公司產(chǎn)品僅供科研實驗、不得臨床。
產(chǎn)品屬性:
|
產(chǎn)品名稱 |
規(guī)格 |
貨號 |
|
Tricine-SDS-PAGE凝膠配制試劑盒30T |
30T |
XG-RY2380 |
產(chǎn)品名稱:Tricine-SDS-PAGE凝膠配制試劑盒
規(guī)格:30T
貨號:XG-RY2380
儲存條件:4℃,避光,6個月
用途:分離分子量在1KD-10 kD
的蛋白及多肽,是電泳法變性分離多肽的主要方法
注意事項:主要由Acr-Bis、Tris-HCl、甘油等、APS、TEMED等組成。
標準溶液配制:
1。先將PH7.00同PH4.00藥粉分別倒入250毫升蒸餾水中,充分溶解,用兩支玻璃瓶密封保存,做 好標簽。
2 。在校正前,準備ORP標準溶液。
3 。86毫伏:取50至100毫升PH7.00標準溶液置入一玻璃杯中,再加入稍許醌氫醌,充分攪拌。
4 。256毫伏:取50至100毫升PH4.00標準溶液置入一玻璃杯中,再加入稍許醌氫醌,充分攪拌。 5。 ORP標準液保存期為72hour。
標準品五大類:
1、化學成分類:標準物質(zhì),純的化合物或是有代表性的基體樣品,天然的或添加(被)分析物的(如,用作農(nóng)藥殘留分析的添加了殺蟲劑的動物脂肪),以一種或多種化學或物理化學特性值表征。
2、生物和臨床特性類:與目錄A相似的標準物質(zhì),但以一種或多種生化或臨床特性值表征,如酶活性。
3、物理特性類:以一種或多種物理特性值表征的標準物質(zhì),如熔點、粘性和密度。
4、工程特性類:以一種或多種工程特性值表征的標準物質(zhì),如硬度、拉伸強度和表面特性。
5、其他特性。這些類別又被細分為三級子類,例如,在化學成分類中,以微量錳、硅、銅、鎳和鉻含量表征的鋁合金,列于化學成分一金屬一有色金屬一鋁合金的子類中;在化學成分類別中,標準物質(zhì)還可進一步被分為單一成分的標準物質(zhì)和基體標準物質(zhì)兩大類;單一成分的標準物質(zhì)是純物質(zhì)(元素或化合物),或純度、濃度、熔點、熔化焓值、粘度、紫外可見光吸光率、閃點等參考值已確定的純物質(zhì)的溶液;這類標準物質(zhì)的重要用途之一是分析儀器的檢定或校準。

溶液的配制與標定的實驗原理:
1、用EDTA二鈉鹽配制EDTA標準溶液的原因;
EDTA是四元酸,是一種白色晶體粉末,常用H4Y表示,溶解度很小,室溫溶解度為0.02g/100g H2O。
2、標定EDTA標準溶液的工作基準試劑,基準試劑的預處理:稱量前一般應先用稀鹽酸洗去氧化層,然后用水洗凈,烘干。
注意事項:
①加入試劑的順序應一致,以保證所有反應板孔溫育的時間一樣。
②使用干凈的塑料容器配置洗滌液。
③按照說明書中標明的時間、加液的量及順序進行溫育操作。
④底物A應揮發(fā),避免長時間打開蓋子。底物B對光敏感,避免長時間暴露于光下。避免用手接觸,有毒。實驗完成后應立即讀取OD值。
⑤洗滌酶標板時應充分拍干,不要將吸水紙直接放入酶標反應孔中吸水。
⑥使用一次性的吸頭以免交叉污染,吸取終止液和底物A、B液時,避免使用帶金屬部分的加樣器 。
⑦實驗中不用的板條應立即放回包裝袋中,密封保存,以免變質(zhì)。
⑧試劑應按標簽說明書儲存,使用前恢復到室溫。稀稀過后的標準品應丟棄,不可保存。
⑨不用的其它試劑應包裝好或蓋好。不同批號的試劑不要混用。
安五脂素英文名稱:Five lignans規(guī)格:HPLC≥98%20mg/支保存:-20℃,避光
α-倒捻子素、曼果斯廷;楝子素英文名稱:Alpha mangostin, Man Huo J Tin; mangostin規(guī)格:HPLC≥98%20mg/支保存:-20℃,避光
東北貫眾素;東北貫眾素英文名稱:Dryocrassin; dryocrassin規(guī)格:HPLC≥98% 10mg/支保存:-20℃,避光
