儲存條件：
僅用于科研14℃或－20℃樣品收集、處理及保存方法
1. 血清：使用不含熱原和內(nèi)**的試管，操作過程中避免任何細(xì)胞刺激，收集血液后，3000 轉(zhuǎn)離心10 分鐘將血清和紅細(xì)胞迅速小心地分離。
2. 血漿：EDTA、檸檬酸鹽或肝素抗凝。3000 轉(zhuǎn)離心30 分鐘取上清。
3. 細(xì)胞上清液：3000 轉(zhuǎn)離心10 分鐘去除顆粒和聚合物。
4. 組織勻漿：將組織加入適量生理鹽水搗碎。3000 轉(zhuǎn)離心10 分鐘取上清。
5. 保存：如果樣本收集后不及時檢測，請按一次用量分裝，凍存于-20℃，避免反復(fù)凍融，在室溫下解凍并確保樣品均勻地充分解凍。

產(chǎn)品特點: 本產(chǎn)品只適用于科研，不能用于臨床診斷
靈敏度高：可檢測個位拷貝數(shù)的基因
特異性高：有效避免非特異性擴增的出現(xiàn)
穩(wěn)定性高：復(fù)孔間差異小，實驗結(jié)果重復(fù)性強
擴增性能優(yōu)：擴增效率高，熒光信號強

PCR實驗方法步驟：
方法
1：在冰浴中，按以下次序?qū)⒏鞒煞旨尤胍粺o菌0.5ml離心管中。     
10×PCR buffer                   
5 μl     dNTP mix （2mM）             
4 μl     引物1（10pM）                 
2 μl     引物2（10pM）                 
2 μl     Taq酶 （2U/μl）               
1 μl     DNA模板（50ng-1μg/μl）  
1 μl      加ddH2O至 50 μl  
實驗過程：
一、試劑準(zhǔn)備
1. DNA模板
2．對應(yīng)目的基因的特異引物（在PCR反應(yīng)中，新合成的DNA是要接在一小段序列上才能繼續(xù)按照模板DNA復(fù)制，而不能從無到有，憑空合成。這一小段序列就是你所要有設(shè)計的引物?？梢允荄NA也可以是RNA，一般20多bp，需要根據(jù)你的模板鏈設(shè)計。因此，擴增不同的基因需要設(shè)計不同的引物）
3．10×PCR Buffer
4．2mM dNTPmix：含dATP、dCTP、dGTP、dTTP各2mM
5．Taq酶
二、操作步驟
1．在冰浴中，按以下次序?qū)⒏鞒煞旨尤胍粺o菌0.5ml離心管中。
10×PCR buffer             5μl
dNTP mixl                 4μl
引物1（10pM）               2μl
引物2（10PM）              2μl
Taq酶（2U/μl）            1μl
DNA模板（50ng-1μg/μl）　　　 1 μl
加ddH2O至               50 μl
視PCR儀有無熱蓋，不加或添加石蠟油。
2．調(diào)整好反應(yīng)程序。將上述混合液稍加離心，立即置PCR儀上，執(zhí)行擴增。一般：在93℃預(yù)變性3-5min，進入循環(huán)擴增階段：93℃ 40s → 58℃ 30s → 72℃ 60s，循環(huán)30-35次，zui后在72℃ 保溫7min。
3．結(jié)束反應(yīng)，PCR產(chǎn)物放置于4℃待電泳檢測或-20℃長期保存。
4．PCR的電泳檢測：如在反應(yīng)管中加有石蠟油，需用100μlLuFang進行抽提反應(yīng)混合液，以除去石蠟油；否則，直接取5-10μl電泳檢測。
三、注意事項
１．PCR反應(yīng)應(yīng)該在一個沒有DNA污染的干凈環(huán)境中進行。zui好設(shè)立一個專用的PCR實驗室。
２．純化模板所選用的方法對污染的風(fēng)險有極大影響。一般而言，只要能夠得到可靠的結(jié)果，純化的方法越簡單越好。
３．所有試劑都應(yīng)該沒有核酸和核酸酶的污染。操作過程中均應(yīng)戴手套。
４．PCR試劑配制應(yīng)使用zui高質(zhì)量的新鮮雙蒸水，采用0.22μm濾膜過濾高壓。
５．試劑都應(yīng)該以大體積配制，試驗一下是否滿意，然后分裝成僅夠一次使用的量儲存，從而確保實驗與實驗之間的連續(xù)性。
６．試劑或樣品準(zhǔn)備過程中都要使用一次性的塑料瓶和管子，玻璃器皿應(yīng)洗滌干凈并高壓。
７．PCR的樣品應(yīng)在冰浴上化開，并且要充分混勻。

檢測步驟：
一、 試劑的準(zhǔn)備
從試劑盒中取出熒光PCR反應(yīng)液(BC-qPCR MIX)、酶混合物(Enzymes MIX)，冰上融化并振蕩混勻后，10000rpm離心10s。
設(shè)所需要的PCR反應(yīng)管管數(shù)為N(N=樣本數(shù)+1管陰性對照+1管陽性對照)，每個測試反應(yīng)體系配制如下表：
試劑 每個反應(yīng)加入的量 N個反應(yīng)加入的量
熒光PCR反應(yīng)液 14μL N×14μL
酶混合物 1 μL N×1 μL
總量 15 μL N×15μL
（1） 計算好各試劑的使用量，加入一適當(dāng)體積潔凈離心管中，充分混勻，10000rpm離心10s，向設(shè)定的N個PCR反應(yīng)管中分別加入15μL熒光PCR反應(yīng)液，向每管中加入處理后樣品或陰性對照(NTC)和陽性對照(BC-PTC)5μL，10000rpm瞬時離心10秒。
7.2 qPCR反應(yīng)條件
將各反應(yīng)管放入定量PCR儀器的反應(yīng)槽內(nèi)。
推薦循環(huán)條件:
1循環(huán) 50℃ for 2 min
預(yù)變性 1循環(huán) 95℃ for 10 min
PCR擴增 40循環(huán) 95℃ for 15 sec
60℃ for 60 sec
在60℃延伸時收集熒光信號。報告基團：設(shè)置為FAM。淬滅基團：NONE，請勿選擇ROX參比熒光。

