pCMV-N-Flag
產(chǎn)品編號(hào)
產(chǎn)品名稱(chēng)
產(chǎn)品包裝
產(chǎn)品價(jià)格
XY2722-100μg
100μg
1086.00元
pCMV-N-Flag是自行研發(fā)的用于在哺乳動(dòng)物細(xì)胞中表達(dá)N端和Flag tag(Flag標(biāo)簽)融合的目的蛋白的表達(dá)質(zhì)粒。含有CMV啟動(dòng)子可以高效啟動(dòng)目的蛋白在細(xì)胞中的表達(dá)；在多克隆位點(diǎn)的5'端含有一個(gè)可以編碼Flag標(biāo)簽的序列，因此可以表達(dá)出含有Flag標(biāo)簽的融合蛋白，可以方便地使用抗Flag的抗體來(lái)識(shí)別目的蛋白，有利于目的蛋白檢測(cè)和分離純化。質(zhì)粒為卡那霉素抗性。轉(zhuǎn)染細(xì)胞后，可使用G418篩選穩(wěn)定表達(dá)目的蛋白的細(xì)胞株。 pCMV-N-Flag質(zhì)粒的主要信息如下：
Feature Nucleotide
Position
CMV promoter
1-602
T3 promoter and T3 primer binding site
620-639
Flag tag
679-702
multiple cloning site
705-778
T7 promoter and T7 primer binding site
821-842
SV40 polyA signal
854-1237
f1 origin of ss-DNA replication
1375-1681
bla promoter
1706-1830
SV40 promoter
1850-2188
neomycin/kanamycin resistance ORF
2223-3014
HSV-thymidine kinase(TK)polyA signal
3015-3473
pUC origin
3602-4269
pCMV-N-Flag質(zhì)粒的圖譜如下：
pCMV-N-Flag的多克隆位點(diǎn)的詳細(xì)圖譜如下：
SacI M D Y K D D D D K
651
GAGCTCCACC
GCGGTGGCGG
CCGCC
ATG
GA
TTACAAGGAT
GACGACGATA
CTCGAGGTGG
CGCCACCGCC
GGCGG
TAC
CT
AATGTTCCTA
CTGCTGCTAT
XmaI PstI
SmaI BamHI HindIII EcoRI EcoRV SalI BglII
701
AG
AGCCCGGG
CGGATCCAAG
CTTCTGCAGG
AATTCGATAT
CGTCGACAGA
TC
TCGGGCCC
GCCTAGGTTC
GAAGACGTCC
TTAAGCTATA
GCAGCTGTCT
XhoI XbaI ApaI
751
TCTCTCGAGT
CTAGAACTAG
TGGGCCCGGT
ACCTTAATTA
ATTAAGGTAC
AGAGAGCTCA
GATCTTGATC
ACCCGGGCCA
TGGAATTAAT
TAATTCCATG
pCMV-N-Flag中沒(méi)有的酶切位點(diǎn)(Restriction enzymes that do not cut pCMV-N-Flag)包括：
Afl II
Age I
Ahd I
Asc I
Bbs I
Bbv II
Blp I
Bsg I
BsiW I
BsmB I
BspM II
BsrG I
BssH II
Bst1107 I
BstE II
Ear I
Eco47 III
Eco72 I
EcoN I
Esp I
Fse I
Nru I
PflM I
Pme I
Pml I
PpuM I
Psp1406 I
Sap I
Sca I
Spl I
pCMV-N-Flag中的單酶切位點(diǎn)(Restriction enzymes that cut pCMV-N-Flag once)包括：
Nde I
CA`TA,TG
241
Pvu I
CG,AT`CG
855
SnaB I
TAC|GTA
347
Bcl I
T`GATC,A
1009
Nhe I
G`CTAG,C
598
Mun I
C`AATT,G
1102
Sac I
G,AGCT`C
656
Hpa I
GTT|AAC
1115
Sac II
CC,GC`GG
663
Mlu I
A`CGCG,T
1238
BstX I
CCAN,NNNN`NTGG
664
Dra III
CAC,NNN`GTG
1468
Not I
GC`GGCC,GC
669
Sfi I
GGCCN,NNN`NGGCC
2127
PspA I
C`CCGG,G
706
BseR I
GAGGAG 16/14
2170
Xma I
Stu I
AGG|CCT
2173
Srf I
GCCC|GGGC
708
Cla I
AT`CG,AT
2192
Sma I
CCC|GGG
Kas I
G`GCGC,C
2351
BamH I
G`GATC,C
713
Nar I
GG`CG,CC
2352
Hind III
A`AGCT,T
719
Ehe I
GGC|GCC
2353
Pst I
C,TGCA`G
729
Bbe I
G,GCGC`C
2355
EcoR I
G`AATT,C
731
Msc I
TGG|CCA
2434
EcoR V
GAT|ATC
739
Tth111 I
GACN`N,NGTC
2470
Sal I
G`TCGA,C
743
BsrD I
GCAATG, 8
2585
Acc I
GT`MK,AC
744
Bsp1286 I
G,DGCH`C
2655
Bgl II
A`GATC,T
749
Rsr II
CG`GWC,CG
2868
PaeR7 I
C`TCGA,G
755
BsiC I
TT`CG,AA
3034
Xho I
BstB I
Xba I
T`CTAG,A
761
Bsa I
GGTCTC 7/11
3341
Spe I
A`CTAG,T
767
HgiE II
ACCNNNNNNGGT-1/13
3681
Bsp120 I
G`GGCC,C
773
ApaL I
G`TGCA,C
3956
Apa I
G,GGCC`C
777
pCMV-N-Flag質(zhì)粒中對(duì)于插入片段進(jìn)行測(cè)序時(shí)，推薦使用的正向測(cè)序引物T3和反向測(cè)序引物T7的序列如下： T3 primer(620-639): 5′AATTAACCCTCACTAAAGGG 3′ T7 primer(821-842): 5′GTAATACGACTCACTATAGGGC 3′ pCMV-N-Flag的全序列信息：XY2722 pCMV-N-Flag-seq.txt 包裝清單：
包裝
XY2722-1μg
1μg
XY2722-001μg
—
說(shuō)明書(shū)
1份
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