公司產(chǎn)品僅供體外研究使用,不用于臨床診斷!
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產(chǎn)品名稱
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CD69人早期活化抗原CD69ELISA檢測試劑盒
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英文名稱
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Human CD69 ELISA kit
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貨號(hào)
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PH096454
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包裝規(guī)格:液體盒裝 96T/48T
保存條件:2-8℃(長期不使用時(shí),部分試劑應(yīng)放在-20℃條件下)。
有效期:6個(gè)月
存儲(chǔ)運(yùn)輸:低溫避光,請勿重壓,輕拿輕放(現(xiàn)貨供應(yīng),一般為快遞運(yùn)輸,江浙滬隔天到,外地及偏遠(yuǎn)地方三至五天時(shí)間到貨。)
Elisa試劑盒可測種屬:人、大鼠、小鼠、兔子、豬、犬、猴、馬、牛、羊、雞、鴨、魚等。
Elisa試劑盒適用范圍:此試劑盒僅用于科研實(shí)驗(yàn),禁用于臨床。
樣本要求:
1.標(biāo)本采集后盡早進(jìn)行提取,提取按相關(guān)文獻(xiàn)進(jìn)行,提取后應(yīng)盡快進(jìn)行實(shí)驗(yàn)。若不能馬上進(jìn)行試驗(yàn),可將標(biāo)本放于-20℃保存,但應(yīng)避免反復(fù)凍融。
2.不能檢測含 NaN3 的樣品,因 NaN3 抑制辣根過氧化物酶的(HRP)活性。
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2400 ng/L
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5 號(hào)標(biāo)準(zhǔn)品
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150μl 的原倍標(biāo)準(zhǔn)品加入 150μl 標(biāo)準(zhǔn)品稀釋液
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1200ng/L
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4 號(hào)標(biāo)準(zhǔn)品
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150μl 的 5 號(hào)標(biāo)準(zhǔn)品加入 150μl 標(biāo)準(zhǔn)品稀釋液
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600ng/L
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3 號(hào)標(biāo)準(zhǔn)品
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150μl 的 4 號(hào)標(biāo)準(zhǔn)品加入 150μl 標(biāo)準(zhǔn)品稀釋液
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300ng/L
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2 號(hào)標(biāo)準(zhǔn)品
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150μl 的 3 號(hào)標(biāo)準(zhǔn)品加入 150μl 標(biāo)準(zhǔn)品稀釋液
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150ng/L
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1 號(hào)標(biāo)準(zhǔn)品