人關(guān)節(jié)軟骨細(xì)胞完全培養(yǎng)基 100mL醋酸氟氫可的(標(biāo)準(zhǔn)品)Fludrocortisone acetate質(zhì)量規(guī)格：含量97%-103%,標(biāo)準(zhǔn)品

Vero細(xì)胞，綠猴腎細(xì)胞 RSC96(大鼠雪旺細(xì)胞) 小鼠肉瘤瘤株;S180醋酸氟氫可的Fludrocortisone acetate質(zhì)量規(guī)格：>97%

EFNB2 Protein Human 重組人 Ephrin-B2 / EFNB2 蛋白阿折地平Azelnidipine質(zhì)量規(guī)格：>99%,BR

U-937(人組織細(xì)胞瘤細(xì)胞) 5×106cells/瓶×2 小鼠瘤細(xì)胞;EL4噻奈普汀酸;噻奈普汀Tianeptine質(zhì)量規(guī)格：>98%,BR

人結(jié)腸平滑肌細(xì)胞裂解物HCSMCL噻奈普汀酸;噻奈普汀(標(biāo)準(zhǔn)品)Tianeptine質(zhì)量規(guī)格：HPLC>99%,標(biāo)準(zhǔn)品
ACVRL1 Others Canine 狗 ALK1 / ACVRL1 人細(xì)胞裂解液 (陽性對照) O-芐基-L-酪氨酸O-Benzyl-L-tyrosine質(zhì)量規(guī)格：0.98

人APP-PS1(M146L)雙基因轉(zhuǎn)染CHO細(xì)胞株;7WML6.0N-乙酰-L-賴氨酸/N6-三氟乙?；?span>-L-賴氨酸N-6-Trifluoroacetyl-L-lysine質(zhì)量規(guī)格：>98%,BR

CaPan-Ⅱ/Capan-2細(xì)胞，人胰腺癌細(xì)胞 人胸腺激酶缺陷性細(xì)胞系,143TK細(xì)胞 C57BL/6小鼠T細(xì)胞瘤細(xì)胞;RMAO-芐基-L-絲氨酸O-Benzyl-L-serine質(zhì)量規(guī)格：>98%,BR

IBRS-2(豬腎細(xì)胞) 5×106cells/瓶×2O-叔丁基-L-絲氨酸O-tert-Butyl-L-serine 質(zhì)量規(guī)格：度98%,BR

Promocell C-21010 Mammary Epithelial Cell GrowthMedium, 上皮細(xì)胞生長培養(yǎng)基(即用型) 500mlIdelalisib;CAL101CAL-101 (GS-1101)質(zhì)量規(guī)格：>99%,選擇性p110δ抑制劑
腦微血管內(nèi)皮細(xì)胞Many types of cells包裝：5 × 105方(1ml)甲基異丁希甲酮，英文名或英文縮寫：Mesityl oxide，級別：BR，98%，規(guī)格：100毫升

FGFR4 Others Rat 大鼠 FGFR4 / FGF Receptor 4 人細(xì)胞裂解液 (陽性對照) 2-錄-5-肖基三拂本 2-Chloro-5-nitnobqnzotrifluoridq 777-37-7

大鼠心肌細(xì)胞完全培養(yǎng)基 100mL三錄化釹，英文名或英文縮寫：Neodymium(III) chloride，級別：超，99.5%，規(guī)格：100克

UMR-106大鼠骨肉瘤細(xì)胞 Osteosarcoma cells in UMR-106 rats DMEM培養(yǎng)基+10%FBS硬酯酸shēng huà shì jì容量：25克

干擾素929-59-92,2-(亞乙基二氧)雙1,8-Diamino-3,6-dioxaoctane
C6 大鼠神經(jīng)膠質(zhì)瘤細(xì)胞L-LEUCINEL-亮酸(白酸)美國藥典級250G61-90-5RT

FCGR3A Others Human 人 CD16a / FCGR3A 人細(xì)胞裂解液 (陽性對照) (S)-3-羌基四輕呋 (S)-(+)-3-xy7noxytqtrcxy7nofurcn 86087-3-

流感病毒H8亞型試劑盒熒光PCR法大鼠腦膠質(zhì)瘤細(xì)胞;C6L-纈安醋酯言醋鹽 L-Vclinq mqthyl qstqr xy7nochloridq6306/2/1

REG3A Others Rat 大鼠 REG3A 人細(xì)胞裂解液 (陽性對照) 亞甲基琥珀酸，英文名或英文縮寫：Itaconic acid，級別：AR，98%，規(guī)格：25克

人前列腺上皮細(xì)胞完全培養(yǎng)基 100mL13435-12-6N-(基硅烷基)乙酰胺N-(Trimetxylsilyl)acetamide