高效液相色譜儀測(cè)定蜂蜜中果糖、葡萄糖、蔗糖、麥芽糖含量
1、原理
試樣用水溶解，乙睛定容后，經(jīng)0.45um 濾膜過濾，高效液相色譜儀配示差折光檢測(cè)器測(cè)定，外標(biāo)法定量。
2、試劑和材料
2.1 乙睛:色譜純。
2.2 水:GB/T 6682規(guī)定的上等水。
2.3 果搪、葡萄糖、蔗糖、麥芽糖標(biāo)準(zhǔn)物質(zhì):純度≥99% .
2.4 果糖、葡萄糖標(biāo)準(zhǔn)儲(chǔ)備溶液:準(zhǔn)確稱取5g果糖標(biāo)準(zhǔn)物質(zhì)和4 g葡萄糖標(biāo)準(zhǔn)物質(zhì)，準(zhǔn)確至0.0001 g，放入同一100 mL 容量瓶中，加人60 mL水溶解，用乙腈定容至體積，搖勻。
2.5 蔗糖、麥芽糖標(biāo)準(zhǔn)儲(chǔ)備溶液:分別稱取2g蔗糖和2g麥芽糖標(biāo)準(zhǔn)物質(zhì)，準(zhǔn)確至0.0001g，放人同一100 mL容量瓶中，加人60 mL水溶解，用乙腈定容至體積，搖勻。
2.6 果糖、葡萄糖、蔗糖、麥芽糖標(biāo)準(zhǔn)工作溶液:吸取不同體積的果糖、葡萄糖標(biāo)準(zhǔn)儲(chǔ)備溶液(2.4)和蔗糖、麥芽糖標(biāo)準(zhǔn)儲(chǔ)備溶液( (2.5)，用乙睛十水( (40+ 60)稀釋至體積，配成不同濃度的果糖、葡萄糖、蔗糖、麥芽糖標(biāo)準(zhǔn)工作溶液，用于繪制標(biāo)準(zhǔn)工作曲線。
3、儀器
高效液相色譜儀:配有示差折光檢測(cè)器。
分析天平:感量0.1 mg 和0.001g各一臺(tái)。
注射器:10 ml。
有機(jī)相過濾膜:0.45um。
樣品瓶:1.5mL。
容量瓶:10mL ,25mL ,50mL，100mL。
4、試樣制備與保存
4.1 試樣的制備
對(duì)無結(jié)晶的實(shí)驗(yàn)室樣品，將其攪拌均勻。對(duì)有結(jié)晶的樣品，在密閉情況下，置于不超過 60℃的水浴中溫?zé)?，振蕩，待樣品全部融化后攪勻，冷卻至室溫。分出0.5 kg作為試樣。制備好的試樣置于樣品瓶中，密封，并做上標(biāo)記。
4.2 試樣的保存
將試樣于常溫下保存。
5、測(cè)定步驟
5.1 提取
稱取5g試樣，準(zhǔn)確至0. 001 g。置于100 ml 燒杯中，加人30 mL 水，用玻璃棒攪拌使試樣完全溶解，轉(zhuǎn)移至 100 ml 容量瓶中，然后再用 10 mL 水洗燒杯三次并轉(zhuǎn)移至上述 100 mL 容量瓶中，用乙睛定容至體積，混勻。用0.45um 濾膜將樣液過濾人樣品瓶中供高效液相色譜儀測(cè)定。
5.2 測(cè)定
5.2.1 液相色譜條件
a) 色譜柱：碳水化合物分析柱，10um , 300mm X 3.9 mm;
b) 流動(dòng)相:乙睛+ 水( (77+ 23);
c) 流速:1.0ml/min ;
d) 柱溫 ;25℃;
e) 檢測(cè)器池溫度:35℃ ;
f) 進(jìn)樣量,15uL。
5.2.2 液相色譜測(cè)定
用配制的果搪、葡萄糖、蔗糖、麥芽糖標(biāo)準(zhǔn)工作溶液繪制以峰高為縱坐標(biāo)，工作溶液濃度為橫坐標(biāo)的標(biāo)準(zhǔn)工作曲線，保證樣品溶液中果糖、葡萄糖、蔗糖、麥芽糖的響應(yīng)值均應(yīng)在標(biāo)準(zhǔn)工作曲線的線性范圍內(nèi)，樣品溶液與標(biāo)準(zhǔn)工作溶液等體積進(jìn)樣進(jìn)行測(cè)定。
6、結(jié)果計(jì)算
結(jié)果按以下式計(jì)算:
式中:
X— 試樣中被測(cè)組分含量單位為克每百克(g/100g);
c— 從標(biāo)準(zhǔn)工作曲線上得到的被測(cè)組分溶液濃度，單位為克每百毫升(g/100 mL);
V一 樣品溶液定容體積 單位為毫升(mL) ;
m— 所稱試樣的質(zhì)量，單位為克(g)。
高效液相色譜儀測(cè)定蜂蜜中果糖、葡萄糖、蔗糖、麥芽糖含量
高效液相色譜儀測(cè)定蜂蜜中果糖、葡萄糖、蔗糖、麥芽糖含量
高效液相色譜儀測(cè)定蜂蜜中果糖、葡萄糖、蔗糖、麥芽糖含量
高效液相色譜儀測(cè)定蜂蜜中果糖、葡萄糖、蔗糖、麥芽糖含量