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RNA和DNA提取實(shí)驗(yàn)中的問題分析
日期：2025-11-01 17:31
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摘要：
RNA和DNA提取實(shí)驗(yàn)中的問題分析：
1.產(chǎn)量低
如果您遇到的 DNA/RNA 產(chǎn)量低于您對樣品的預(yù)期，則需要考慮許多因素。通常，這是一個裂解問題。不完全裂解是產(chǎn)量低的主要原因。它也可能是由不正確的綁定條件引起的。確保使用新鮮的優(yōu) 質(zhì)乙醇（100% 200 標(biāo)準(zhǔn)）稀釋緩沖液或添加到結(jié)合的步驟。劣質(zhì)乙醇或舊庫存可能已經(jīng)吸收了水分，并且濃度不正確。如果洗滌緩沖液制備不正確，您可能正在洗掉提取的 DNA 或 RNA。
2.低純度
如果提取的 DNA 被蛋白質(zhì)污染（低 260/280），那么您可能開始時樣品過多，而蛋白質(zhì)沒...
RNA和DNA提取實(shí)驗(yàn)中的問題分析：
1.產(chǎn)量低
如果您遇到的 DNA/RNA 產(chǎn)量低于您對樣品的預(yù)期，則需要考慮許多因素。通常，這是一個裂解問題。不完全裂解是產(chǎn)量低的主要原因。它也可能是由不正確的綁定條件引起的。確保使用新鮮的優(yōu) 質(zhì)乙醇（100% 200 標(biāo)準(zhǔn)）稀釋緩沖液或添加到結(jié)合的步驟。劣質(zhì)乙醇或舊庫存可能已經(jīng)吸收了水分，并且濃度不正確。如果洗滌緩沖液制備不正確，您可能正在洗掉提取的 DNA 或 RNA。
2.低純度
如果提取的 DNA 被蛋白質(zhì)污染（低 260/280），那么您可能開始時樣品過多，而蛋白質(zhì)沒有完全去除或溶解。
如果 DNA 的 260/230 比率不佳，則問題通常是結(jié)合或洗滌緩沖液中的鹽分。確保使用高質(zhì)量的乙醇來制備洗滌緩沖液，如果問題仍然存在，請?jiān)俅蜗礈焐V柱。
與其他樣品相比，一些樣品含有更多的抑制劑。環(huán)境樣品特別容易出現(xiàn)純度問題，因?yàn)楦迟|(zhì)在提取過程中會被溶解。
腐殖質(zhì)的行為與 DNA 相似，很難從硅膠柱中去除。
3.降解
降解問題是RNA制備中常常到的問題。因?yàn)樵?RNA 提取過程中，樣品儲存不當(dāng)或裂解效率低等情況都會導(dǎo)致降解。對于 DNA 提取，降解不是一個大問題，因?yàn)閷τ?PCR，DNA 可以被剪切并且工作正常，如果不希望有較多剪切的 DNA，可以使用弱裂解的方法。