豬口蹄疫抗體試劑盒
產(chǎn)品介紹
【產(chǎn)品名稱】
通用名:豬口蹄疫病毒O型IgG抗體檢測(cè)試劑盒(酶聯(lián)**法)
英文名:Diagnostic Kit for Antibodies to Porcine foot and mouth disease virus (ELISA)
豬口蹄疫抗體試劑盒【包裝規(guī)格】 96T/盒
【預(yù)期用途】
口蹄疫是由口蹄疫病毒(FMDV)感染引起的偶蹄動(dòng)物共患的急性、熱性、接觸性傳染病。在豬的預(yù)防**工作中,*值得關(guān)注的就是強(qiáng)化**的接種時(shí)機(jī)問(wèn)題。在過(guò)高的抗體水平進(jìn)行**,過(guò)高的抗體水平還會(huì)中和疫苗,影響疫苗的**效果,導(dǎo)致**失?。辉谳^低的抗體水平進(jìn)行**,又會(huì)出現(xiàn)抗體保護(hù)真空期,威脅豬的健康。
本試劑盒檢測(cè)反映抗體水平,利于指導(dǎo)**時(shí)機(jī)。用于檢測(cè)豬血清中口蹄疫O型病毒的抗體,不能用于區(qū)分口蹄疫野毒感染豬和用疫苗**豬。
豬口蹄疫抗體試劑盒【原 理】
本試劑盒系由預(yù)包被豬口蹄疫病毒O型(OZK/93株+OS/99株)VP1表位多肽抗原的微孔板和酶標(biāo)記二抗及其他配套試劑組成,應(yīng)用酶聯(lián)**法(ELISA)原理檢測(cè)豬血清或血漿中口蹄疫病毒特異性抗體。實(shí)驗(yàn)時(shí),在包被板中加入對(duì)照血清和稀釋的待檢血清,經(jīng)溫育后,若樣品中含有口蹄疫病毒的特異性抗體,則將與包被板上抗原結(jié)合,經(jīng)洗滌除去未結(jié)合的抗體和其他成分后;再加入酶標(biāo)二抗,與包被板上抗原抗體復(fù)合物發(fā)生特異性結(jié)合;再經(jīng)洗滌除去未結(jié)合的酶結(jié)合物,在孔中加TMB底物液,與酶反應(yīng)形成藍(lán)色產(chǎn)物,顯色深淺與樣品中的特異性抗體含量成正相關(guān);加入終止液終止反應(yīng)后,產(chǎn)物變?yōu)辄S色;用酶標(biāo)儀在450nm波長(zhǎng)測(cè)定各反應(yīng)孔中的吸光值,即可知樣品是否含有特異性抗體。
【試劑盒組成】
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1.
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口蹄疫病毒抗原預(yù)包被微孔板條
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96T×1
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2.
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酶標(biāo)記物 (紅蓋)
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11ml×1
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3.
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樣品稀釋液 (藍(lán)蓋)
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25ml×1
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4.
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20X濃縮洗滌液 (白蓋)
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25ml×1
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5.
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底物液A (棕蓋)
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7ml×1
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6.
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底物液B (黑蓋)
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7ml×1
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7.
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終止液 (黃蓋)
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7ml×1
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8.
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陽(yáng)性對(duì)照 (藍(lán)蓋,已滅活)
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0.5ml×1
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9.
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陰性對(duì)照 (藍(lán)蓋,已滅活)
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0.5ml×1
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10.
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蓋板膜
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1張
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11.