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150μl 的 2 號(hào)標(biāo)準(zhǔn)品加入 150μl 標(biāo)準(zhǔn)品稀釋液
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組成及試劑配制 :
1. 酶聯(lián)板:一塊(96孔)
2. 標(biāo)準(zhǔn)品(凍干品):2瓶,每瓶臨用前以樣品稀釋液稀釋至1ml,蓋好后靜置10分鐘以上,然后反復(fù)顛倒/搓動(dòng)以助溶解,其濃度為100 ng/ml,做系列倍比稀釋(注:不要直接在板中進(jìn)行倍比稀釋)后,分別稀釋成100 ng/ml,50 ng/ml,25 ng/ml,12.5 ng/ml,6.25 ng/ml,3.12 ng/ml,1.56 ng/ml,樣品稀釋液直接作為標(biāo)準(zhǔn)濃度0 ng/ml,臨用前15分鐘內(nèi)配制。
如配制50 ng/ml標(biāo)準(zhǔn)品:取0.5ml (不要少于0.5ml ) 100 ng/ml的上述標(biāo)準(zhǔn)品加入含有0.5ml樣品稀釋液的Eppendorf管中,混勻即可,其余濃度以此類推。
3. 樣品稀釋液:1×20ml/瓶。
4. 檢測稀釋液A:1×10ml/瓶。
5. 檢測稀釋液B:1×10ml/瓶。
6. 檢測溶液A:1×120ul/瓶(1:100)臨用前以檢測稀釋液A 1:100稀釋,稀釋前根據(jù)預(yù)先計(jì)算好的每次實(shí)驗(yàn)所需的總量配制(100ul/孔),實(shí)際配制時(shí)應(yīng)多配制0.1-0.2ml。如10ul檢測溶液A加990ul檢測稀釋液A的比例配制,輕輕混勻,在使用前一小時(shí)內(nèi)配制。
7. 檢測溶液B:1×120ul/瓶(1:100)臨用前以檢測稀釋液B 1:100稀釋。稀釋方法同檢測溶液A。
8. 底物溶液:1×10ml/瓶。
9. 濃洗滌液:1×30ml/瓶,使用時(shí)每瓶用蒸餾水稀釋25倍。
10. 終止液:1×10ml/瓶(2N H2SO4)。

樣本收集及儲(chǔ)存:
1. 細(xì)胞培養(yǎng)上清:
將細(xì)胞培養(yǎng)基移至無菌離心管,在 4℃條件下 1000 ×g 離心 10 min,然后將上清等量分裝于小 EP 管并于-20℃下保存(24 小時(shí)內(nèi)檢測可放入 2-8℃儲(chǔ)存),避免反復(fù)凍融。
2. 血清樣本:
室溫血液自然凝固 20 min 后,在 4℃條件下 1000×g 離心 10 min,然后將上清等量分裝于小 EP 管并于-20℃下保存(24 小時(shí)內(nèi)檢測可放入 2-8℃儲(chǔ)存),保存過程中如有沉淀,請?jiān)俅坞x心,避免反復(fù)凍融。
3. 血漿樣本:
將全血收集到含抗血凝劑的管中,根據(jù)標(biāo)本的實(shí)際要求選擇 EDTA,檸檬酸鈉或肝素作為抗凝劑,混合 20 min,在 4℃條件下 1000×g 離心 10 min,然后將上清等量分裝于小 EP 管并于-20℃下保存(24小時(shí)內(nèi)檢測可放入 2-8℃儲(chǔ)存),避免反復(fù)凍融。
人血管活性腸肽(VIP)酶聯(lián)吸附測定試劑盒細(xì)孢毛霉Non-phospho (Active) β-Catenin (Ser45) (D2U8Y) XP® Rabbit mAb
人血管活性肽酶抑制劑(VPI)酶聯(lián)吸附測定試劑盒 匍枝根霉(黑根霉)Autophagy Vesicle Elongation (LC3 Conjugation) Antibody Sampler Kit
人血管內(nèi)皮鈣黏蛋白(VE-Cadherin)酶聯(lián)吸附測定試劑盒Aureimonas frigidaquaeCD3 (UCHT1) Mouse mAb (APC Conjugate)
人血管內(nèi)皮生長因子165 (VEGF165)酶聯(lián)吸附測定試劑盒光帽鱗傘(滑菇)MUC1 (D9O8K) XP® Rabbit mAb (PE Conjugate)
人谷胱甘肽S轉(zhuǎn)移酶μ2(GSTμ2/GSTm2)酶聯(lián)吸附測定試劑盒茶藨子葡萄座腔菌BAFF (D7I1U) Rabbit mAb
人小泛素相關(guān)修飾蛋白2 (SUMO2)酶聯(lián)吸附測定試劑盒釀酒酵母Fra2 (D2F1E) Rabbit mAb
人球蛋白E(IgE)酶聯(lián)吸附測定試劑盒橄欖綠鏈霉菌AsCpf1 (Strain <i>BV3L6</i>) (E1U7C) Rabbit mAb
