公司產(chǎn)品僅供科研實(shí)驗(yàn)、不得臨床。
產(chǎn)品屬性:
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規(guī)格 |
貨號 |
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CL蛋白酶抑制劑混合液1ml |
1ml |
XG-RY2420 |
產(chǎn)品名稱:CL蛋白酶抑制劑混合液
規(guī)格:1ml
貨號:XG-RY2420
儲存條件:—20℃,避光,12個月
用途:蛋白酶抑制劑
注意事項(xiàng):主要由亮抑蛋白酶肽和胰凝乳蛋白酶抑制劑組成,分別采用水和DMSO溶解。稀釋100倍后使用。工作濃度為5-10umol/L。
標(biāo)準(zhǔn)溶液配制:
1。先將PH7.00同PH4.00藥粉分別倒入250毫升蒸餾水中,充分溶解,用兩支玻璃瓶密封保存,做 好標(biāo)簽。
2 。在校正前,準(zhǔn)備ORP標(biāo)準(zhǔn)溶液。
3 。86毫伏:取50至100毫升PH7.00標(biāo)準(zhǔn)溶液置入一玻璃杯中,再加入稍許醌氫醌,充分?jǐn)嚢琛?/span>
4 。256毫伏:取50至100毫升PH4.00標(biāo)準(zhǔn)溶液置入一玻璃杯中,再加入稍許醌氫醌,充分?jǐn)嚢琛?5。 ORP標(biāo)準(zhǔn)液保存期為72hour。
標(biāo)準(zhǔn)品五大類:
1、化學(xué)成分類:標(biāo)準(zhǔn)物質(zhì),純的化合物或是有代表性的基體樣品,天然的或添加(被)分析物的(如,用作農(nóng)藥殘留分析的添加了殺蟲劑的動物脂肪),以一種或多種化學(xué)或物理化學(xué)特性值表征。
2、生物和臨床特性類:與目錄A相似的標(biāo)準(zhǔn)物質(zhì),但以一種或多種生化或臨床特性值表征,如酶活性。
3、物理特性類:以一種或多種物理特性值表征的標(biāo)準(zhǔn)物質(zhì),如熔點(diǎn)、粘性和密度。
4、工程特性類:以一種或多種工程特性值表征的標(biāo)準(zhǔn)物質(zhì),如硬度、拉伸強(qiáng)度和表面特性。
5、其他特性。這些類別又被細(xì)分為三級子類,例如,在化學(xué)成分類中,以微量錳、硅、銅、鎳和鉻含量表征的鋁合金,列于化學(xué)成分一金屬一有色金屬一鋁合金的子類中;在化學(xué)成分類別中,標(biāo)準(zhǔn)物質(zhì)還可進(jìn)一步被分為單一成分的標(biāo)準(zhǔn)物質(zhì)和基體標(biāo)準(zhǔn)物質(zhì)兩大類;單一成分的標(biāo)準(zhǔn)物質(zhì)是純物質(zhì)(元素或化合物),或純度、濃度、熔點(diǎn)、熔化焓值、粘度、紫外可見光吸光率、閃點(diǎn)等參考值已確定的純物質(zhì)的溶液;這類標(biāo)準(zhǔn)物質(zhì)的重要用途之一是分析儀器的檢定或校準(zhǔn)。

溶液的配制與標(biāo)定的實(shí)驗(yàn)原理:
1、用EDTA二鈉鹽配制EDTA標(biāo)準(zhǔn)溶液的原因;
EDTA是四元酸,是一種白色晶體粉末,常用H4Y表示,溶解度很小,室溫溶解度為0.02g/100g H2O。
2、標(biāo)定EDTA標(biāo)準(zhǔn)溶液的工作基準(zhǔn)試劑,基準(zhǔn)試劑的預(yù)處理:稱量前一般應(yīng)先用稀鹽酸洗去氧化層,然后用水洗凈,烘干。
注意事項(xiàng):
①加入試劑的順序應(yīng)一致,以保證所有反應(yīng)板孔溫育的時間一樣。
②使用干凈的塑料容器配置洗滌液。
