基端原肽(PINP)酶聯(lián)吸附測(cè)定試劑盒海欖雌小單孢菌PTCH2 (G1191) Antibody
小鼠心磷脂合成酶(CLS)酶聯(lián)吸附測(cè)定試劑盒致密曲霉PTCH2 (G1191) Antibody
小鼠心肌營(yíng)養(yǎng)素樣因子(CLCF1)酶聯(lián)吸附測(cè)定試劑盒植物乳桿菌CD38 (HIT2) Mouse mAb (violetFluor? 450 Conjugate)
小鼠心肌營(yíng)養(yǎng)素1(CT-1)酶聯(lián)吸附測(cè)定試劑盒云南紅球菌Phospho-VEGF Receptor 2 (Tyr951) Antibody
小鼠軟骨寡聚基質(zhì)蛋白(COMP)酶聯(lián)吸附測(cè)定試劑盒動(dòng)球菌VEGF Receptor 2 Antibody
小鼠胱天蛋白酶3(CASP3)酶聯(lián)吸附測(cè)定試劑盒新城疫病Phospho-VEGF Receptor 2 (Tyr996) Antibody
小鼠胱天蛋白酶4(CASP4)酶聯(lián)吸附測(cè)定試劑盒嗜鹽堿球菌Phospho-VEGF Receptor 2 (Tyr996) Antibody
小鼠胱天蛋白酶7(CASP7)酶聯(lián)吸附測(cè)定試劑盒紫萁小菇PSA/KLK3 (D11E1) XP® Rabbit mAb
小鼠胱天蛋白酶9(CASP9)酶聯(lián)吸附測(cè)定試劑盒彎孢菌PSA/KLK3 (D11E1) XP® Rabbit mAb
小鼠胱天蛋白酶10(CASP10)酶聯(lián)吸附測(cè)定試劑盒Curvularia cocis Matsush. Phospho-VEGF Receptor 2 (Tyr951) (7H11) Mouse mAb
小鼠胱天蛋白酶11(CASP11)酶聯(lián)吸附測(cè)定試劑盒謝瓦曲霉PITRM1 Antibody
Shh-N人音猬因子N端ELISA檢測(cè)試劑盒磷酸化促凋亡調(diào)節(jié)蛋白BNIP3抗體Human FOXQ1 ELISA Kit人膀胱腫瘤抗原(BTA)ELISA試劑盒,BTA ELISA kit
B特異性激活OCT結(jié)合蛋白1抗體Human FOXP4 ELISA Kit人松弛肽/松弛素(RLN)ELISA試劑盒, RLN ELISA
核糖體合成蛋白BOP1抗體Human FOXD4L6 ELISA Kit人蛋白脂質(zhì)蛋白抗體(PLP)ELISA試劑盒,PLP ELISA
調(diào)節(jié)中心體分離早期相關(guān)激酶BORA抗體Human FOXE3 ELISA Kit人誘導(dǎo)型一氧化氮合成酶(iNOS)ELISA試劑盒,
萊姆病螺旋體抗體Human FOXG1 ELISA Kit人Podocin ELISA試劑盒,
成熟相關(guān)蛋白BOULE抗體Human FOXH1 ELISA Kit人二磷酸尿核苷葡糖醛酸基轉(zhuǎn)移酶2家族肽B4(UGT2B4)ELISA試劑盒,
伸長(zhǎng)因子結(jié)合蛋白抗體Human FOXL2 ELISA Kit人胎盤(pán)泌乳素(PL)ELISA試劑盒,
特異性堿性蛋白Y2抗體Human FOXO4 ELISA Kit人補(bǔ)體1抑制物抗體(C1INH)ELISA試劑盒,
操作步驟:
實(shí)驗(yàn)開(kāi)始前,請(qǐng)?zhí)崆芭渲煤盟性噭噭┗驑悠废♂寱r(shí),均需混勻,混勻時(shí)盡量避免起泡。每次檢測(cè)都應(yīng)該做標(biāo)準(zhǔn)曲線。如樣品濃度過(guò)高時(shí),用樣品稀釋液進(jìn)行稀釋,以使樣品符合試劑盒的檢測(cè)范圍。
1. 加樣:分別設(shè)空白孔、標(biāo)準(zhǔn)孔、待測(cè)樣品孔??瞻卓准訕悠废♂屢?00μl,余孔分別加標(biāo)準(zhǔn)品或待測(cè)樣品100μl,注意不要有氣泡,加樣將樣品加于酶標(biāo)板孔底部,盡量不觸及孔壁,輕輕晃動(dòng)混勻,酶標(biāo)板加上蓋或覆膜,37℃反應(yīng)120分鐘。
為保證實(shí)驗(yàn)結(jié)果有效性,每次實(shí)驗(yàn)請(qǐng)使用新的標(biāo)準(zhǔn)品溶液。
2. 棄去液體,甩干,不用洗滌。每孔加生物素標(biāo)記抗體工作液100μl(取1μl生物素標(biāo)記抗體加99μl生物素標(biāo)記抗體稀釋液的比例配制,輕輕混勻,在使用前一小時(shí)內(nèi)配制),37℃,60分鐘。
3. 溫育60分鐘后,棄去孔內(nèi)液體,甩干,洗板3次,每次浸泡1-2分鐘,350μl/每孔,甩干。
4. 每孔加辣根過(guò)氧化物酶標(biāo)記親和素工作液(同生物素標(biāo)記抗體工作液)100μl,37℃,60分鐘。
5. 溫育60分鐘后,棄去孔內(nèi)液體,甩干,洗板5次,每次浸泡1-2分鐘,350μl/每孔,甩干。
6. 依序每孔加底物溶液90μl,37℃避光顯色(30分鐘內(nèi),此時(shí)肉眼可見(jiàn)標(biāo)準(zhǔn)品的前3-4孔有明顯的梯度藍(lán)色,后3-4孔梯度不明顯,即可終止)。
7. 依序每孔加終止溶液50μl,終止反應(yīng)(此時(shí)藍(lán)色立轉(zhuǎn)黃色)。終止液的加入順序應(yīng)盡量與底物液的加入順序相同。為了保證實(shí)驗(yàn)結(jié)果的準(zhǔn)確性,底物反應(yīng)時(shí)間到后應(yīng)盡快加入終止液。
8. 用酶聯(lián)儀在450nm波長(zhǎng)依序測(cè)量各孔的光密度(OD值)。 在加終止液后15分鐘以內(nèi)進(jìn)行檢測(cè)。