pCMV-C-HA
產(chǎn)品編號(hào)
產(chǎn)品名稱
產(chǎn)品包裝
產(chǎn)品價(jià)格
XY2639-100μg
100μg
1086.00元
pCMV-C-HA是自行研發(fā)的用于在哺乳動(dòng)物細(xì)胞中表達(dá)C端與HA tag(HA標(biāo)簽)融合的目的蛋白的表達(dá)質(zhì)粒。含有CMV啟動(dòng)子可以高效啟動(dòng)目的蛋白在細(xì)胞中的表達(dá);在多克隆位點(diǎn)的3'端含有一個(gè)可以編碼HA標(biāo)簽的序列,因此可以表達(dá)出含有HA標(biāo)簽的融合蛋白,可以方便地使用抗HA的抗體來識(shí)別目的蛋白,有利于目的蛋白檢測(cè)和分離純化。質(zhì)粒為卡那霉素抗性。轉(zhuǎn)染細(xì)胞后,可使用G418篩選穩(wěn)定表達(dá)目的蛋白的細(xì)胞株。 pCMV-C-HA質(zhì)粒的主要信息如下:
Feature Nucleotide
Position
CMV promoter
1-602
T3 promoter and T3 primer binding site
620-639
multiple cloning site
680-740
c-HA tag
741-767
T7 promoter and T7 primer binding site
820-841
SV40 polyA signal
853-1236
f1 origin of ss-DNA replication
1374-1678
bla promoter
1703-1827
SV40 promoter
1847-2185
neomycin/kanamycin resistance ORF
2220-3011
HSV-thymidine kinase (TK) polyA signal
3012-3470
pUC origin
3599-4266
pCMV-C-HA質(zhì)粒的圖譜如下:
pCMV-C-HA的多克隆位點(diǎn)的詳細(xì)圖譜如下:
XmaIPstI
SacI Small BamHI HindIII
651
GAGCTCCACC
GCGGTGGCGG
CCGCTCTAGC
CCGGGCGGAT
CCAAGCTTCT
CTCGAGGTGG
CGCCACCGCC
GGCGAGATCG
GGCCCGCCTA
GGTTCGAAGA
HA
EcoRIEcoRVSalI BglII XhoI XbaI
Y P Y D
701
GCAGGAATTC
GATATCGTCG
ACAGATCTCT
CGAGTCTAGA
TACCCATACG
CGTCCTTAAG
CTATAGCAGC
TGTCTAGAGA
GCTCAGATCT
ATGGGTATGC
tag
V P D Y A ApaII
751
ATGTTCCAGA
TTACGCT
TAA
GGGCCCGGTA
CCTTAATTAA
TTAAGGTACC
TACAAGGTCT
AATGCGA
ATT
CCCGGGCCAT
GGAATTAATT
AATTCCATGG
pCMV-C-HA中沒有的酶切位點(diǎn)(Restriction enzymes that do not cut pCMV-C-HA)包括:
Age I
Ahd I
Asc I
Bbs I
Bbv II
Blp I
Bsg I
BsiW I
BsmB I
BspM II
BsrG I
BssH II
Bst1107 I
BstE II
Ear I
Eco47 III
Eco72 I
EcoN I
Esp I
Fse I
Nru I
PflM I
Pme I
Pml I
PpuM I
Psp1406 I
Sap I
Sca I
Spe I
Spl I
pCMV-C-HA中的單酶切位點(diǎn)(Restriction enzymes that cut pCMV-C-HA once)包括:
Nde I
CA`TA,TG
241
Pvu I
CG,AT`CG
854
SnaB I
TAC|GTA
347
Bcl I
T`GATC,A
1008
Nhe I
G`CTAG,C
598
Mun I
C`AATT,G
1101
Sac I
G,AGCT`C
656
Hpa I
GTT|AAC
1114
Sac II
CC,GC`GG
663
Mlu I
A`CGCG,T
1237
BstX I
CCAN,NNNN`NTGG
664
Dra III
CAC,NNN`GTG
1467
Not I
GC`GGCC,GC
669
Sfi I
GGCCN,NNN`NGGCC
2124
PspA I
C`CCGG,G
681
BseR I
GAGGAG 16/14
2167
Xma I
Stu I
AGG|CCT
2170
Srf I
GCCC|GGGC
683
Cla I
AT`CG,AT
2189
Sma I
CCC|GGG
Kas I
G`GCGC,C
2348
BamH I
G`GATC,C
688
Nar I
GG`CG,CC
2349
Hind III
A`AGCT,T
694
Ehe I
GGC|GCC
2350
Pst I
C,TGCA`G
704
Bbe I
G,GCGC`C
2352
EcoR I
G`AATT,C
706
Msc I
TGG|CCA
2431
EcoR V
GAT|ATC
714
Tth111 I
GACN`N,NGTC
2467
Sal I
G`TCGA,C
718
BsrD I
GCAATG, 8
2582
Acc I
GT`MK,AC
719
Bsp1286 I
G,DGCH`C
2652
Bgl II
A`GATC,T
724
Rsr II
CG`GWC,CG
2865
PaeR7 I
C`TCGA,G
730
BsiC I
TT`CG,AA
3031
Xho I
BstB I
Xba I
T`CTAG,A
736
Bsa I
GGTCTC 7/11
3338
Afl II
C`TTAA,G
767
HgiE II
ACCNNNNNNGGT-1/13
3678
Bsp120 I
G`GGCC,C
772
ApaL I
G`TGCA,C
3953
Apa I
G,GGCC`C
776
pCMV-C-HA質(zhì)粒中對(duì)于插入片段進(jìn)行測(cè)序時(shí),推薦使用的正向測(cè)序引物T3和反向測(cè)序引物T7的序列如下: T3 primer(620-639): 5′AATTAACCCTCACTAAAGGG 3′ T7 primer(820-841): 5′GTAATACGACTCACTATAGGGC 3′ pCMV-C-HA的全序列信息: XY2639 pCMV-C-HA-seq.txt 包裝清單:
包裝
XY2639-1μg
1μg
—
說明書
1份
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