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公司產(chǎn)品僅供科研實(shí)驗(yàn)、不得臨床。
產(chǎn)品屬性:
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產(chǎn)品名稱 |
規(guī)格 |
貨號(hào) |
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氨基黑10B染色浸出液100ml |
100ml |
XG-RY2494 |
產(chǎn)品名稱:氨基黑10B染色浸出液
規(guī)格:100ml
貨號(hào):XG-RY2494
儲(chǔ)存條件:室溫,12個(gè)月
用途:檢測(cè)醋酸纖維薄膜上的蛋白質(zhì),CAM電泳(CAE),也稱作洗脫液。適用于氨基黑10B染色后的洗脫。
注意事項(xiàng):主要由氫氧化鈉等組成。
標(biāo)準(zhǔn)溶液配制:
1。先將PH7.00同PH4.00藥粉分別倒入250毫升蒸餾水中,充分溶解,用兩支玻璃瓶密封保存,做 好標(biāo)簽。
2 。在校正前,準(zhǔn)備ORP標(biāo)準(zhǔn)溶液。
3 。86毫伏:取50至100毫升PH7.00標(biāo)準(zhǔn)溶液置入一玻璃杯中,再加入稍許醌氫醌,充分?jǐn)嚢琛?/span>
4 。256毫伏:取50至100毫升PH4.00標(biāo)準(zhǔn)溶液置入一玻璃杯中,再加入稍許醌氫醌,充分?jǐn)嚢琛?5。 ORP標(biāo)準(zhǔn)液保存期為72hour。
標(biāo)準(zhǔn)品五大類:
1、化學(xué)成分類:標(biāo)準(zhǔn)物質(zhì),純的化合物或是有代表性的基體樣品,天然的或添加(被)分析物的(如,用作農(nóng)藥殘留分析的添加了殺蟲劑的動(dòng)物脂肪),以一種或多種化學(xué)或物理化學(xué)特性值表征。
2、生物和臨床特性類:與目錄A相似的標(biāo)準(zhǔn)物質(zhì),但以一種或多種生化或臨床特性值表征,如酶活性。
3、物理特性類:以一種或多種物理特性值表征的標(biāo)準(zhǔn)物質(zhì),如熔點(diǎn)、粘性和密度。
4、工程特性類:以一種或多種工程特性值表征的標(biāo)準(zhǔn)物質(zhì),如硬度、拉伸強(qiáng)度和表面特性。
5、其他特性。這些類別又被細(xì)分為三級(jí)子類,例如,在化學(xué)成分類中,以微量錳、硅、銅、鎳和鉻含量表征的鋁合金,列于化學(xué)成分一金屬一有色金屬一鋁合金的子類中;在化學(xué)成分類別中,標(biāo)準(zhǔn)物質(zhì)還可進(jìn)一步被分為單一成分的標(biāo)準(zhǔn)物質(zhì)和基體標(biāo)準(zhǔn)物質(zhì)兩大類;單一成分的標(biāo)準(zhǔn)物質(zhì)是純物質(zhì)(元素或化合物),或純度、濃度、熔點(diǎn)、熔化焓值、粘度、紫外可見光吸光率、閃點(diǎn)等參考值已確定的純物質(zhì)的溶液;這類標(biāo)準(zhǔn)物質(zhì)的重要用途之一是分析儀器的檢定或校準(zhǔn)。

溶液的配制與標(biāo)定的實(shí)驗(yàn)原理:
1、用EDTA二鈉鹽配制EDTA標(biāo)準(zhǔn)溶液的原因;
EDTA是四元酸,是一種白色晶體粉末,常用H4Y表示,溶解度很小,室溫溶解度為0.02g/100g H2O。
2、標(biāo)定EDTA標(biāo)準(zhǔn)溶液的工作基準(zhǔn)試劑,基準(zhǔn)試劑的預(yù)處理:稱量前一般應(yīng)先用稀鹽酸洗去氧化層,然后用水洗凈,烘干。
注意事項(xiàng):
①加入試劑的順序應(yīng)一致,以保證所有反應(yīng)板孔溫育的時(shí)間一樣。
②使用干凈的塑料容器配置洗滌液。
