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產(chǎn)品資料

PCX人足細(xì)胞標(biāo)記蛋白/足盂蛋白ELISA方法

PCX人足細(xì)胞標(biāo)記蛋白/足盂蛋白ELISA方法
  • 如果您對該產(chǎn)品感興趣的話,可以
  • 產(chǎn)品名稱:PCX人足細(xì)胞標(biāo)記蛋白/足盂蛋白ELISA方法
  • 產(chǎn)品型號:PH096340
  • 產(chǎn)品展商:派瑞曼
  • 產(chǎn)品文檔:無相關(guān)文檔
簡單介紹
PCX人足細(xì)胞標(biāo)記蛋白/足盂蛋白ELISA方法應(yīng)用范圍:血清、血漿、組織勻漿、細(xì)胞培養(yǎng)物上清或其它相關(guān)液體(本產(chǎn)品僅供實(shí)驗(yàn)室科研及非臨床用途) ,產(chǎn)品規(guī)格: 48T/96T。
產(chǎn)品描述

公司產(chǎn)品僅供體外研究使用,不用于臨床診斷!

產(chǎn)品名稱

PCX人足細(xì)胞標(biāo)記蛋白/足盂蛋白ELISA方法

英文名稱

Human Podocalyxin,PCX ELISA Kit

貨號

PH096340

包裝規(guī)格:液體盒裝 96T/48T
保存條件:2-8℃(長期不使用時,部分試劑應(yīng)放在-20℃條件下)。
有效期:6個月
存儲運(yùn)輸:低溫避光,請勿重壓,輕拿輕放(現(xiàn)貨供應(yīng),一般為快遞運(yùn)輸,江浙滬隔天到,外地及偏遠(yuǎn)地方三至五天時間到貨。)
Elisa試劑盒可測種屬:人、大鼠、小鼠、兔子、豬、犬、猴、馬、牛、羊、雞、鴨、魚等。
Elisa試劑盒適用范圍:此試劑盒僅用于科研實(shí)驗(yàn),禁用于臨床。
樣本要求:
1.標(biāo)本采集后盡早進(jìn)行提取,提取按相關(guān)文獻(xiàn)進(jìn)行,提取后應(yīng)盡快進(jìn)行實(shí)驗(yàn)。若不能馬上進(jìn)行試驗(yàn),可將標(biāo)本放于-20℃保存,但應(yīng)避免反復(fù)凍融。
2.不能檢測含 NaN3 的樣品,因 NaN3 抑制辣根過氧化物酶的(HRP)活性。

