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產(chǎn)品名稱：pET-N-GST-Thrombin-C-His
產(chǎn)品型號：
產(chǎn)品展商：XYbscience
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簡單介紹

產(chǎn)品描述

pET-N-GST-Thrombin-C-His

產(chǎn)品編號	產(chǎn)品名稱	產(chǎn)品包裝	產(chǎn)品價格
XY2911	pET-N-GST-Thrombin-C-His	1μg	888.00元

      pET-N-GST-Thrombin-C-His是一種用于表達N端含GST標簽(Glutathione S-transferase tag, GST tag)或C端含His標簽(His tag)的重組蛋白的原核表達質(zhì)粒，也可用于表達N端含GST標簽并且同時C端含His標簽的重組蛋白。GST和His雙標簽有利于通過GST柱和鎳柱兩種方法來純化目的蛋白，使目的蛋白的純度更高。本質(zhì)粒N端GST標簽后有Thrombin酶切位點，可通過Thrombin蛋白酶切除N端的GST標簽。本質(zhì)粒為卡那霉素抗性。
      本質(zhì)粒含有T7啟動子/lac操縱子，可以在異丙基硫代半乳糖苷(IPTG)的誘導下高效啟動目的蛋白表達。在多克隆位點的前面有一個GST標簽的編碼序列，后面有一個His標簽的編碼序列，后者含有6個組氨酸(6X His)。因此在多克隆位點根據(jù)讀碼框插入不含終止密碼子的目的基因就可以表達N端含有GST標簽并且C端含有His標簽的目的蛋白。也可以在目的基因后面添加終止密碼子，這樣就可以表達僅在N端含有GST標簽的目的蛋白。如果在NdeI和多克隆酶切位點之間按照讀碼框插入不帶有終止密碼子的目的基因，這樣就可以表達僅C端帶有His標簽的目的蛋白。
      本載體在N端GST標簽與多克隆位點之間含有Thrombin蛋白酶識別的6肽序列LVPRGS，對應的核酸序列為CTGGTTCCGCGTGGATCC，因此在目的蛋白純化后可以利用Thrombin酶切除N端的GST標簽。Thrombin蛋白酶酶切發(fā)生在六肽序列的R和G之間，因此在酶切去除GST標簽的時候會在目的蛋白的N端留下兩個額外的氨基酸殘基GS。
      通?？梢圆捎萌?span>BeyoGold? GST-tag Purification ResinGST標簽蛋白純化試劑盒(XY2262)、BeyoGold? His-tag Purification Resin His標簽蛋白純化試劑盒(XY2226)等純化本質(zhì)粒表達的目的蛋白，也可以使用GST抗體(XY768/XY0174)和His-tag抗體(XY367)檢測和少量地分離純化目的蛋白。
      pET-N-GST-Thrombin-C-His質(zhì)粒(5955bp)的圖譜如下：

pET-N-GST-Thrombin-C-His質(zhì)粒的主要信息如下：

Feature Nucleotide	Position
f1 origin	12-467
Kanamycin resistance ORF	563-1645
PBR 322 origin	2084
LacI coding sequence	3518-4597
T7 promoter	4988-5004
GST tag coding sequence	5076-5732
Thrombin recognition site sequence	5739-5756
Multiple cloning site(BamHI-XhoI)	5751-5798
His tag coding sequence	5799-5816
T7 Terminator	5884-5930

pET-N-GST-Thrombin-C-His的多克隆位點的詳細圖譜如下：

	XbaIrbsNdeI
5026	AATTCCCCTC TAGAAATAAT TTTGTTTAAC TTTAAGAAGG AGATATACAT
	TTAAGGGGAG ATCTTTATTA AAACAAATTG AAATTCTTCC TCTATATGTA
	GSTtag
5076	ATGATGTCCC CTATACTAGG TTATTGGAAA ATTAAGGGCC TTGTGCAACC
	TACTACAGGG GATATGATCC AATAACCTTT TAATTCCCGG AACACGTTGG
5126	CACTCGACTT CTTTTGGAAT ATCTTGAAGA AAAATATGAA GAGCATTTGT
	GTGAGCTGAA GAAAACCTTA TAGAACTTCT TTTTATACTT CTCGTAAACA