③按照說明書中標(biāo)明的時間、加液的量及順序進(jìn)行溫育操作。
④底物A應(yīng)揮發(fā),避免長時間打開蓋子。底物B對光敏感,避免長時間暴露于光下。避免用手接觸,有毒。實(shí)驗(yàn)完成后應(yīng)立即讀取OD值。
⑤洗滌酶標(biāo)板時應(yīng)充分拍干,不要將吸水紙直接放入酶標(biāo)反應(yīng)孔中吸水。
⑥使用一次性的吸頭以免交叉污染,吸取終止液和底物A、B液時,避免使用帶金屬部分的加樣器 。
⑦實(shí)驗(yàn)中不用的板條應(yīng)立即放回包裝袋中,密封保存,以免變質(zhì)。
⑧試劑應(yīng)按標(biāo)簽說明書儲存,使用前恢復(fù)到室溫。稀稀過后的標(biāo)準(zhǔn)品應(yīng)丟棄,不可保存。
⑨不用的其它試劑應(yīng)包裝好或蓋好。不同批號的試劑不要混用。
酸性神經(jīng)鞘磷脂酶(ASM)酶聯(lián)吸附測定試劑盒 白僵GSK-3β (D5C5Z) XP® Rabbit mAb
絲裂原活化蛋白激酶14(MAPK14)酶聯(lián)吸附測定試劑盒卡卡杜兒玉氏酵母BRE (D8Q1J) Rabbit mAb
天門冬氨酸氨基轉(zhuǎn)移酶(AST)酶聯(lián)吸附測定試劑盒 釀酒酵母SMARCAD1 Antibody
無孢蛋白(ASPN)酶聯(lián)吸附測定試劑盒黑曲霉p44/42 MAPK (Erk1/2) Blocking Peptide (#4696 Specific)
血管緊張肽酶A(ATA)酶聯(lián)吸附測定試劑盒 阿穆爾斯克灣鹽地桿Eps15 (D3K8R) Rabbit mAb
擴(kuò)張性共濟(jì)失調(diào)突變因子(ATM)酶聯(lián)吸附測定試劑盒 簇生離褶傘HIRA (D6O8L) Rabbit mAb
失調(diào)癥蛋白1(ATXN1)酶聯(lián)吸附測定試劑盒蓋囊側(cè)耳Pazopanib
轉(zhuǎn)錄激活因子1(ATF1)酶聯(lián)吸附測定試劑盒 草類芽孢桿β-Amyloid (1-37 Specific) (D2A6H) Rabbit mAb
轉(zhuǎn)錄激活因子2(ATF2)酶聯(lián)吸附測定試劑盒 鍺栓孔Phospho-Met (Tyr1234/1235) (D26) XP® Rabbit mAb (PE Conjugate)
轉(zhuǎn)錄激活因子3(ATF3)酶聯(lián)吸附測定試劑盒 平菇Smad2/3 (D7G7) XP® Rabbit mAb (Biotinylated)
轉(zhuǎn)錄激活因子4(ATF4)酶聯(lián)吸附測定試劑盒 群結(jié)腐霉SignalSilence® Fyn siRNA I
轉(zhuǎn)錄激活因子6(ATF6)酶聯(lián)吸附測定試劑盒 非食用色素俾士麥棕對照液β-Catenin (D10A8) XP® Rabbit mAb (Sepharose® Bead Conjugate)
腺苷三磷酸結(jié)合盒轉(zhuǎn)運(yùn)體G1(ABCG1)酶聯(lián)吸附測定試劑盒 毛柄(金針菇)PANK2 (D11E2) Rabbit mAb (Mouse Specific)
腺苷三磷酸結(jié)合盒轉(zhuǎn)運(yùn)體A1(ABCA1)酶聯(lián)吸附測定試劑盒 釀酒酵母GM130 (D6B1) XP®Rabbit mAb
腺苷三磷酸結(jié)合盒轉(zhuǎn)運(yùn)體G2(ABCG2)酶聯(lián)吸附測定試劑盒 白耙齒GM130 (D6B1) XP®Rabbit mAb
CL蛋白酶抑制劑混合液1ml胰島素受體-α(抗原)Anti-BARD1 Antibody四Tetrahydrofuran