2400 ng/L

5 號標(biāo)準(zhǔn)品

150μl 的原倍標(biāo)準(zhǔn)品加入 150μl 標(biāo)準(zhǔn)品稀釋液

1200ng/L

4 號標(biāo)準(zhǔn)品

150μl 的 5 號標(biāo)準(zhǔn)品加入 150μl 標(biāo)準(zhǔn)品稀釋液

600ng/L 

3 號標(biāo)準(zhǔn)品

150μl 的 4 號標(biāo)準(zhǔn)品加入 150μl 標(biāo)準(zhǔn)品稀釋液

300ng/L

2 號標(biāo)準(zhǔn)品

150μl 的 3 號標(biāo)準(zhǔn)品加入 150μl 標(biāo)準(zhǔn)品稀釋液

150ng/L

1 號標(biāo)準(zhǔn)品

150μl 的 2 號標(biāo)準(zhǔn)品加入 150μl 標(biāo)準(zhǔn)品稀釋液

組成及試劑配制 :
1. 酶聯(lián)板:一塊(96孔) 
2. 標(biāo)準(zhǔn)品(凍干品):2瓶,每瓶臨用前以樣品稀釋液稀釋至1ml,蓋好后靜置10分鐘以上,然后反復(fù)顛倒/搓動以助溶解,其濃度為100 ng/ml,做系列倍比稀釋(注:不要直接在板中進(jìn)行倍比稀釋)后,分別稀釋成100 ng/ml,50 ng/ml,25 ng/ml,12.5 ng/ml,6.25 ng/ml,3.12 ng/ml,1.56 ng/ml,樣品稀釋液直接作為標(biāo)準(zhǔn)濃度0 ng/ml,臨用前15分鐘內(nèi)配制。
如配制50 ng/ml標(biāo)準(zhǔn)品:取0.5ml (不要少于0.5ml ) 100 ng/ml的上述標(biāo)準(zhǔn)品加入含有0.5ml樣品稀釋液的Eppendorf管中,混勻即可,其余濃度以此類推。
3. 樣品稀釋液:1×20ml/瓶。
4. 檢測稀釋液A:1×10ml/瓶。
5. 檢測稀釋液B:1×10ml/瓶。
6. 檢測溶液A:1×120ul/瓶(1:100)臨用前以檢測稀釋液A 1:100稀釋,稀釋前根據(jù)預(yù)先計(jì)算好的每次實(shí)驗(yàn)所需的總量配制(100ul/孔),實(shí)際配制時應(yīng)多配制0.1-0.2ml。如10ul檢測溶液A加990ul檢測稀釋液A的比例配制,輕輕混勻,在使用前一小時內(nèi)配制。
7. 檢測溶液B:1×120ul/瓶(1:100)臨用前以檢測稀釋液B 1:100稀釋。稀釋方法同檢測溶液A。
8. 底物溶液:1×10ml/瓶。 
9. 濃洗滌液:1×30ml/瓶,使用時每瓶用蒸餾水稀釋25倍。 
10. 終止液:1×10ml/瓶(2N H2SO4)。

樣本收集及儲存:
1. 細(xì)胞培養(yǎng)上清:
將細(xì)胞培養(yǎng)基移至無菌離心管,在 4℃條件下 1000 ×g 離心 10 min,然后將上清等量分裝于小 EP 管并于-20℃下保存(24 小時內(nèi)檢測可放入 2-8℃儲存),避免反復(fù)凍融。
2. 血清樣本:
室溫血液自然凝固 20 min 后,在 4℃條件下 1000×g 離心 10 min,然后將上清等量分裝于小 EP 管并于-20℃下保存(24 小時內(nèi)檢測可放入 2-8℃儲存),保存過程中如有沉淀,請?jiān)俅坞x心,避免反復(fù)凍融。
3. 血漿樣本:
將全血收集到含抗血凝劑的管中,根據(jù)標(biāo)本的實(shí)際要求選擇 EDTA,檸檬酸鈉或肝素作為抗凝劑,混合 20 min,在 4℃條件下 1000×g 離心 10 min,然后將上清等量分裝于小 EP 管并于-20℃下保存(24小時內(nèi)檢測可放入 2-8℃儲存),避免反復(fù)凍融。
人骨成型蛋白3(BMP-3)酶聯(lián)吸附測定試劑盒 金龜子綠僵菌Bak (D4E4) Rabbit mAb

人鈣磷蛋白(CAPS)酶聯(lián)吸附測定試劑盒牛型放線菌SignalSilence® SP1 siRNA II

人脂肪型脂肪酸結(jié)合蛋白(FABP4)酶聯(lián)吸附測定試劑盒 假桄榔葉點(diǎn)霉Bora (D2B9) Rabbit mAb

人甲胎蛋白異質(zhì)體3(AFP-L3)酶聯(lián)吸附測定試劑盒 厚壁芽孢桿菌Phospho-MEK1/2 (Ser221) Blocking Peptide

αL巖藻糖苷酶(FUCA)酶聯(lián)吸附測定試劑盒 蘇云金芽胞桿菌蠟螟亞種Phospho-MERIT40 (Ser29) Antibody

人周期素B(CCNB)酶聯(lián)吸附測定試劑盒 哈茨木霉PathScan® Phospho-Acetyl-CoA Carboxylase (Ser79) Chemiluminescent Sandwich ELISA Kit

人聚集蛋白聚糖(AGC)酶聯(lián)吸附測定試劑盒 釀酒酵母ITCH (D8Q6D) Rabbit mAb

人晚期糖基化終末產(chǎn)物受體(AGER)酶聯(lián)吸附測定試劑盒  豌豆根瘤菌Bcl-11B (D6F1) XP® Rabbit mAb

CD3d分子(CD3d)酶聯(lián)吸附測定試劑盒斑玉蕈Bcl-11B (D6F1) XP® Rabbit mAb

人前梯度蛋白2(AGR2)酶聯(lián)吸附測定試劑盒  地霉半乳糖酵母Lapatinib

人集聚蛋白(AGRN)酶聯(lián)吸附測定試劑盒 粘著劍菌WIPI1 Antibody

人血管緊張素原(AGT)酶聯(lián)吸附測定試劑盒 Acinetobacter genospeciesPhospho-ALK (Tyr1078) (D28B4) Rabbit mAb

