細(xì)胞特性
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產(chǎn)品名稱 |
英文名稱 |
CHO-K1 -COGFP |
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分類 |
倉鼠細(xì)胞系 |
貨號 |
XG-X10080 |
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組織來源 |
卵巢 |
形態(tài) |
上皮細(xì)胞樣 |
細(xì)胞別稱；CHO-K1 -COGFP；中國倉鼠卵巢細(xì)胞-綠色熒光蛋白標(biāo)記；中國倉鼠卵巢細(xì)胞-CHO-K1 -COGFP
種屬來源；倉鼠
組織來源；卵巢
生長特性；貼壁生長
細(xì)胞形態(tài)；上皮細(xì)胞樣
細(xì)胞代數(shù)；10代以內(nèi)
背景簡介；Luciferase CHO-K1 細(xì)胞穩(wěn)定表達(dá)綠色熒光蛋白標(biāo)記。該細(xì)胞株性狀穩(wěn)定。可用作綠色熒光蛋白標(biāo)記活性檢測中的陽性對照，也可用于活體動物成像實驗。CHO-K1細(xì)胞是源自成年中國倉鼠卵巢深入活體組織切片的CHO細(xì)胞的亞克??；CHO-K1細(xì)胞的生長需要脯氨酸。puro藥篩濃度
細(xì)胞規(guī)格；1x106cells/T25培養(yǎng)瓶或者1mL凍存管包裝
支原體檢測；無
保藏機(jī)構(gòu)；ATCC; CCL-61 ATCC; CRL-9618 BCRC; 60006 BCRJ; 0069 DSMZ; ACC-110 ECACC; 85051005
培養(yǎng)基；DMEM+10% FBS+PS+10ug/ml 脯氨酸+4. 0ug/ml puro
培養(yǎng)條件；氣相：95%空氣+5%二氧化碳；溫度：37℃
凍存條件；無血清凍存液，液氮儲存
運(yùn)輸和保存
干冰運(yùn)輸及復(fù)蘇好存活細(xì)胞
（1）1mL凍存管包裝干冰運(yùn)輸，收到后-80度冰箱保存過夜后轉(zhuǎn)入液氮或直接復(fù)蘇，若發(fā)現(xiàn)干冰已揮發(fā)干凈、凍存管瓶蓋脫落、破損及細(xì)胞有污染，請立即與我們聯(lián)系。（2）T25瓶復(fù)蘇的存活細(xì)胞常溫發(fā)貨，收到后按照細(xì)胞接收后的處理方法操作。
細(xì)胞接收后的處理
1）收到細(xì)胞后，75%酒精瓶壁將T25瓶置于37℃培養(yǎng)箱放置約2-3h，若發(fā)現(xiàn)培養(yǎng)瓶破損、有液溢出及細(xì)胞有污染，請拍照后及時聯(lián)系我們。
2）請在4或5X顯微鏡下確認(rèn)細(xì)胞狀態(tài)，同時給剛收到的細(xì)胞拍照（10×，20×）各2-3張以及培養(yǎng)瓶外觀照片一張留存，作為售后時收到時細(xì)胞狀態(tài)的依據(jù)。
3）貼壁細(xì)胞：細(xì)胞在37℃培養(yǎng)箱中放置2-3h，顯微鏡下觀察細(xì)胞的生長和貼壁情況，有些貼壁細(xì)胞在快遞運(yùn)送過程中會因振動脫落和脫落后成團(tuán)的情況。若鏡下觀察細(xì)胞的生長密度若在60%以下，可去除培養(yǎng)瓶中灌液培養(yǎng)基（若有未貼壁的細(xì)胞需要離心回收，重懸打入到原培養(yǎng)瓶中）,加入新配制的完全培養(yǎng)基6-8mL，放到細(xì)胞培養(yǎng)箱中繼續(xù)培養(yǎng)。若細(xì)胞生長密度達(dá)70%-80%以上，可以對細(xì)胞進(jìn)行傳代處理。傳代過程中，若因運(yùn)輸振動脫落的細(xì)胞需要離心回收。
4）備注：運(yùn)輸用的培養(yǎng)基（灌液培養(yǎng)基）不能再用來培養(yǎng)細(xì)胞，請換用按照說明書細(xì)胞培養(yǎng)條件新配制的完全培養(yǎng)基來培養(yǎng)細(xì)胞。 收到細(xì)胞后次傳代建議T25培養(yǎng)瓶1：2傳代 。
一．培養(yǎng)基及培養(yǎng)凍存條件準(zhǔn)備
1） 準(zhǔn)備1640（推薦iCell-0002）培養(yǎng)基；胎牛血清，10%；雙抗，1%。
2） 培養(yǎng)條件： 氣相：空氣，95%；二氧化碳，5%。 溫度：37℃，培養(yǎng)箱濕度為70%-80%。
3） 凍存液：90%血清，10%DMSO，現(xiàn)用現(xiàn)配。
1） 凍存細(xì)胞的復(fù)蘇