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說(shuō)明書
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1份
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【樣品制備】
取動(dòng)物全血,按常規(guī)方法制備血清,要求血清清亮,無(wú)溶血、無(wú)污染。樣品短期可于2~8℃保存,長(zhǎng)期需置-20℃保存。
豬口蹄疫抗體試劑盒【樣品稀釋】
用樣品稀釋液將待檢血清按40倍稀釋(如5μl血清加入195μl樣品稀釋液中,混勻)。陰、陽(yáng)性對(duì)照不用稀釋。
【洗滌液配制】
濃縮洗滌液使用前應(yīng)恢復(fù)至室溫(25℃左右),并搖動(dòng)使沉淀的鹽溶解,然后用蒸餾水或去離子水作20倍稀釋。
【試驗(yàn)操??方法】
1.使用前將試劑盒置室溫30分鐘,恢復(fù)至室溫。
2.取所需用量包被微孔板條,設(shè)空白、陰性及陽(yáng)性對(duì)照各2孔,未用的板條盡快密封,2~8℃保存。
3.陰性、陽(yáng)性對(duì)照孔分別加入陰性、陽(yáng)性對(duì)照血清100μl;樣品孔每孔加入稀釋后的血清樣本100μl;空白對(duì)照孔不加。
4.混勻,置37℃反應(yīng)30分鐘。
5.扣去孔內(nèi)液體,每孔加滿洗滌液,靜置30秒后棄去,重復(fù)洗滌5次,拍干。
6.每孔加酶標(biāo)記物100μl(空白孔除外)。置37℃反應(yīng)30分鐘。
7.洗滌,同步驟5。
8.每孔依次加顯色劑A、顯色劑B各50μl,混勻,37℃避光反應(yīng)10分鐘。
9.每孔加終止液50μl,混勻,用空白孔調(diào)零,于450nm(630nm作參比波長(zhǎng))測(cè)定各孔吸光值(A)。
豬口蹄疫抗體試劑盒【結(jié)果判定】
定義:N=陰性對(duì)照孔平均A值;P=陽(yáng)性對(duì)照孔平均A值;S=樣品孔A值;S/P=樣品孔A值/陽(yáng)性對(duì)照孔平均A值。
1.正常情況下P/N≥2.1即試驗(yàn)成立;否則不成立。
2.S/P≥0.4時(shí)判為陽(yáng)性,S/P<0.3時(shí)判為陰性,0.3≤S/P<0.4時(shí)判為可疑。
當(dāng)本實(shí)驗(yàn)結(jié)果為陰性時(shí)表明豬的抗體水平不足,建議補(bǔ)打相應(yīng)疫苗。
【試驗(yàn)方法的局限性】
該試驗(yàn)僅作為定性檢測(cè)豬口蹄疫病毒O型IgG抗體。不能用于區(qū)分口蹄疫野毒感染豬和用疫苗**豬。
【注意事項(xiàng)】
1.實(shí)驗(yàn)操作時(shí)需戴手套、穿工作衣,嚴(yán)格健全和執(zhí)行**隔離制度,各種實(shí)驗(yàn)廢棄物都應(yīng)按傳染物處理。
2.終止液具有腐蝕性,應(yīng)避免接觸皮膚和衣物,如不慎接觸請(qǐng)立即用大量自來(lái)水沖洗。
3.微孔板從冷藏環(huán)境中取出時(shí)應(yīng)恢復(fù)至室溫方可開袋,未用完的微孔板需放入有干燥劑的密封袋中保存(包被板開封后請(qǐng)于2~8℃避光
保存,使用期限為1個(gè)月)
4.濃縮洗滌液在低溫時(shí)容易結(jié)晶,使用時(shí)需恢復(fù)至室溫以完全溶解。
5.洗滌時(shí)各孔均需加滿液體,防止孔口有游離酶不能洗凈。
6.用于檢測(cè)的樣品應(yīng)保持新鮮。
7.試驗(yàn)結(jié)果的判定必須以酶標(biāo)儀讀數(shù)為準(zhǔn)。
8.不同批號(hào)試劑組分不得混用。
【儲(chǔ) 存】
原包裝應(yīng)儲(chǔ)存于2~8℃保鮮冷藏,切勿冷凍。
【有效期】
有效期12個(gè)月;生產(chǎn)日期、有效期、生產(chǎn)批號(hào)見(jiàn)外包裝。
- 溫馨提示:為規(guī)避購(gòu)買風(fēng)險(xiǎn),建議您在購(gòu)買前務(wù)必確認(rèn)供應(yīng)商資質(zhì)與產(chǎn)品質(zhì)量。
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