綿馬酸ABA英文名稱:Filixic acid ABA規(guī)格:HPLC≥98% 10mg/支保存:-20℃,避光
去甲異波爾定;去甲基異波爾定英文名稱:To a different Pohl Pohl; to methyl isobutyl規(guī)格:HPLC≥98% 20mg/支保存:-20℃,避光
石斛堿;石槲堿英文名稱:Shi Hujian; Shi Mistletoe Alkali規(guī)格:HPLC≥98% 20mg/支保存:-20℃,避光
白術(shù)內(nèi)酯I;蒼術(shù)內(nèi)酯I英文名稱:Atractylenolide I; Atractylodes lactone I規(guī)格:HPLC≥98% 20mg/支保存:-20℃,避光
白術(shù)內(nèi)酯II;蒼術(shù)內(nèi)酯II英文名稱:Atractylenolide II; Atractylodes lactone II規(guī)格:HPLC≥98% 20mg/支保存:-20℃,避光
白術(shù)內(nèi)酯III;蒼術(shù)內(nèi)酯III英文名稱:Atractylenolide III; Atractylodes lactone III規(guī)格:HPLC≥98% 20mg/支保存:-20℃,避光
白花前胡甲素英文名稱:White Qian Hu Jiasu規(guī)格:HPLC≥98% 20mg/支保存:-20℃,避光
白花前胡乙素英文名稱:White Qian Hu Yisu規(guī)格:HPLC≥98% 20mg/支保存:-20℃,避光
白花前胡丙素英文名稱:White Qian Hu Bingsu規(guī)格:HPLC≥98% 10mg/支保存:-20℃,避光
Anti- Alpha-AF/ Alpha-Afa/FITC 熒光素標記α-L-阿拉伯呋喃糖苷酶抗體IgGMulti-class antibodies規(guī)格: 0.2ml
DR5/TNFRSF10B/CD262 (Death receptor 5) 細胞調(diào)亡素/死亡受體5抗原Multi-class antibodies規(guī)格: 0.5mg
N-甲基嘌呤DNA糖基化酶 Anti-APNG/MPG 0.1ml
ZSWIM2 英文名稱: E3泛素蛋白連接酶ZSWIM2抗體 0.2ml
DUSP7 英文名稱: 雙特異性蛋白磷酸酶7抗體 0.2ml
Rhesus antibody Rh phospho-Eph receptor A2+A3+A4 (Tyr588 + Tyr596) 磷酸化內(nèi)皮細胞受體蛋白酪氨酸激酶A2+A3+A4抗體 規(guī)格 0.1ml
DR5/TNFRSF10B/CD262 (Death receptor 5) 細胞調(diào)亡素/死亡受體5抗原Multi-class antibodies規(guī)格: 0.5mg
Anti-Profilin 2/FITC 熒光素標記前纖維蛋白2抗體IgGMulti-class antibodies規(guī)格: 0.2ml
Rabbit Anti-human k-chain Whole serum 兔抗人k-鏈抗血清Multi-class antibodies規(guī)格: 1ml
白介素受體相關蛋白樣1前體蛋白抗體 Anti-IL1RAPL1 0.2ml
Rabbit anti-mouse IgG whole serum 兔抗小鼠IgG抗血清 1ml
FCGRT 英文名稱: IgG-Fc片斷受體轉(zhuǎn)運蛋白α抗體 0.1ml
Rhesus antibody Rh phospho-PTK9/TWF1(Tyr321) 磷酸化蛋白酪氨酸激酶9抗體 規(guī)格 0.1ml