③按照說(shuō)明書中標(biāo)明的時(shí)間、加液的量及順序進(jìn)行溫育操作。
④底物A應(yīng)揮發(fā),避免長(zhǎng)時(shí)間打開蓋子。底物B對(duì)光敏感,避免長(zhǎng)時(shí)間暴露于光下。避免用手接觸,有毒。實(shí)驗(yàn)完成后應(yīng)立即讀取OD值。
⑤洗滌酶標(biāo)板時(shí)應(yīng)充分拍干,不要將吸水紙直接放入酶標(biāo)反應(yīng)孔中吸水。
⑥使用一次性的吸頭以免交叉污染,吸取終止液和底物A、B液時(shí),避免使用帶金屬部分的加樣器 。
⑦實(shí)驗(yàn)中不用的板條應(yīng)立即放回包裝袋中,密封保存,以免變質(zhì)。
⑧試劑應(yīng)按標(biāo)簽說(shuō)明書儲(chǔ)存,使用前恢復(fù)到室溫。稀稀過后的標(biāo)準(zhǔn)品應(yīng)丟棄,不可保存。
⑨不用的其它試劑應(yīng)包裝好或蓋好。不同批號(hào)的試劑不要混用。
前列腺素D2合成酶(PGD2S)酶聯(lián)吸附測(cè)定試劑盒枯草芽孢桿Phospho-SLP-76 (Ser376) (D9D6E) Rabbit mAb
黏膜地址素黏附分子(MAdCAM1)酶聯(lián)吸附測(cè)定試劑盒釀酒酵母SignalStain® Citrate Unmasking Solution (10X)
黏著斑激酶(FAK)酶聯(lián)吸附測(cè)定試劑盒 枯草芽孢桿SignalStain® Citrate Unmasking Solution (10X)
鳥氨酸氨酰轉(zhuǎn)移酶(OCT)酶聯(lián)吸附測(cè)定試劑盒熱帶假絲酵母SignalStain® EDTA Unmasking Solution (10X)
鳥氨酸脫羧酶(ODC)酶聯(lián)吸附測(cè)定試劑盒溜曲霉SignalStain® EDTA Unmasking Solution (10X)
鳥苷酸交換因子(GEF)酶聯(lián)吸附測(cè)定試劑盒 棲藻海桿狀TIGAR (D3F4A) Rabbit mAb
鳥苷酸結(jié)合蛋白4(GBP4)酶聯(lián)吸附測(cè)定試劑盒 西蕃蓮莖基腐病Kv7.2 (D9L5S) Rabbit mAb
孕誘導(dǎo)阻斷因子(PIBF)酶聯(lián)吸附測(cè)定試劑盒芽孢桿MKL1/MRTF-A Antibody
尿苷二磷酸葡萄糖神經(jīng)酰葡萄糖基轉(zhuǎn)移酶(UGCG)酶聯(lián)吸附測(cè)定試劑盒山柑芽孢桿PRMT7 (D1K6R) Rabbit mAb
尿激酶型纖溶酶原激活因子(PLAU/uPA)酶聯(lián)吸附測(cè)定試劑盒假單胞屬LARP1 Antibody
尿嘧啶核苷磷酸化酶1(UPP1)酶聯(lián)吸附測(cè)定試劑盒繩狀籃狀Vti1a (D8U3M) Rabbit mAb
尿素酶相關(guān)蛋白C(UreC)酶聯(lián)吸附測(cè)定試劑盒 Bacillus Phospho-Mcl-1 (Thr163) (D5M9D) Rabbit mAb
內(nèi)皮素受體B(ETRB)酶聯(lián)吸附測(cè)定試劑盒金針菇—HP3Noxa (D8L7U) Rabbit mAb
凝溶膠蛋白(GS)酶聯(lián)吸附測(cè)定試劑盒 黑孢霉XPC (D1M5Y) Rabbit mAb
凝血酶(TM)酶聯(lián)吸附測(cè)定試劑盒大腸埃希IFIT1 (D2X9Z) Rabbit mAb
氨基黑10B染色浸出液100ml多藥耐藥相關(guān)蛋白5抗原Anti-CYP4V2 Antibody猴游離睪酮(F-TESTO)elisa檢測(cè)試劑盒
線粒體核糖體蛋白L28(抗原)Anti-CYP4X1 Antibody猴胞漿磷蛋白1(STMN1)elisa檢測(cè)試劑盒