人吲哚2,3-雙加氧酶(IDO)酶聯(lián)吸附測定試劑盒白僵菌BID Antibody (Human Specific)
人骨誘導(dǎo)因子(OGN)酶聯(lián)吸附測定試劑盒冬菇屬BID Antibody (Human Specific)
人血管內(nèi)皮生長因子B(VEGF-B)酶聯(lián)吸附測定試劑盒米曲霉BID Antibody (Mouse Specific)
人血管內(nèi)皮生長因子受體3(VEGFR3/Flt4)酶聯(lián)吸附測定試劑盒耐冷冷桿菌FoxP1 Antibody
人血管內(nèi)皮粘附分子1(sVCAM-1/CD106)酶聯(lián)吸附測定試劑盒 普通鏈霉菌Cas9 (7A9-3A3) Mouse mAb (Biotinylated)
人血管內(nèi)皮抑素抗體(ES-Ab)酶聯(lián)吸附測定試劑盒 香菇OTUD5 (D8Y2U) Rabbit mAb
人血管性血友病因子(VWF)酶聯(lián)吸附測定試劑盒Paucimonas lemoigneiPhospho-SHIP2 (Tyr986/987) Antibody
人血紅蛋白C(HbC)酶聯(lián)吸附測定試劑盒 芽孢桿菌屬Phospho-β-Catenin (Ser33/37) Antibody
CD69人早期活化抗原CD69ELISA檢測試劑盒磷酸化癌易感基因1抗體Human GTPBP4 ELISA Kit大鼠熱休克蛋白27(HSP-27)ELISA試劑盒,
磷酸化β分泌酶抗體Human GTSE1 ELISA Kit大鼠胰蛋白酶原激活肽(TAP)ELISA試劑盒,
磷酸化相關(guān)死亡促進(jìn)因子抗體Human GUCY1A3 ELISA Kit大鼠胰島素原(PI)ELISA試劑盒,
磷酸化相關(guān)死亡促進(jìn)因子抗體Human GTPBP5 ELISA Kit大鼠甲種胎兒球蛋白/甲胎蛋白(AFP)ELISA試劑盒,
磷酸化Bcl-2抗體Human GUCY1B3 ELISA Kit大鼠前列腺酸性磷酸酶(PAP)ELISA試劑盒,
磷酸化癌易感基因1抗體Human GTF2H3 ELISA Kit大鼠血紅素氧合酶1(HO-1)ELISA試劑盒,
磷酸化癌易感基因1抗體Human GTF2H2C ELISA Kit大鼠可溶性血小板內(nèi)皮粘附分子1(sPECAM-1/sCD31)ELISA試劑盒,
磷酸化非受體性蛋白酪氨酸激酶ETK抗體Human GTF2H5 ELISA Kit大鼠粒集落激因子(G-CSF)ELISA試劑盒,
操作步驟:
實(shí)驗(yàn)開始前,請?zhí)崆芭渲煤盟性噭?,試劑或樣品稀釋時(shí),均需混勻,混勻時(shí)盡量避免起泡。每次檢測都應(yīng)該做標(biāo)準(zhǔn)曲線。如樣品濃度過高時(shí),用樣品稀釋液進(jìn)行稀釋,以使樣品符合試劑盒的檢測范圍。
1. 加樣:分別設(shè)空白孔、標(biāo)準(zhǔn)孔、待測樣品孔??瞻卓准訕悠废♂屢?00μl,余孔分別加標(biāo)準(zhǔn)品或待測樣品100μl,注意不要有氣泡,加樣將樣品加于酶標(biāo)板孔底部,盡量不觸及孔壁,輕輕晃動(dòng)混勻,酶標(biāo)板加上蓋或覆膜,37℃反應(yīng)120分鐘。
為保證實(shí)驗(yàn)結(jié)果有效性,每次實(shí)驗(yàn)請使用新的標(biāo)準(zhǔn)品溶液。
2. 棄去液體,甩干,不用洗滌。每孔加生物素標(biāo)記抗體工作液100μl(取1μl生物素標(biāo)記抗體加99μl生物素標(biāo)記抗體稀釋液的比例配制,輕輕混勻,在使用前一小時(shí)內(nèi)配制),37℃,60分鐘。
3. 溫育60分鐘后,棄去孔內(nèi)液體,甩干,洗板3次,每次浸泡1-2分鐘,350μl/每孔,甩干。
4. 每孔加辣根過氧化物酶標(biāo)記親和素工作液(同生物素標(biāo)記抗體工作液)100μl,37℃,60分鐘。
5. 溫育60分鐘后,棄去孔內(nèi)液體,甩干,洗板5次,每次浸泡1-2分鐘,350μl/每孔,甩干。
6. 依序每孔加底物溶液90μl,37℃避光顯色(30分鐘內(nèi),此時(shí)肉眼可見標(biāo)準(zhǔn)品的前3-4孔有明顯的梯度藍(lán)色,后3-4孔梯度不明顯,即可終止)。
7. 依序每孔加終止溶液50μl,終止反應(yīng)(此時(shí)藍(lán)色立轉(zhuǎn)黃色)。終止液的加入順序應(yīng)盡量與底物液的加入順序相同。為了保證實(shí)驗(yàn)結(jié)果的準(zhǔn)確性,底物反應(yīng)時(shí)間到后應(yīng)盡快加入終止液。
8. 用酶聯(lián)儀在450nm波長依序測量各孔的光密度(OD值)。 在加終止液后15分鐘以內(nèi)進(jìn)行檢測。