樣本要求:
1.標本采集后盡早進行提取,提取按相關文獻進行,提取后應盡快進行實驗。若不能馬上進行試驗,可將標本放于-20℃保存,但應避免反復凍融。
2.不能檢測含 NaN3 的樣品,因 NaN3 抑制辣根過氧化物酶的(HRP)活性。
公司產(chǎn)品僅供體外研究使用,不用于臨床診斷!
|
產(chǎn)品名稱
|
TNFα人腫瘤壞死因子αELISA檢測試劑盒
|
|
英文名稱
|
Human Tumor necrosis factor α,TNFα ELISA Kit
|
|
貨號
|
PH096396
|
包裝規(guī)格:液體盒裝 96T/48T
保存條件:2-8℃(長期不使用時,部分試劑應放在-20℃條件下)。
有效期:6個月
存儲運輸:低溫避光,請勿重壓,輕拿輕放(現(xiàn)貨供應,一般為快遞運輸,江浙滬隔天到,外地及偏遠地方三至五天時間到貨。)
Elisa試劑盒可測種屬:人、大鼠、小鼠、兔子、豬、犬、猴、馬、牛、羊、雞、鴨、魚等。
Elisa試劑盒適用范圍:此試劑盒僅用于科研實驗,禁用于臨床。
|
2400 ng/L
|
5 號標準品
|
150μl 的原倍標準品加入 150μl 標準品稀釋液
|
|
1200ng/L
|
4 號標準品
|
150μl 的 5 號標準品加入 150μl 標準品稀釋液
|
|
600ng/L
|
3 號標準品
|
150μl 的 4 號標準品加入 150μl 標準品稀釋液
|
|
300ng/L
|
2 號標準品
|
150μl 的 3 號標準品加入 150μl 標準品稀釋液
|
|
150ng/L
|
1 號標準品
|
150μl 的 2 號標準品加入 150μl 標準品稀釋液
|
組成及試劑配制 :
1. 酶聯(lián)板:一塊(96孔)
2. 標準品(凍干品):2瓶,每瓶臨用前以樣品稀釋液稀釋至1ml,蓋好后靜置10分鐘以上,然后反復顛倒/搓動以助溶解,其濃度為100 ng/ml,做系列倍比稀釋(注:不要直接在板中進行倍比稀釋)后,分別稀釋成100 ng/ml,50 ng/ml,25 ng/ml,12.5 ng/ml,6.25 ng/ml,3.12 ng/ml,1.56 ng/ml,樣品稀釋液直接作為標準濃度0 ng/ml,臨用前15分鐘內配制。
如配制50 ng/ml標準品:取0.5ml (不要少于0.5ml ) 100 ng/ml的上述標準品加入含有0.5ml樣品稀釋液的Eppendorf管中,混勻即可,其余濃度以此類推。
3. 樣品稀釋液:1×20ml/瓶。
4. 檢測稀釋液A:1×10ml/瓶。
5. 檢測稀釋液B:1×10ml/瓶。
6. 檢測溶液A:1×120ul/瓶(1:100)臨用前以檢測稀釋液A 1:100稀釋,稀釋前根據(jù)預先計算好的每次實驗所需的總量配制(100ul/孔),實際配制時應多配制0.1-0.2ml。如10ul檢測溶液A加990ul檢測稀釋液A的比例配制,輕輕混勻,在使用前一小時內配制。
7. 檢測溶液B:1×120ul/瓶(1:100)臨用前以檢測稀釋液B 1:100稀釋。稀釋方法同檢測溶液A。
8. 底物溶液:1×10ml/瓶。
9. 濃洗滌液:1×30ml/瓶,使用時每瓶用蒸餾水稀釋25倍。
10. 終止液:1×10ml/瓶(2N H2SO4)。

樣本收集及儲存:
1. 細胞培養(yǎng)上清:
將細胞培養(yǎng)基移至無菌離心管,在 4℃條件下 1000 ×g 離心 10 min,然后將上清等量分裝于小 EP 管并于-20℃下保存(24 小時內檢測可放入 2-8℃儲存),避免反復凍融。
2. 血清樣本:
室溫血液自然凝固 20 min 后,在 4℃條件下 1000×g 離心 10 min,然后將上清等量分裝于小 EP 管并于-20℃下保存(24 小時內檢測可放入 2-8℃儲存),保存過程中如有沉淀,請再次離心,避免反復凍融。
3. 血漿樣本:
將全血收集到含抗血凝劑的管中,根據(jù)標本的實際要求選擇 EDTA,檸檬酸鈉或肝素作為抗凝劑,混合 20 min,在 4℃條件下 1000×g 離心 10 min,然后將上清等量分裝于小 EP 管并于-20℃下保存(24小時內檢測可放入 2-8℃儲存),避免反復凍融。
操作步驟:
實驗開始前,請?zhí)崆芭渲煤盟性噭?,試劑或樣品稀釋時,均需混勻,混勻時盡量避免起泡。每次檢測都應該做標準曲線。如樣品濃度過高時,用樣品稀釋液進行稀釋,以使樣品符合試劑盒的檢測范圍。
1. 加樣:分別設空白孔、標準孔、待測樣品孔。空白孔加樣品稀釋液100μl,余孔分別加標準品或待測樣品100μl,注意不要有氣泡,加樣將樣品加于酶標板孔底部,盡量不觸及孔壁,輕輕晃動混勻,酶標板加上蓋或覆膜,37℃反應120分鐘。
