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技術(shù)文章

免 疫熒光(IF)樣本準(zhǔn)備要求

免 疫熒光(immunofluorescence，IF)是指用熒光標(biāo)記的抗體示蹤或檢查樣品中相應(yīng)抗原的方法。樣本準(zhǔn)備要求：

1、取材手法：要求取材器械鋒利，盡可能選擇薄的手術(shù)刀片，減少剪刀的使用，避免擠壓挫傷標(biāo)本。較準(zhǔn)確地取到目的部位組織，夾取標(biāo)本的時候盡量遠(yuǎn)離目的區(qū)域組織。
2、取材速度：盡量保證樣本離體后5min內(nèi)放入到合適的固定液內(nèi)。如果一只動物同時取多種器官，優(yōu)先取消化器官，其次取中 樞神經(jīng)系統(tǒng)器官(腦，脊髓等)，皮膚、肌肉等可放到后取。
3、組織塊大小：未經(jīng)灌注的標(biāo)本組織厚度不要超過1cm。
4、固定液：針對不同的標(biāo)本特點及實驗?zāi)康囊欢ㄒx用正確的固定液。
5、固定液量：固定液體積為組織的10倍，且組織能在容器內(nèi)自由移動，不貼壁不沉底，并做好清晰標(biāo)記。
6、固定溫度：常溫即可，無需冷藏，切勿冷凍結(jié)冰，否則固定液結(jié)冰形成冰晶嚴(yán)重破壞組織形態(tài)結(jié)構(gòu)。