人異體移植炎性因子1(AIF1)酶聯(lián)吸附測定試劑盒 膠孢SignalSilence® Cbl-b siRNA I

人雄誘導(dǎo)蛋白1(AIG1)酶聯(lián)吸附測定試劑盒 紅球菌DDR2 Antibody

人白活化黏附因子(ALCAM)酶聯(lián)吸附測定試劑盒 松針散斑殼CDK5 (1H3) Mouse mAb
PCX人足細(xì)胞標(biāo)記蛋白/足盂蛋白ELISA方法脂聯(lián)素受體2抗體Human LSM8 ELISA Kit小鼠凝血因子Ⅹ(FⅩ)ELISA試劑盒,

ANGEL1蛋白抗體Human LSP1 ELISA Kit抑瘤素M(OSM)ELISA試劑盒--動物,人

ANGEL2蛋白抗體Human LSR ELISA Kit膽酸(CA)ELISA試劑盒--動物,人

ANKLE2蛋白抗體Human LTBP1(Latent-transforming growth factor beta-binding protein 1) ELISA Kit促黃體(LH)ELISA試劑盒--動物,人

特異性錨樣蛋白1抗體Human LUC7L ELISA KitL-絲氨酸

錨蛋白重復(fù)結(jié)構(gòu)域蛋白13B抗體Human LUC7L2 ELISA Kit蘑菇假單胞菌價格

錨蛋白重復(fù)結(jié)構(gòu)域蛋白20A1抗體Human LY6D ELISA Kit小鼠環(huán)孢素A(CsA)ELISA試劑盒,

錨蛋白重復(fù)結(jié)構(gòu)域蛋白20A3抗體Human LUZP1 ELISA Kit小鼠二肽基肽酶Ⅳ(DPPⅣ)ELISA試劑盒,
操作步驟:
實(shí)驗(yàn)開始前,請?zhí)崆芭渲煤盟性噭?,試劑或樣品稀釋時,均需混勻,混勻時盡量避免起泡。每次檢測都應(yīng)該做標(biāo)準(zhǔn)曲線。如樣品濃度過高時,用樣品稀釋液進(jìn)行稀釋,以使樣品符合試劑盒的檢測范圍。
1.         加樣:分別設(shè)空白孔、標(biāo)準(zhǔn)孔、待測樣品孔。空白孔加樣品稀釋液100μl,余孔分別加標(biāo)準(zhǔn)品或待測樣品100μl,注意不要有氣泡,加樣將樣品加于酶標(biāo)板孔底部,盡量不觸及孔壁,輕輕晃動混勻,酶標(biāo)板加上蓋或覆膜,37℃反應(yīng)120分鐘。
為保證實(shí)驗(yàn)結(jié)果有效性,每次實(shí)驗(yàn)請使用新的標(biāo)準(zhǔn)品溶液。
2.         棄去液體,甩干,不用洗滌。每孔加生物素標(biāo)記抗體工作液100μl(取1μl生物素標(biāo)記抗體加99μl生物素標(biāo)記抗體稀釋液的比例配制,輕輕混勻,在使用前一小時內(nèi)配制),37℃,60分鐘。
3.         溫育60分鐘后,棄去孔內(nèi)液體,甩干,洗板3次,每次浸泡1-2分鐘,350μl/每孔,甩干。
4.         每孔加辣根過氧化物酶標(biāo)記親和素工作液(同生物素標(biāo)記抗體工作液)100μl,37℃,60分鐘。
5.         溫育60分鐘后,棄去孔內(nèi)液體,甩干,洗板5次,每次浸泡1-2分鐘,350μl/每孔,甩干。
6.         依序每孔加底物溶液90μl,37℃避光顯色(30分鐘內(nèi),此時肉眼可見標(biāo)準(zhǔn)品的前3-4孔有明顯的梯度藍(lán)色,后3-4孔梯度不明顯,即可終止)。
7.         依序每孔加終止溶液50μl,終止反應(yīng)(此時藍(lán)色立轉(zhuǎn)黃色)。終止液的加入順序應(yīng)盡量與底物液的加入順序相同。為了保證實(shí)驗(yàn)結(jié)果的準(zhǔn)確性,底物反應(yīng)時間到后應(yīng)盡快加入終止液。
8.         用酶聯(lián)儀在450nm波長依序測量各孔的光密度(OD值)。 在加終止液后15分鐘以內(nèi)進(jìn)行檢測。

 


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