錯(cuò)配修復(fù)蛋白1抗原Anti-CYP8B1 Antibody兔前列腺酸性磷酸酶(ACP3/PAP)elisa檢測(cè)試劑盒
胃粘液素抗原Anti-CYTH3 Antibody兔球蛋白G3(IgG3)elisa檢測(cè)試劑盒
褪黑素受體1B抗原Anti-CYP8B1 Antibody兔強(qiáng)啡肽(Dyn)elisa檢測(cè)試劑盒
胃動(dòng)素多肽Anti-CYSLTR2 Antibody兔GATA結(jié)合蛋白4(GATA4)elisa檢測(cè)試劑盒
雷帕霉素靶蛋白Anti-CYSLTR1 Antibody猴絲氨酸蛋白酶2(PRSS2)elisa檢測(cè)試劑盒
粘蛋白-1/上皮膜Anti-CYTIP Antibody猴Ⅰ型膠原α1(COL1α1)elisa檢測(cè)試劑盒
使用方法:
1. 常用篩選濃度
注意:用來(lái)篩選穩(wěn)轉(zhuǎn)株的工作濃度需要根據(jù)細(xì)胞類型,培養(yǎng)基,生長(zhǎng)條件和細(xì)胞代謝率而變化,推薦使用濃度為50-1000μg/mL。對(duì)于使用的實(shí)驗(yàn)體系建議通過建立殺滅曲線(kill curve),即劑量反應(yīng)性曲線,來(lái)確定佳篩選濃度。
一般而言,哺乳動(dòng)物細(xì)胞50-500μg/mL;植物細(xì)胞20-200μg/mL;300-1000μg/mL。
2. 殺滅曲線的建立
注意:為了篩選得到穩(wěn)定表達(dá)目的蛋白的細(xì)胞株,需要確定能夠殺死未轉(zhuǎn)染宿主細(xì)胞的濃度,可通過建立殺滅曲線(劑量反應(yīng)曲線)來(lái)實(shí)現(xiàn),至少選擇5個(gè)濃度。
1) 未轉(zhuǎn)化的細(xì)胞按照20-25%的細(xì)胞密度鋪在合適的培養(yǎng)板上,37℃,CO2培養(yǎng)過夜;注:對(duì)于需要更高密度來(lái)檢測(cè)活力的細(xì)胞,可增加接種量。
2) 根據(jù)細(xì)胞類型,設(shè)定合適范圍內(nèi)的濃度梯度。以哺乳動(dòng)物細(xì)胞為例,可設(shè)定50,100,250,500,750,1000μg/mL。先用去離子水或者PBS buffer按照1:10的比例將母液稀釋到5 mg/ml,然后按照下表稀釋到相應(yīng)濃度的工作液。
3) 替換舊的培養(yǎng)基,換用新鮮配制的含有相應(yīng)濃度培養(yǎng)基。每個(gè)濃度做三個(gè)平行孔。
4) 接下來(lái)每3-4天更換新的含培養(yǎng)基。
5) 按照固定的周期(如每2天)進(jìn)行活細(xì)胞計(jì)數(shù)來(lái)確定阻止未轉(zhuǎn)染細(xì)胞生長(zhǎng)的恰當(dāng)濃度。選擇在理想的天數(shù)(通常是7-10天)內(nèi)能夠殺死絕大多數(shù)細(xì)胞的濃度為穩(wěn)定轉(zhuǎn)染細(xì)胞篩選用的工作濃度。
3. 穩(wěn)定轉(zhuǎn)染細(xì)胞的篩選
1) 轉(zhuǎn)染48h后,用含有適當(dāng)濃度的潮霉素B篩選培養(yǎng)基來(lái)傳代細(xì)胞(直接傳代或者稀釋后傳代)。
注意:細(xì)胞處于活躍分裂狀態(tài)時(shí)的殺傷。則當(dāng)細(xì)胞過于稠密,其效率會(huì)降低。為了得到較好的篩選效果,將細(xì)胞稀釋至豐度不超過25%
2) 每隔3-4天更換含有的篩選培養(yǎng)液。
3) 篩選7天后觀察并評(píng)估細(xì)胞克?。洌┑男纬汕闆r。集落的形成可能還需要一周或者更多的時(shí)間,這取決于宿主細(xì)胞類型,轉(zhuǎn)染,以及篩選效果。
4) 挑取并轉(zhuǎn)移5-10個(gè)抗性克隆于35mm細(xì)胞培養(yǎng)板,繼續(xù)用含的篩選培養(yǎng)液維持培養(yǎng)7天。
5) 之后更換正常培養(yǎng)基培養(yǎng)即可。