5176	ATGAGCGCGA TGAAGGTGAT AAATGGCGAA ACAAAAAGTT TGAATTGGGT
	TACTCGCGCT ACTTCCACTA TTTACCGCTT TGTTTTTCAA ACTTAACCCA

5226	TTGGAGTTTC CCAATCTTCC TTATTATATT GATGGTGATG TTAAATTAAC
	AACCTCAAAG GGTTAGAAGG AATAATATAA CTACCACTAC AATTTAATTG

5276	ACAGTCTATG GCCATCATAC GTTATATAGC TGACAAGCAC AACATGTTGG
	TGTCAGATAC CGGTAGTATG CAATATATCG ACTGTTCGTG TTGTACAACC

5326	GTGGTTGTCC AAAAGAGCGT GCAGAGATTT CAATGCTTGA AGGAGCGGTT
	CACCAACAGG TTTTCTCGCA CGTCTCTAAA GTTACGAACT TCCTCGCCAA

5376	TTGGATATTA GATACGGTGT TTCGAGAATT GCATATAGTA AAGACTTTGA
	AACCTATAAT CTATGCCACA AAGCTCTTAA CGTATATCAT TTCTGAAACT

5426	AACTCTCAAA GTTGATTTTC TTAGCAAGCT ACCTGAAATG CTGAAAATGT
	TTGAGAGTTT CAACTAAAAG AATCGTTCGA TGGACTTTAC GACTTTTACA

5476	TCGAAGATCG TTTATGTCAT AAAACATATT TAAATGGTGA TCATGTAACC
	AGCTTCTAGC AAATACAGTA TTTTGTATAA ATTTACCACT AGTACATTGG

5526	CATCCTGACT TCATGTTGTA TGACGCTCTT GATGTTGTTT TATACATGGA
	GTAGGACTGA AGTACAACAT ACTGCGAGAA CTACAACAAA ATATGTACCT

5576	CCCAATGTGC CTGGATGCGT TCCCAAAATT AGTTTGTTTT AAAAAACGTA
	GGGTTACACG GACCTACGCA AGGGTTTTAA TCAAACAAAA TTTTTTGCAT

5626	TTGAAGCTAT CCCACAAATT GATAAGTACT TGAAATCCAG CAAGTATATA
	AACTTCGATA GGGTGTTTAA CTATTCATGA ACTTTAGGTC GTTCATATAT

5676	GCATGGCCTT TGCAGGGCTG GCAAGCCACG TTTGGTGGTG GCGACCATCC
	CGTACCGGAA ACGTCCCGAC CGTTCGGTGC AAACCACCAC CGCTGGTAGG
	ThrombinPstI
	↓BamHI HindIIIEcoRIEcoRV
5726	TCCAAAATCG GATCTGGTTC CGCGTGGATC CAAGCTTCTG CAGGAATTCG
	AGGTTTTAGC CTAGACCAAG GCGCACCTAG GTTCGAAGAC GTCCTTAAGC
	SalIBglIIXhoIHistag
5776	ATATCGTCGA CAGATCTCTC GAGCACCACC ACCACCACCA CTGAGATCCG
	TATAGCAGCT GTCTAGAGAG CTCGTGGTGG TGGTGGTGGT GACTCTAGGC

pET-N-GST-Thrombin-C-His中沒有的酶切位點(Restriction enzymes that do not cut pET-N-GST-Thrombin-C-His)包括：

AatII	Acc65I	AflII	AgeI	AhdI	AleI	AscI
AvrII	BaeI	BbvCI	BfuAI	BmgBI	BmtI	BsaI
BseRI	BsiWI	BspMI	BsrGI	Bsu36I	CspCI	EagI
Eco53kI	FseI	KpnI	MfeI	NcoI	NheI	NotI
PacI	PmeI	PmlI	PspXI	RsrII	SacI	SacII
SbfI	SexAI	SfiI	SnaBI	SpeI	SrfI	StuI
ZraI

pET-N-GST-Thrombin-C-His中的單酶切位點(Restriction enzymes that cut pET-N-GST-Thrombin-C-His once)包括：

DraIII	CAC,NNN`GTG	242	BstEII	G`GTNAC,C	4060
PsiI	TTA\|TAA	370	MluI	A`CGCG,T	4242
PvuI	CG,AT`CG	943	BstAPI	GCAN,NNN`NTGC	4563
AsiSI	GCG,AT`CGC	943	SphI	G,CATG`C	4771
SmaI	CCC\|GGG	1067	SgrAI	CR`CCGG,YG	4923
XmaI	C`CCGG,G	1067	XbaI	T`CTAG,A	5034
TspMI	C`CCGG,G	1069	NdeI	CA`TA,TG	5074
NruI	TCG\|CGA	1286	MscI	TGG\|CCA	5286
AcuI	CTGAAG(N)₁₄,NN`	1597	BstBI	TT`CG,AA	5476
AlwNI	CAG,NNN`CTG	1729	SwaI	ATTT\|AAAT	5506
BssSI	C`ACGA,G	1968	ScaI	AGT\|ACT	5652
BstZ17I	GTA\|TAC	2374	BamHI	G`GATC,C	5751
Tth111I	GACN`N,NGTC	2399	HindIII	A`AGCT,T	5757
PflFI	GACN`N,NGTC	2399	PstI	C,TGCA`G	5763
PpuMI	RG`GWC,CY	3136	EcoRI	G`AATT,C	5769
FspI	TGC\|GCA	3164	EcoRV	GAT\|ATC	5777
BglI	GCCN,NNN`NGGC	3182	SalI	G`TCGA,C	5781
PshAI	GACNN\|NNGTC	3401	BglII	A`GATC,T	5787
HpaI	GTT\|AAC	3740	XhoI	C`TCGA,G	5793
BssHII	G`CGCG,C	3831	PaeR7I	C`TCGA,G	5793
ApaI	G,GGCC`C	4035	BlpI	GC`TNA,GC	5872
PspOMI	G`GGCC,C	4035	StyI	C`CWWG,G	5894
NmeAIII	GCCGAG(N)₁₉,NN`	4041

      pET-N-GST-Thrombin-C-His質(zhì)粒中推薦使用的測序引物序列如下：
      pET-F primer (5619-5638): 5′- AAACGTATTGAAGCTATCCC-3′
      pET-R primer (5869-5888): 5′-TGCTAGTTATTGCTCAGCGG-3′
      pET-N-GST-Thrombin-C-His的全序列信息：XY2911 pET-N-GST-Thrombin-C-His.txt。
包裝清單：

產(chǎn)品編號	產(chǎn)品名稱	包裝
XY2911	pET-N-GST-Thrombin-C-His	1μg
—	說明書	1份

保存條件：
      -20℃保存。
注意事項：
      本質(zhì)粒未經(jīng)書面許可不得用于任何商業(yè)用途，也不得移交給訂貨人所在實驗室外的任何個人或單位。
      本產(chǎn)品**于專業(yè)人員的科學研究用，不得用于臨床診斷或**，不得用于食品或藥品，不得存放于普通住宅內(nèi)。
      為了您的**和健康，請穿實驗服并戴一次性手套操作。

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