pCMV-C-Flag
XY2632-100μg
100μg
1086.00元
pCMV-C-Flag是自行研發(fā)的用于在哺乳動(dòng)物細(xì)胞中表達(dá)C端和Flag tag(Flag標(biāo)簽)融合的目的蛋白的表達(dá)質(zhì)粒。含有CMV啟動(dòng)子可以高效啟動(dòng)目的蛋白在細(xì)胞中的表達(dá);在多克隆位點(diǎn)的3'端含有一個(gè)可以編碼Flag標(biāo)簽的序列,因此可以表達(dá)出含有Flag標(biāo)簽的融合蛋白,可以方便地使用抗Flag的抗體來識(shí)別目的蛋白,有利于目的蛋白檢測和分離純化。質(zhì)粒為卡那霉素抗性。轉(zhuǎn)染細(xì)胞后,可使用G418篩選穩(wěn)定表達(dá)目的蛋白的細(xì)胞株。 pCMV-C-Flag質(zhì)粒的主要信息如下:
Feature Nucleotide
Position
CMV promoter
1-602
T3 promoter and T3 primer binding site
620-639
multiple cloning site
680-740
c-Flag tag
741-764
T7 promoter and T7 primer binding site
817-838
SV40 polyA signal
850-1233
f1 origin of ss-DNA replication
1371-1675
bla promoter
1700-1824
SV40 promoter
1844-2182
neomycin/kanamycin resistance ORF
2217-3008
HSV-thymidine kinase (TK) polyA signal
3009-3467
pUC origin
3596-4263
pCMV-C-Flag質(zhì)粒的圖譜如下:
pCMV-C-Flag的多克隆位點(diǎn)的詳細(xì)圖譜如下:
XmaIPstI
SacI Small BamHI HindIII
651
GAGCTCCACC
GCGGTGGCGG
CCGCTCTAGC
CCGGGCGGAT
CCAAGCTTCT
CTCGAGGTGG
CGCCACCGCC
GGCGAGATCG
GGCCCGCCTA
GGTTCGAAGA
Flag
EcoRI EcoRV SacI BglII XhoI XbaI
D Y K D
701
GCAGGAATTC
GATATCGTCG
ACAGATCTCT
CGAGTCTAGA
GATTACAAGG
CGTCCTTAAG
CTATAGCAGC
TGTCTAGAGA
GCTCAGATCT
CTAATGTTCC
tag
D D D K ApaI
751
ATGACGACGA
TAAG
TAA
GGG
CCCGGTACCT
TAATTAATTA
AGGTACCAGG
TACTGCTGCT
ATTC
ATT
CCC
GGGCCATGGA
ATTAATTAAT
TCCATGGTCC
pCMV-C-Flag中沒有的酶切位點(diǎn)(Restriction enzymes that do not cut pCMV-C-Flag)包括:
Afl II
Age I
Ahd I
Asc I
Bbs I
Bbv II
Blp I
Bsg I
BsiW I
BsmB I
BspM II
BsrG I
BssH II
Bst1107 I
BstE II
Ear I
Eco47 III
Eco72 I
EcoN I
Esp I
Fse I
Nru I
PflM I
Pme I
Pml I
PpuM I
Psp1406 I
Sap I
Sca I
Spe I
pCMV-C-Flag中的單酶切位點(diǎn)(Restriction enzymes that cut pCMV-C-Flag once)包括:
Nde I
CA`TA,TG
241
Pvu I
CG,AT`CG
851
SnaB I
TAC|GTA
347
Bcl I
T`GATC,A
1005
Nhe I
G`CTAG,C
598
Mun I
C`AATT,G
1098
Sac I
G,AGCT`C
656
Hpa I
GTT|AAC
1111
Sac II
CC,GC`GG
663
Mlu I
A`CGCG,T
1234
BstX I
CCAN,NNNN`NTGG
664
Dra III
CAC,NNN`GTG
1464
Not I
GC`GGCC,GC
669
Sfi I
GGCCN,NNN`NGGCC
2121
PspA I
C`CCGG,G
681
BseR I
GAGGAG 16/14
2164
Xma I
Stu I
AGG|CCT
2167
Srf I
GCCC|GGGC
683
Cla I
AT`CG,AT
2186
Sma I
CCC|GGG
Kas I
G`GCGC,C
2345
BamH I
G`GATC,C
688
Nar I
GG`CG,CC
2346
HinD III
A`AGCT,T
694
Ehe I
GGC|GCC
2347
Pst I
C,TGCA`G
704
Bbe I
G,GCGC`C
2349
EcoR I
G`AATT,C
706
Msc I
TGG|CCA
2428
EcoR V
GAT|ATC
714
Tth111 I
GACN`N,NGTC
2464
Sal I
G`TCGA,C
718
BsrD I
GCAATG, 8
2579
Acc I
GT`MK,AC
719
Bsp1286 I
G,DGCH`C
2649
Bgl II
A`GATC,T
724
Rsr II
CG`GWC,CG
2862
PaeR7 I
C`TCGA,G
730
BsiC I
TT`CG,AA
3028
Xho I
BstB I
Xba I
T`CTAG,A
736
Bsa I
GGTCTC 7/11
3335
Bsp120 I
G`GGCC,C
769
HgiE II
ACCNNNNNNGGT-1/13
3675
Apa I
G,GGCC`C
773
ApaL I
G`TGCA,C
3950
pCMV-C-Flag質(zhì)粒中對于插入片段進(jìn)行測序時(shí),推薦使用的正向測序引物T3和反向測序引物T7的序列如下: T3 primer(620-639): 5′AATTAACCCTCACTAAAGGG 3′ T7 primer(817-838): 5′GTAATACGACTCACTATAGGGC 3′ pCMV-C-Flag的全序列信息: XY2632 pCMV-C-Flag-seq.txt 包裝清單:
產(chǎn)品編號(hào)
產(chǎn)品名稱
包裝
XY2632-1μg
1μg
—
說明書
1份
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