pCMV-N-HA
產(chǎn)品編號
產(chǎn)品名稱
產(chǎn)品包裝
產(chǎn)品價格
XY2733-1μg
1μg
888.00元
pCMV-N-HA是自行研發(fā)的用于在哺乳動物細(xì)胞中表達(dá)N端和HA tag(HA標(biāo)簽)融合的目的蛋白的表達(dá)質(zhì)粒。含有CMV啟動子可以高效啟動目的蛋白在細(xì)胞中的表達(dá)；在多克隆位點的5'端含有一個可以編碼HA標(biāo)簽的序列，因此可以表達(dá)出含有HA標(biāo)簽的融合蛋白，可以方便地使用抗HA的抗體來識別目的蛋白，有利于目的蛋白檢測和分離純化。質(zhì)粒為卡那霉素抗性。轉(zhuǎn)染細(xì)胞后，可使用G418篩選穩(wěn)定表達(dá)目的蛋白的細(xì)胞株。 pCMV-N-HA質(zhì)粒的主要信息如下：
Feature Nucleotide
Position
CMV promoter
1–602
T3 promoter and T3 primer binding site
620–639
HA tag
679–705
multiple cloning site
708–781
T7 promoter and T7 primer binding site
824–845
SV40 polyA signal
857–1240
f1 origin of ss-DNA replication
1378–1684
bla promoter
1709–1833
SV40 promoter
1853–2191
neomycin/kanamycin resistance ORF
2226–3017
HSV-thymidine kinase (TK) polyA signal
3018–3476
pUC origin
3605–4272
pCMV-N-HA質(zhì)粒的圖譜如下：
pCMV-N-HA的多克隆位點的詳細(xì)圖譜如下：
SacI M Y P Y D V P D Y
651
GAGCTCCACC
GCGGTGGCGG
CCGCC
ATG
TA
CCCATACGAT
GTTCCAGATT
CTCGAGGTGG
CGCCACCGCC
GGCGG
TAC
AT
GGGTATGCTA
CAAGGTCTAA
XmaI PstI
A SmaI BamHI HindIII EcoRI EcoRV SalI
701
ACGCT
AGCCC
GGGCGGATCC
AAGCTTCTGC
AGGAATTCGA
TATCGTCGAC
TGCGA
TCGGG
CCCGCCTAGG
TTCGAAGACG
TCCTTAAGCT
ATAGCAGCTG
BglII XbaI SpeI ApaI
751
AGATCTCTCG
AGTCTAGAAC
TAGTGGGCCC
GGTACCTTAA
TTAATTAAGG
TCTAGAGAGC
TCAGATCTTG
ATCACCCGGG
CCATGGAATT
AATTAATTCC
pCMV-N-HA中沒有的酶切位點(Restriction enzymes that do not cut pCMV-N-HA)包括：
Afl II
Age I
Ahd I
Asc I
Bbs I
Bbv II
Blp I
Bsg I
BsiW I
BsmB I
BspM II
BsrG I
BssH II
Bst1107 I
BstE II
Ear I
Eco47 III
Eco72 I
EcoN I
Esp I
Fse I
Nru I
PflM I
Pme I
Pml I
PpuM I
Psp1406 I
Sap I
Sca I
Spl I
pCMV-N-HA中的單酶切位點(Restriction enzymes that cut pCMV-N-HA once)包括：
Nde I
CA`TA,TG
241
Pvu I
CG,AT`CG
858
SnaB I
TAC|GTA
347
Bcl I
T`GATC,A
1012
Sac I
G,AGCT`C
656
Mun I
C`AATT,G
1105
Sac II
CC,GC`GG
663
Hpa I
GTT|AAC
1118
BstX I
CCAN,NNNN`NTGG
664
Mlu I
A`CGCG,T
1241
Not I
GC`GGCC,GC
669
Dra III
CAC,NNN`GTG
1471
PspA I
C`CCGG,G
709
Sfi I
GGCCN,NNN`NGGCC
2130
Xma I
BseR I
GAGGAG 16/14
2173
Srf I
GCCC|GGGC
711
Stu I
AGG|CCT
2176
Sma I
CCC|GGG
Cla I
AT`CG,AT
2195
BamH I
G`GATC,C
716
Kas I
G`GCGC,C
2354
Hind III
A`AGCT,T
722
Nar I
GG`CG,CC
2355
Pst I
C,TGCA`G
732
Ehe I
GGC|GCC
2356
EcoR I
G`AATT,C
734
Bbe I
G,GCGC`C
2358
EcoR V
GAT|ATC
742
Msc I
TGG|CCA
2437
Sal I
G`TCGA,C
746
Tth111 I
GACN`N,NGTC
2473
Acc I
GT`MK,AC
747
BsrD I
GCAATG, 8
2588
Bgl II
A`GATC,T
752
Bsp1286 I
G,DGCH`C
2658
PaeR7 I
C`TCGA,G
758
Rsr II
CG`GWC,CG
2871
Xho I
BsiC I
TT`CG,AA
3037
Xba I
T`CTAG,A
764
BstB I
Spe I
A`CTAG,T
770
Bsa I
GGTCTC 7/11
3344
Bsp120 I
G`GGCC,C
776
HgiE II
ACCNNNNNNGGT-1/13
3684
Apa I
G,GGCC`C
780
ApaL I
G`TGCA,C
3959
pCMV-N-HA質(zhì)粒中對于插入片段進(jìn)行測序時，推薦使用的正向測序引物T3和反向測序引物T7的序列如下： T3 primer (620–639): 5′ AATTAACCCTCACTAAAGGG 3′ T7 primer (824-845): 5′ GTAATACGACTCACTATAGGGC 3′ pCMV-N-HA的全序列信息： XY2733 pCMV-N-HA-seq.txt 包裝清單：
包裝
XY2733-100μg
100μg
—
說明書
1份
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