培養(yǎng)基性能測試:
1、測試菌株選擇 測試菌株是具有其代表種的穩(wěn)定特性并能有效證明實(shí)驗(yàn)室特定培養(yǎng)基zui佳性能的一套菌株,應(yīng)來自國際/國家標(biāo)準(zhǔn)菌種保藏中心ATCC標(biāo)準(zhǔn)菌株,菌株的選擇參考衛(wèi)生行業(yè)標(biāo)準(zhǔn)WS/T232-2002《商業(yè)性微生物培養(yǎng)基質(zhì)量檢驗(yàn)規(guī)程》。
2、定量測試方法(改良Miles-Misra法) 測試菌株過夜培養(yǎng)物10倍遞增稀釋;測試平板和參照平板劃分為4個區(qū)域并標(biāo)記;從zui高稀釋度開始,分別滴一滴稀釋液于試驗(yàn)平板和對照平板標(biāo)記好的區(qū)域;將稀釋液涂滿整個1/4區(qū)域,37°C培養(yǎng)18小時;對易計(jì)數(shù)的區(qū)域計(jì)數(shù),按公式計(jì)算生長率(生長率=待測培養(yǎng)基平板上得到的菌落總數(shù)/參考培養(yǎng)基平板上獲得的菌落總數(shù))。非選擇性培養(yǎng)基上目標(biāo)菌的生長率應(yīng)不低于0.7,該類培養(yǎng)基應(yīng)易于目標(biāo)菌生長;選擇性培養(yǎng)基上目標(biāo)菌的生長率應(yīng)不低于0.1。
3、半定量測試方法(改進(jìn)的劃線法接種法) 平板分ABCD四區(qū),共劃16條線,平行線大概相隔0.5cm,每條有菌落生長的劃線記作1分,每個僅一半的線有菌落生長記作0.5分,沒有菌落生長或生長量少于劃線的一半記作0分,分?jǐn)?shù)加起來得到生長指數(shù)G。目標(biāo)菌在培養(yǎng)基上應(yīng)呈現(xiàn)典型的生長,而非目標(biāo)菌的生長應(yīng)部分或完全被抑制,目標(biāo)菌的生長指數(shù)G大于6時,培養(yǎng)基可接受。
4、定性測試方法(平板接種觀察法) 用接種環(huán)取測試菌培養(yǎng)物,在測試培養(yǎng)基表面劃平行直線。按標(biāo)準(zhǔn)中規(guī)定的培養(yǎng)時間和溫度對接種后的平板進(jìn)行培養(yǎng),目標(biāo)菌應(yīng)呈現(xiàn)良好生長,并有典型的菌落外觀、大小和形態(tài),非目標(biāo)菌應(yīng)是微弱生長或無生長。