胰島素受體-β(抗原)Anti-BAZ2A Antibody百部(直立百部)Stemona?(Stemona)
胰島素受體底物-1(抗原)Anti-BCAS3 Antibody甲醇Methanol
水通道蛋白-3抗原Anti-BCAP31 Antibody千年健Homalomena
胰島素受體底物-2(抗原)Anti-BCL2L11 Antibody紅曲(特殊發(fā)酵)Monascus?(special?fermentation)
水通道蛋白-1抗原Anti-BCAS4 Antibody丙酸交沙霉素Josamycin propionate
胰島素受體底物-3(抗原)Anti-BATF3 Antibody布霉素Tobramycin
胰島素受體底物-4(抗原)Anti-BCKDK Antibody去甲萬古霉素Norvancomycin
使用方法:
1. 常用篩選濃度
注意:用來篩選穩(wěn)轉(zhuǎn)株的工作濃度需要根據(jù)細(xì)胞類型,培養(yǎng)基,生長條件和細(xì)胞代謝率而變化,推薦使用濃度為50-1000μg/mL。對于使用的實(shí)驗(yàn)體系建議通過建立殺滅曲線(kill curve),即劑量反應(yīng)性曲線,來確定佳篩選濃度。
一般而言,哺乳動物細(xì)胞50-500μg/mL;植物細(xì)胞20-200μg/mL;300-1000μg/mL。
2. 殺滅曲線的建立
注意:為了篩選得到穩(wěn)定表達(dá)目的蛋白的細(xì)胞株,需要確定能夠殺死未轉(zhuǎn)染宿主細(xì)胞的濃度,可通過建立殺滅曲線(劑量反應(yīng)曲線)來實(shí)現(xiàn),至少選擇5個濃度。
1) 未轉(zhuǎn)化的細(xì)胞按照20-25%的細(xì)胞密度鋪在合適的培養(yǎng)板上,37℃,CO2培養(yǎng)過夜;注:對于需要更高密度來檢測活力的細(xì)胞,可增加接種量。
2) 根據(jù)細(xì)胞類型,設(shè)定合適范圍內(nèi)的濃度梯度。以哺乳動物細(xì)胞為例,可設(shè)定50,100,250,500,750,1000μg/mL。先用去離子水或者PBS buffer按照1:10的比例將母液稀釋到5 mg/ml,然后按照下表稀釋到相應(yīng)濃度的工作液。
3) 替換舊的培養(yǎng)基,換用新鮮配制的含有相應(yīng)濃度培養(yǎng)基。每個濃度做三個平行孔。
4) 接下來每3-4天更換新的含培養(yǎng)基。
5) 按照固定的周期(如每2天)進(jìn)行活細(xì)胞計(jì)數(shù)來確定阻止未轉(zhuǎn)染細(xì)胞生長的恰當(dāng)濃度。選擇在理想的天數(shù)(通常是7-10天)內(nèi)能夠殺死絕大多數(shù)細(xì)胞的濃度為穩(wěn)定轉(zhuǎn)染細(xì)胞篩選用的工作濃度。
3. 穩(wěn)定轉(zhuǎn)染細(xì)胞的篩選
1) 轉(zhuǎn)染48h后,用含有適當(dāng)濃度的潮霉素B篩選培養(yǎng)基來傳代細(xì)胞(直接傳代或者稀釋后傳代)。
注意:細(xì)胞處于活躍分裂狀態(tài)時的殺傷。則當(dāng)細(xì)胞過于稠密,其效率會降低。為了得到較好的篩選效果,將細(xì)胞稀釋至豐度不超過25%
2) 每隔3-4天更換含有的篩選培養(yǎng)液。
3) 篩選7天后觀察并評估細(xì)胞克?。洌┑男纬汕闆r。集落的形成可能還需要一周或者更多的時間,這取決于宿主細(xì)胞類型,轉(zhuǎn)染,以及篩選效果。
4) 挑取并轉(zhuǎn)移5-10個抗性克隆于35mm細(xì)胞培養(yǎng)板,繼續(xù)用含的篩選培養(yǎng)液維持培養(yǎng)7天。
5) 之后更換正常培養(yǎng)基培養(yǎng)即可。