為保證實驗結果有效性,每次實驗請使用新的標準品溶液。
2. 棄去液體,甩干,不用洗滌。每孔加生物素標記抗體工作液100μl(取1μl生物素標記抗體加99μl生物素標記抗體稀釋液的比例配制,輕輕混勻,在使用前一小時內配制),37℃,60分鐘。
3. 溫育60分鐘后,棄去孔內液體,甩干,洗板3次,每次浸泡1-2分鐘,350μl/每孔,甩干。
4. 每孔加辣根過氧化物酶標記親和素工作液(同生物素標記抗體工作液)100μl,37℃,60分鐘。
5. 溫育60分鐘后,棄去孔內液體,甩干,洗板5次,每次浸泡1-2分鐘,350μl/每孔,甩干。
6. 依序每孔加底物溶液90μl,37℃避光顯色(30分鐘內,此時肉眼可見標準品的前3-4孔有明顯的梯度藍色,后3-4孔梯度不明顯,即可終止)。
7. 依序每孔加終止溶液50μl,終止反應(此時藍色立轉黃色)。終止液的加入順序應盡量與底物液的加入順序相同。為了保證實驗結果的準確性,底物反應時間到后應盡快加入終止液。
8. 用酶聯(lián)儀在450nm波長依序測量各孔的光密度(OD值)。 在加終止液后15分鐘以內進行檢測。
人蛋白質二硫鍵異構酶(PDI)酶聯(lián)吸附測定試劑盒小馬勃3-2Afadin (D1Y3Z) Rabbit mAb
人蛋白二硫化物異構酶A5(PDIA5)酶聯(lián)吸附測定試劑盒東方伊薩酵母TRIB2 (D8P2X) Rabbit mAb
人神經(jīng)生長因子(NGF)酶聯(lián)吸附測定試劑盒 冷湖黃桿菌Acetyl-Histone H4 (Lys16) (E2B8W) Rabbit mAb
人絲氨酸蛋白酶33(PRSS33)酶聯(lián)吸附測定試劑盒少根根霉Non-phospho (Active) β-Catenin (Ser33/37/Thr41) (D13A1) Rabbit mAb (PE Conjugate)
人低分子肝素(LMWH)酶聯(lián)吸附測定試劑盒 解蛋白弧菌DAX1 (D2F1) Rabbit mAb
人低分子量角蛋白(CK-LMW)酶聯(lián)吸附測定試劑盒枯草芽孢桿菌PVR/CD155 (D3G7H) Rabbit mAb
人低分子質量蛋白7/β型蛋白酶體9(LMP7/PSMB9)酶聯(lián)吸附測定試劑盒豬丹絲菌Phospho-Rpb1 CTD (Ser2/Ser5) (D1G3K) Rabbit mAb
人低密度脂蛋白(LDL)酶聯(lián)吸附測定試劑盒黃曲霉Griess Reagent Nitrite Measurement Kit
人低密度脂蛋白受體(LDLR)酶聯(lián)吸附測定試劑盒谷氨酸棒桿菌Prolactin Receptor (D4A9) Rabbit mAb
人低密度脂蛋白受體相關蛋白6(LRP6)酶聯(lián)吸附測定試劑盒禾谷鐮孢菌Mios (D12C6) Rabbit mAb
人抵抗素(RETN)酶聯(lián)吸附測定試劑盒 局限青霉DDC (D6N8N) Rabbit mAb
人核糖體蛋白S6激酶β1(RPS6Kβ1)酶聯(lián)吸附測定試劑盒稻黑孢菌Kindlin-2 Antibody
人電子轉移黃素蛋白β肽(ETFβ)酶聯(lián)吸附測定試劑盒 副溶血弧菌PTMScan® Symmetric Di-Methyl Arginine Motif [sdme-RG] Kit
人淀粉樣前體蛋白(APP)酶聯(lián)吸附測定試劑盒 小青霉Phospho-Na
人蕈堿型乙酰膽堿受體(M-AChR)???聯(lián)吸附測定試劑盒 普通鐮刀菌Phospho-RelB (Ser552) (D41B9) XP® Rabbit mAb (PE Conjugate)
TNFα人腫瘤壞死因子αELISA檢測試劑盒高爾基復合體相關蛋白1抗體Human KRT36 ELISA KitCBZ-D-纈氨酸
乙酰輔酶A羧化酶1ACCα抗體Human KLHL4 ELISA KitL-脯氨酸甲酯鹽酸鹽
腺嘌呤核苷酸轉運蛋白1、2、3、4抗體Human KLHL9 ELISA KitNa-苯甲酰-L-精氨酰鹽酸鹽
去整合素樣金屬蛋白酶12Human KLRF1 ELISA Kitγ-L-谷氨酰-β-萘酰
磷酸化乙酰輔酶A羧化酶1ACCα抗體Human KRT40 ELISA KitD-半胱氨酸
膜粘連蛋白2受體抗體Human KPNA1 ELISA KitL-高苯丙氨酸
晚期糖基化終末產(chǎn)物特異性受體抗體Human KLRG1 ELISA Kit人肝素輔因子Ⅱ(HCⅡ)ELISA試劑盒, HCⅡ ELISA kit
ADCK5蛋白抗體Human KLHL28 ELISA Kit人胃蛋白酶原A(PG-A)ELISA試劑盒,