將含有1mL細(xì)胞懸液的凍存管在37℃水浴中迅速搖晃解凍，加入到含4-6mL完全培養(yǎng)基的離心管中混合均勻。在1000RPM條件下離心3-5min，棄去上清液，完全培養(yǎng)基重懸細(xì)胞。然后將細(xì)胞懸液加入含6-8ml完全培養(yǎng)基的培養(yǎng)瓶（或皿）中37℃培養(yǎng)過夜。天顯微鏡下觀察細(xì)胞生長情況和細(xì)胞密度。2） 細(xì)胞傳代：如果細(xì)胞密度達(dá)80%-90%，即可進(jìn)行傳代培養(yǎng)。
對于貼壁細(xì)胞傳代可以參考以下方法
1. 棄去培養(yǎng)上清，用不含鈣、鎂離子的PBS潤洗細(xì)胞1-2次。
2. 加入0.25％（w / v）胰蛋白酶-0.53 mM EDTA于培養(yǎng)瓶中（T25瓶1-2mL，T75瓶2-3mL），置于37℃培養(yǎng)箱中消化1-2分鐘（難消化的細(xì)胞可以適當(dāng)延長消化時間），然后在顯微鏡下觀察細(xì)胞消化情況，若細(xì)胞大部分變圓并脫落，迅速拿回操作臺，輕敲幾下培養(yǎng)瓶后加入3-4ml含10%FBS的培養(yǎng)基來終止消化。
3. 輕輕打勻后吸出，在1000RPM條件下離心3-5min，棄去上清液，補(bǔ)加1-2mL培養(yǎng)液后吹勻。將細(xì)胞懸液按1：2的比例分到新T25瓶中，添加6-8ml按照說明書要求配置的新的完全培養(yǎng)基以保持細(xì)胞的生長活力，后續(xù)傳代根據(jù)實際情況按1:2~1:5的比例進(jìn)行。
3）細(xì)胞凍存: 收到細(xì)胞后建議在培養(yǎng)前3代時凍存一批細(xì)胞種子以備后續(xù)實驗使用。
公司正在出售的產(chǎn)品：
小鼠β萘酚(β-naphthol)elisa檢測試劑盒
人堿性亮氨酸拉鏈轉(zhuǎn)錄因子ATF樣蛋白(BATF)elisa分析檢測試劑盒
VZV（VARICELLA ZOSTER）病毒標(biāo)準(zhǔn)曲線定量PCR擴(kuò)增檢測試劑盒
鴨子磷酸化腺苷酸活化蛋白激酶(pAMPK)elisa分析檢測試劑盒
大鼠熱休克蛋白90(HSP-90)elisa檢測試劑盒
小鼠白細(xì)胞介素1α(IL-1α/IL-1F1)elisa檢測試劑盒
大鼠5羥二十碳四烯酸(5-HETE)elisa檢測試劑盒
載玻片細(xì)胞βCOLLAGEN II蛋白表達(dá)NBT顯色光學(xué)顯微鏡檢測試劑盒
人1,25二羥基維生素D3(1,25 DHVD3)elisa檢測試劑盒
細(xì)胞色素P450 A7抗體 CYP3A7
細(xì)胞轉(zhuǎn)錄因子ELK1抗體 ELK1
ZMYM1蛋白抗體 ZMYM1
β-新內(nèi)啡肽抗體 Beta neoendorphin
ATP6V0D2蛋白抗體 ATP6V0D2
BH3結(jié)構(gòu)域凋亡誘導(dǎo)蛋白抗體 Bid
跨膜蛋白SEMA5A抗體 Semaphorin 5A
雷帕霉素靶蛋白重組兔單克隆抗體 mTOR
中國倉鼠卵巢細(xì)胞-綠色熒光蛋白標(biāo)記;CHO-K1- COGFP-PURO脂肪細(xì)胞增強(qiáng)結(jié)合蛋白1 AEBP1
腫瘤壞死因子配體超家族成員12A（CD266）重組兔單克隆抗體 TNFRSF12A/CD266
肝黃素單加氧酶1抗體 FMO1
高遷移率族蛋白2樣蛋白1抗體 HMG2L1
KIAA1211蛋白抗體 KIAA1211
LSM12蛋白抗體 LSM12
醛縮酶A抗體 Aldolase A
絨毛蛋白抗體 Villin
大鼠骨成型蛋白受體Ⅱ(BMPR-Ⅱ)elisa分析檢測試劑盒
小鼠氫/鉀離子交換ATP酶β肽(ATP4β)elisa檢測試劑盒
人EB病毒核抗原3A抗體(IgG)elisa檢測試劑盒免費(fèi)代測
胰島素調(diào)節(jié)膜氨基肽酶抗體
IRAP
碳酸酐酶相關(guān)蛋白/腦蛋白10抗體
CA10
操作步驟：
步驟1：配制程序凍存液，放在室溫備用或放在4℃預(yù)冷
步驟2：離心收集對數(shù)生長期的細(xì)胞（貼壁細(xì)胞消化下來離心，懸浮細(xì)胞直接離心，轉(zhuǎn)速1200rpm或250g，時間3min）
步驟3：用配制好的凍存液重懸細(xì)胞，按照1~1.5mL/管分裝到凍存管中，擰緊管蓋，做好標(biāo)記
步驟4：凍存管放入凍存盒，凍存盒放入-80℃冰箱過夜（24h）
步驟5：凍存管從凍存盒取出，轉(zhuǎn)移至液氮長期保存
方法二：使用無血清非程序凍存液
無血清非程序凍存液是一種商品化的凍存液，無需自己配制，無需降溫盒，大大提升了便捷性。
但是，并非所有細(xì)胞都適用于這種凍存液，使用前必須做凍存測試，沒問題后再批量應(yīng)用。