多聚甲醛-磷酸緩沖固定液技術服務
一、實驗原理
類似于DNA的體內復制。首先待擴增DNA模板加熱變性解鏈,隨之將反應混合物冷卻至某一溫度,這一溫度可使引物與它的靶序列發(fā)生退火,再將溫度升高使退火引物在DNA聚合酶作用下得以延伸。多聚甲醛-磷酸緩沖固定液這種熱變性-復性-延伸的過程就是一個PCR循環(huán),PCR就是在合適條件下的這種循環(huán)的不斷重復。
二、實驗步驟
PCR擴增
多聚甲醛-磷酸緩沖固定液根據(jù)客戶的實驗目的,進行PCR反應的優(yōu)化。
1、變性:高溫使雙鏈DNA解離形成單鏈(94℃,30s)。
2、退火:低溫下,引物與模板DNA互補區(qū)結合(55℃,30s)。
3、延伸:中溫延伸。DNA聚合酶催化以引物為起始點的DNA鏈延伸反應(70~72℃,30~60s)。
多聚甲醛-磷酸緩沖固定液以上述三個步驟為一個循環(huán),每一循環(huán)的產物均可作為下一個循環(huán)的模板,經(jīng)過n次循環(huán)后,目的DNA以2n的形式增加。
三、樣品準備
1、模板制備
客戶提供PCR所需模板(質粒、基因組DNA、PCR產物等),或者提供樣品,我們制備模板。
2、引物設計
多聚甲醛-磷酸緩沖固定液客戶提供上、下游引物,或者提供目的基因的相關信息(基因序列、Genebank accession number擴增產物的用途等),我公司提供免費的引物設計及合成。XY880603 微型離心管專用研磨杵 50只(A)|50套(B) XY83670 動物DNAOUT 100mL|250mL XY871206 柱式動物DNAOUT 50次 XY8130433 磁珠動物DNAOUT 50次 XY8120655 Southern級動物DNAOUT 5次 XY880923 大提柱式動物DNAOUT 4次 XY8101111 柱式軟體動物DNAOUT 50次 XY881101 柱式昆蟲DNAOUT 50次 XY83671 血液DNAOUT 50次|150次 XY860306 柱式血液DNAOUT 50次|200次 XY8130509 磁珠血液DNAOUT 100次 XY8120522 柱式血液DNA-RNAOUT 50次 XY8120202 血液保存和DNA純化套裝 100次 XY880924 大提柱式血液DNAOUT 4次 XY880920 96孔板血液DNAOUT(離心法) 1次|5次 XY871002 凝固血液DNAOUT 30次|100次 XY871204 柱式凝固血液DNAOUT 50次 XY8120720 柱式凍存血液DNAOUT 50次|250次 XY880805 柱式毛發(fā)DNAOUT 50次 XY8111201 痰液DNAOUT 50次 XY891102 柱式骨骼DNAOUT 50次 XY880801 柱式拭子DNAOUT 50次 XY860501 一管式拭子DNAOUT 20次|100次 XY870502 石蠟包埋組織DNAOUT 30次