樣本要求:
1.標(biāo)本采集后盡早進行提取,提取按相關(guān)文獻進行,提取后應(yīng)盡快進行實驗。若不能馬上進行試驗,可將標(biāo)本放于-20℃保存,但應(yīng)避免反復(fù)凍融。
2.不能檢測含 NaN3 的樣品,因 NaN3 抑制辣根過氧化物酶的(HRP)活性。
公司產(chǎn)品僅供體外研究使用,不用于臨床診斷!
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產(chǎn)品名稱
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CTSH人組織蛋白酶HELISA檢測試劑盒
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英文名稱
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Human cathepsin H,CTSH ELISA kit
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貨號
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PH096330
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包裝規(guī)格:液體盒裝 96T/48T
保存條件:2-8℃(長期不使用時,部分試劑應(yīng)放在-20℃條件下)。
有效期:6個月
存儲運輸:低溫避光,請勿重壓,輕拿輕放(現(xiàn)貨供應(yīng),一般為快遞運輸,江浙滬隔天到,外地及偏遠地方三至五天時間到貨。)
Elisa試劑盒可測種屬:人、大鼠、小鼠、兔子、豬、犬、猴、馬、牛、羊、雞、鴨、魚等。
Elisa試劑盒適用范圍:此試劑盒僅用于科研實驗,禁用于臨床。
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2400 ng/L
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5 號標(biāo)準(zhǔn)品
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150μl 的原倍標(biāo)準(zhǔn)品加入 150μl 標(biāo)準(zhǔn)品稀釋液
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1200ng/L
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4 號標(biāo)準(zhǔn)品
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150μl 的 5 號標(biāo)準(zhǔn)品加入 150μl 標(biāo)準(zhǔn)品稀釋液
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600ng/L
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3 號標(biāo)準(zhǔn)品
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150μl 的 4 號標(biāo)準(zhǔn)品加入 150μl 標(biāo)準(zhǔn)品稀釋液
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300ng/L
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2 號標(biāo)準(zhǔn)品
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150μl 的 3 號標(biāo)準(zhǔn)品加入 150μl 標(biāo)準(zhǔn)品稀釋液
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150ng/L
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1 號標(biāo)準(zhǔn)品
