Earle溶液100mL技術(shù)服務(wù)
一、實(shí)驗(yàn)原理
類似于DNA的體內(nèi)復(fù)制。首先待擴(kuò)增DNA模板加熱變性解鏈，隨之將反應(yīng)混合物冷卻至某一溫度，這一溫度可使引物與它的靶序列發(fā)生退火，再將溫度升高使退火引物在DNA聚合酶作用下得以延伸。Earle溶液100mL這種熱變性-復(fù)性-延伸的過程就是一個PCR循環(huán)，PCR就是在合適條件下的這種循環(huán)的不斷重復(fù)。
二、實(shí)驗(yàn)步驟
PCR擴(kuò)增
Earle溶液100mL根據(jù)客戶的實(shí)驗(yàn)?zāi)康?，進(jìn)行PCR反應(yīng)的優(yōu)化。
1、變性：高溫使雙鏈DNA解離形成單鏈（94℃，30s）。
2、退火：低溫下，引物與模板DNA互補(bǔ)區(qū)結(jié)合（55℃，30s）。
3、延伸：中溫延伸。DNA聚合酶催化以引物為起始點(diǎn)的DNA鏈延伸反應(yīng)（70～72℃，30～60s）。
Earle溶液100mL以上述三個步驟為一個循環(huán)，每一循環(huán)的產(chǎn)物均可作為下一個循環(huán)的模板，經(jīng)過n次循環(huán)后，目的DNA以2n的形式增加。
三、樣品準(zhǔn)備
1、模板制備
客戶提供PCR所需模板（質(zhì)粒、基因組DNA、PCR產(chǎn)物等），或者提供樣品，我們制備模板。
2、引物設(shè)計(jì)
Earle溶液100mL客戶提供上、下游引物，或者提供目的基因的相關(guān)信息（基因序列、Genebank accession number擴(kuò)增產(chǎn)物的用途等），我公司提供免費(fèi)的引物設(shè)計(jì)及合成。XY024 金黃色葡萄球菌腸**A(SEA)/B(SEB)雙色核酸熒光PCR檢測試劑盒 48 XY025 沙門菌核酸熒光PCR檢測試劑盒 48 XY026 傷寒沙門菌核酸熒光PCR檢測試劑盒 48 XY027 副傷寒沙門桿菌核酸熒光PCR檢測試劑盒(有甲乙丙三型) 48 XY028 鼠傷寒沙門菌核酸熒光PCR檢測試劑盒 48 XY029 豬霍亂沙門菌核酸熒光PCR檢測試劑盒 48 XY030 腸炎沙門菌核酸熒光PCR檢測試劑盒 48 XY031 志賀菌核酸熒光PCR檢測試劑盒 48 XY032 小腸結(jié)腸炎耶爾森菌核酸熒光PCR檢測試劑盒 48 XY033 彎曲菌熒光PCR檢測試劑盒 48 XY034 空腸彎曲菌熒光PCR檢測試劑盒 48 XY035 結(jié)腸彎曲菌熒光PCR檢測試劑盒 48 XY036 副溶血性弧菌核酸熒光PCR檢測試劑盒 48 XY037 副溶血性弧菌耐熱直接溶血素(TDH)核酸熒光PCR檢測試劑盒 48 XY038 副溶血性弧菌不耐熱溶血**(TLH)核酸熒光PCR檢測試劑盒 48 XY039 副溶血性弧菌**調(diào)控基因(TOXR)核酸熒光PCR檢測試劑盒 48 XY040 副溶血性弧菌耐熱相關(guān)溶血素(TRH)核酸熒光PCR檢測試劑盒 48 XY041 霍亂弧菌核酸熒光PCR檢測試劑盒 48