Rabbit Anti-human k-chain Whole serum 兔抗人k-鏈抗血清Multi-class antibodies規(guī)格: 1ml
Tricine-SDS-PAGE凝膠配制試劑盒30T生物素標記的驢抗人IgGAnti-A1BG Antibody前胡丙素B81740-07-0
Alexa Fluor 555標記的驢抗人IgGAnti-Mouse Serum Albumin Antibody鳶尾41743-73-1
Alexa Fluor 647標記的驢抗人IgGAnti-LRATD2 Antibody胡黃連苷III64461-95-6
PE-Cy5.5標記的驢抗人IgGAnti-SYNCRIP(HNRNPQ)(Human) pAb紅景天苷10338-51-9
PE-Cy7標記的驢抗人IgGAnti-LRAT Antibody金絲桃素548-04-9
Cy3標記的驢抗人IgGAnti-AARSD1 Antibody黃芪甲苷84687-43-4
Cy5標記的驢抗人IgGAnti-AAAS Antibody黃獨素B20086-06-0
Cy5.5標記的驢抗人IgGAnti-ABCA8 Antibody胡黃連苷I27409-30-9
使用方法:
1. 常用篩選濃度
注意:用來篩選穩(wěn)轉(zhuǎn)株的工作濃度需要根據(jù)細胞類型,培養(yǎng)基,生長條件和細胞代謝率而變化,推薦使用濃度為50-1000μg/mL。對于使用的實驗體系建議通過建立殺滅曲線(kill curve),即劑量反應性曲線,來確定佳篩選濃度。
一般而言,哺乳動物細胞50-500μg/mL;植物細胞20-200μg/mL;300-1000μg/mL。
2. 殺滅曲線的建立
注意:為了篩選得到穩(wěn)定表達目的蛋白的細胞株,需要確定能夠殺死未轉(zhuǎn)染宿主細胞的濃度,可通過建立殺滅曲線(劑量反應曲線)來實現(xiàn),至少選擇5個濃度。
1) 未轉(zhuǎn)化的細胞按照20-25%的細胞密度鋪在合適的培養(yǎng)板上,37℃,CO2培養(yǎng)過夜;注:對于需要更高密度來檢測活力的細胞,可增加接種量。
2) 根據(jù)細胞類型,設定合適范圍內(nèi)的濃度梯度。以哺乳動物細胞為例,可設定50,100,250,500,750,1000μg/mL。先用去離子水或者PBS buffer按照1:10的比例將母液稀釋到5 mg/ml,然后按照下表稀釋到相應濃度的工作液。
3) 替換舊的培養(yǎng)基,換用新鮮配制的含有相應濃度培養(yǎng)基。每個濃度做三個平行孔。
4) 接下來每3-4天更換新的含培養(yǎng)基。
5) 按照固定的周期(如每2天)進行活細胞計數(shù)來確定阻止未轉(zhuǎn)染細胞生長的恰當濃度。選擇在理想的天數(shù)(通常是7-10天)內(nèi)能夠殺死絕大多數(shù)細胞的濃度為穩(wěn)定轉(zhuǎn)染細胞篩選用的工作濃度。
3. 穩(wěn)定轉(zhuǎn)染細胞的篩選
1) 轉(zhuǎn)染48h后,用含有適當濃度的潮霉素B篩選培養(yǎng)基來傳代細胞(直接傳代或者稀釋后傳代)。
注意:細胞處于活躍分裂狀態(tài)時的殺傷。則當細胞過于稠密,其效率會降低。為了得到較好的篩選效果,將細胞稀釋至豐度不超過25%
2) 每隔3-4天更換含有的篩選培養(yǎng)液。
3) 篩選7天后觀察并評估細胞克?。洌┑男纬汕闆r。集落的形成可能還需要一周或者更多的時間,這取決于宿主細胞類型,轉(zhuǎn)染,以及篩選效果。
4) 挑取并轉(zhuǎn)移5-10個抗性克隆于35mm細胞培養(yǎng)板,繼續(xù)用含的篩選培養(yǎng)液維持培養(yǎng)7天。
5) 之后更換正常培養(yǎng)基培養(yǎng)即可。