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150μl 的 2 號標(biāo)準(zhǔn)品加入 150μl 標(biāo)準(zhǔn)品稀釋液
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組成及試劑配制 :
1. 酶聯(lián)板:一塊(96孔)
2. 標(biāo)準(zhǔn)品(凍干品):2瓶,每瓶臨用前以樣品稀釋液稀釋至1ml,蓋好后靜置10分鐘以上,然后反復(fù)顛倒/搓動以助溶解,其濃度為100 ng/ml,做系列倍比稀釋(注:不要直接在板中進行倍比稀釋)后,分別稀釋成100 ng/ml,50 ng/ml,25 ng/ml,12.5 ng/ml,6.25 ng/ml,3.12 ng/ml,1.56 ng/ml,樣品稀釋液直接作為標(biāo)準(zhǔn)濃度0 ng/ml,臨用前15分鐘內(nèi)配制。
如配制50 ng/ml標(biāo)準(zhǔn)品:取0.5ml (不要少于0.5ml ) 100 ng/ml的上述標(biāo)準(zhǔn)品加入含有0.5ml樣品稀釋液的Eppendorf管中,混勻即可,其余濃度以此類推。
3. 樣品稀釋液:1×20ml/瓶。
4. 檢測稀釋液A:1×10ml/瓶。
5. 檢測稀釋液B:1×10ml/瓶。
6. 檢測溶液A:1×120ul/瓶(1:100)臨用前以檢測稀釋液A 1:100稀釋,稀釋前根據(jù)預(yù)先計算好的每次實驗所需的總量配制(100ul/孔),實際配制時應(yīng)多配制0.1-0.2ml。如10ul檢測溶液A加990ul檢測稀釋液A的比例配制,輕輕混勻,在使用前一小時內(nèi)配制。
7. 檢測溶液B:1×120ul/瓶(1:100)臨用前以檢測稀釋液B 1:100稀釋。稀釋方法同檢測溶液A。
8. 底物溶液:1×10ml/瓶。
9. 濃洗滌液:1×30ml/瓶,使用時每瓶用蒸餾水稀釋25倍。
10. 終止液:1×10ml/瓶(2N H2SO4)。

樣本收集及儲存:
1. 細胞培養(yǎng)上清:
將細胞培養(yǎng)基移至無菌離心管,在 4℃條件下 1000 ×g 離心 10 min,然后將上清等量分裝于小 EP 管并于-20℃下保存(24 小時內(nèi)檢測可放入 2-8℃儲存),避免反復(fù)凍融。
2. 血清樣本:
室溫血液自然凝固 20 min 后,在 4℃條件下 1000×g 離心 10 min,然后將上清等量分裝于小 EP 管并于-20℃下保存(24 小時內(nèi)檢測可放入 2-8℃儲存),保存過程中如有沉淀,請再次離心,避免反復(fù)凍融。
3. 血漿樣本:
將全血收集到含抗血凝劑的管中,根據(jù)標(biāo)本的實際要求選擇 EDTA,檸檬酸鈉或肝素作為抗凝劑,混合 20 min,在 4℃條件下 1000×g 離心 10 min,然后將上清等量分裝于小 EP 管并于-20℃下保存(24小時內(nèi)檢測可放入 2-8℃儲存),避免反復(fù)凍融。
操作步驟:
實驗開始前,請?zhí)崆芭渲煤盟性噭噭┗驑悠废♂寱r,均需混勻,混勻時盡量避免起泡。每次檢測都應(yīng)該做標(biāo)準(zhǔn)曲線。如樣品濃度過高時,用樣品稀釋液進行稀釋,以使樣品符合試劑盒的檢測范圍。
1. 加樣:分別設(shè)空白孔、標(biāo)準(zhǔn)孔、待測樣品孔??瞻卓准訕悠废♂屢?00μl,余孔分別加標(biāo)準(zhǔn)品或待測樣品100μl,注意不要有氣泡,加樣將樣品加于酶標(biāo)板孔底部,盡量不觸及孔壁,輕輕晃動混勻,酶標(biāo)板加上蓋或覆膜,37℃反應(yīng)120分鐘。
為保證實驗結(jié)果有效性,每次實驗請使用新的標(biāo)準(zhǔn)品溶液。
2. 棄去液體,甩干,不用洗滌。每孔加生物素標(biāo)記抗體工作液100μl(取1μl生物素標(biāo)記抗體加99μl生物素標(biāo)記抗體稀釋液的比例配制,輕輕混勻,在使用前一小時內(nèi)配制),37℃,60分鐘。
3. 溫育60分鐘后,棄去孔內(nèi)液體,甩干,洗板3次,每次浸泡1-2分鐘,350μl/每孔,甩干。
4. 每孔加辣根過氧化物酶標(biāo)記親和素工作液(同生物素標(biāo)記抗體工作液)100μl,37℃,60分鐘。
5. 溫育60分鐘后,棄去孔內(nèi)液體,甩干,洗板5次,每次浸泡1-2分鐘,350μl/每孔,甩干。
