ELISA 實(shí)驗(yàn)中血清的采集、處理和保存:
1、真空采血針采集 2ml 新鮮血液,加入無菌試管中;
2、采血后室溫靜置 1 小時(shí);
3、將采集血液用離心機(jī) 4℃,2500rpm 離心 10min,,將離心好的勻漿留上清,棄下面沉淀。
4、取上清。 分裝凍存?zhèn)溆茫?
2-8℃下,可放置保存 24-48 小時(shí);
-20℃下,可放置保存 1 個(gè)月;
-70℃下,可放置保存 6 個(gè)月;
5、根據(jù)你的實(shí)驗(yàn)需要,取適量上清夜進(jìn)行各種 ELISA 測定。
大部分 ELISA 檢測均以血清為標(biāo)本。血清標(biāo)本可按常規(guī)方法采集,應(yīng)注意避免溶血,紅細(xì)胞溶解時(shí)會釋放出具有過氧化物酶活性的物質(zhì),以 HRP 為標(biāo)記的 ELISA 測定中,溶血標(biāo)本可能會增加非特異性顯色。此外還應(yīng)避免細(xì) 菌污染,因?yàn)榫w中可能含有含有內(nèi)源性 HRP,也會產(chǎn)生假陽性反應(yīng)。血清標(biāo)本宜在新鮮 時(shí)檢測。如在冰箱中保存過久,其中的可發(fā)生聚合,間接法 ELISA 中可使本底加深。