溶血對ELISA檢測結(jié)果的影響主要體現(xiàn)在以下幾個方面：

一、假陽性干擾?

?血紅蛋白的HRP樣活性?：紅細(xì)胞中的血紅蛋白具有類似辣根過氧化物酶（HRP）的活性，在HRP標(biāo)記的ELISA中會催化底物（如TMB）非特異性顯色，導(dǎo)致OD值假性升高。

?典型表現(xiàn)?：重度溶血樣本（Hb>5g/L）可使乙肝表面抗原（HBsAg）或HIV抗體檢測的假陽性率顯著增加。

二、?樣本基質(zhì)破壞?

?蛋白降解?：溶血釋放的蛋白酶（如胰島素降解酶）會降解目標(biāo)抗原（如胰島素、肌鈣蛋白），導(dǎo)致檢測值假性降低。

?稀釋效應(yīng)?：紅細(xì)胞破裂釋放細(xì)胞內(nèi)液，稀釋血清中目標(biāo)物濃度，可能造成低濃度樣本漏檢。

三、?**檢測特異性下降?

?非特異性結(jié)合?：溶血后釋放的磷脂和細(xì)胞膜碎片可能吸附抗體，增加背景信號。

?ELISA方法差異?：一步法（樣本與酶標(biāo)抗體同時加入）比兩步法更易受溶血干擾。

為了減少溶血對ELISA結(jié)果的影響，應(yīng)采取以下措施：

1、正確采血：確保采血過程中針頭準(zhǔn)確進(jìn)入血管，避免抽血時間過長，減少血腫和泡沫的形成。

2、避免劇烈搖晃：樣本在運(yùn)輸和處理過程中應(yīng)避免劇烈搖晃，以防紅細(xì)胞破裂。

3、及時處理：采血后應(yīng)盡快分離血清或血漿，避免長時間放置導(dǎo)致溶血。

4、使用抗凝劑：根據(jù)實(shí)驗(yàn)需求選擇合適的抗凝劑，注意某些抗凝劑可能對ELISA有干擾。

5、樣本保存：凍存樣本時避免反復(fù)凍融，以減少蛋白的變性和降解。

通過這些方法，可以有效減少溶血對ELISA實(shí)驗(yàn)結(jié)果的影響，確保實(shí)驗(yàn)數(shù)據(jù)的準(zhǔn)確性和可靠性。