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ELISA檢測常見三種方法優(yōu)缺點

酶聯免yi 吸附實驗(ELISA) 即將已知的抗原或抗體吸附在固相載體表面,使酶標記的抗原抗體反應在固相表面進行的技術。該技術可用于檢測大分子抗原和特異性抗體等,具有快速、靈敏、簡便、載體易于標準化等優(yōu)點。ELISA檢測的三種方法雙抗體夾心法、間接法、競爭法優(yōu)缺點:


優(yōu)點:



   雙抗夾心法:高靈敏、高專一性,抗原無須事先純化,孵育2次,操作簡單,減少人為因素的影響,可靠的特異性。



   間接法:二抗可以加強信號,而且有多種選擇能做不同的測定分析。不加酶標記的1級抗體則能保留它多的免yi 反應性。



   競爭法:可適用比較不純的樣本,而且數據再現性很高。



缺點:



    雙抗夾心法:缺少鏈霉親和素的抗體,起不到型號放大作用,而且抗原一定得擁有兩個以上的抗體結合部位。



    間接法:要經過三次孵育,操作步驟繁瑣,稍微不注意會導致操作誤差,交互反應發(fā)生的機率較高。



    競爭法:競爭法對于手法要求非常高,整體的敏感性和專一性都較差。