6. 依序每孔加底物溶液90μl,37℃避光顯色(30分鐘內(nèi),此時肉眼可見標(biāo)準(zhǔn)品的前3-4孔有明顯的梯度藍色,后3-4孔梯度不明顯,即可終止)。
7. 依序每孔加終止溶液50μl,終止反應(yīng)(此時藍色立轉(zhuǎn)黃色)。終止液的加入順序應(yīng)盡量與底物液的加入順序相同。為了保證實驗結(jié)果的準(zhǔn)確性,底物反應(yīng)時間到后應(yīng)盡快加入終止液。
8. 用酶聯(lián)儀在450nm波長依序測量各孔的光密度(OD值)。 在加終止液后15分鐘以內(nèi)進行檢測。
人白介素23(IL-23)酶聯(lián)吸附測定試劑盒嗜熱脂肪地芽孢桿菌NBC1/SLC4A4 Antibody
人γ干擾素(IFN-γ)酶聯(lián)吸附測定試劑盒約氏不動桿菌Phospho-GIT2 (Tyr392) (D8N9A) Rabbit mAb
人腫瘤壞死因子α(TNF-α)酶聯(lián)吸附測定試劑盒黑曲霉Upf2 (D3B10) Rabbit mAb
人轉(zhuǎn)化生長因子β1(TGF-β1)酶聯(lián)吸附測定試劑盒 釀酒酵母UBE2S (D5H9H) Rabbit mAb
人血管內(nèi)皮生長因子(VEGF-A)酶聯(lián)吸附測定試劑盒 日內(nèi)瓦毛霉SignalSilence® MDR1/ABCB1 siRNA I
人表皮調(diào)節(jié)素(EREG)酶聯(lián)吸附測定試劑盒云南楊黃Phospho-HS1 (Tyr397) (D12C1) XP® Rabbit mAb (PE Conjugate)
人瘦素(LEP)酶聯(lián)吸附測定試劑盒麥芽糖假絲酵母Cdc45 (D7G6) Rabbit mAb
人B瘤因子2(Bcl-2)酶聯(lián)吸附測定試劑盒平菇Ki-67 (D3B5) Rabbit mAb (Alexa Fluor® 488 Conjugate)
人尿微量白蛋白(MAU)酶聯(lián)吸附測定試劑盒黃青霉Resazurin Cell Viability Kit
人促黃體**(LH)酶聯(lián)吸附測定試劑盒殺鮭氣單胞菌Toll-like Receptor 8 (D3Z6J) Rabbit mAb
人腎素(REN)酶聯(lián)吸附測定試劑盒變幻青霉PhosphoPlus® β-Catenin (Ser675) Antibody Duet
人組織蛋白酶C(CTSC)酶聯(lián)吸附測定試劑盒 腐皮殼PI3 Kinase p55 (D2B3) Rabbit mAb
人C-肽(C-P)酶聯(lián)吸附測定試劑盒淺金鏈霉菌PINCH (5G7) Mouse mAb
人氧化低密度脂蛋白(OxLDL)酶聯(lián)吸附測定試劑盒血紅紅曲霉CHD8 (D3C1) Rabbit mAb
人載脂蛋白A1(ApoA1)酶聯(lián)吸附測定試劑盒 黑曲霉Phospho-HSP27 (Ser82) (D1H2F6) XP® Rabbit mAb (Alexa Fluor® 647 Conjugate)
CTSH人組織蛋白酶HELISA檢測試劑盒ho GTP酶激活蛋白20抗體Human MAP4K5 ELISA Kit小鼠正常T表達和分泌因子(RANTES/CCL5)ELISA試劑盒,
含錨蛋白重復(fù)序列-因子信號抑制物盒蛋白家族10抗體Human MAN2B2 ELISA Kit小鼠糖皮質(zhì)類固醇受體(GR)ELISA試劑盒,
乙脫氫酶1蛋白家族L1抗體Human MAN1A2 ELISA Kitα1酸性糖蛋白(α1-AGP)ELISA試劑盒--動物,人
軸抑制蛋白2抗體Human MAP4K3 ELISA Kit糖蛋白49A(Gp49a)ELISA試劑盒--動物,人
血管**素相關(guān)蛋白6抗體Human MANBAL ELISA Kit游離甲狀腺素(FT4)ELISA試劑盒--動物,人
Muellerian繆勒管抑制因子抗體Human MANEA ELISA KitL-賴氨酸乙酯
酪氨酸蛋白激酶受體A8抗體Human MAML1(Mastermind-like protein 1) ELISA Kit人葡萄糖激酶(GCK)ELISA試劑盒,GCK ELISA
脂肪酰輔酶A家族成員1抗體Human MALT1 ELISA Kit小鼠α甘露糖苷酶(α Manase)ELISA試劑盒,