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多聚賴氨酸包被液技術服務
一、實驗原理
類似于DNA的體內復制。首先待擴增DNA模板加熱變性解鏈，隨之將反應混合物冷卻至某一溫度，這一溫度可使引物與它的靶序列發(fā)生退火，再將溫度升高使退火引物在DNA聚合酶作用下得以延伸。多聚賴氨酸包被液這種熱變性-復性-延伸的過程就是一個PCR循環(huán)，PCR就是在合適條件下的這種循環(huán)的不斷重復。
二、實驗步驟
PCR擴增
多聚賴氨酸包被液根據(jù)客戶的實驗目的，進行PCR反應的優(yōu)化。
1、變性：高溫使雙鏈DNA解離形成單鏈（94℃，30s）。
2、退火：低溫下，引物與模板DNA互補區(qū)結合（55℃，30s）。
3、延伸：中溫延伸。DNA聚合酶催化以引物為起始點的DNA鏈延伸反應（70～72℃，30～60s）。
多聚賴氨酸包被液以上述三個步驟為一個循環(huán)，每一循環(huán)的產物均可作為下一個循環(huán)的模板，經過n次循環(huán)后，目的DNA以2n的形式增加。
三、樣品準備
1、模板制備
客戶提供PCR所需模板（質粒、基因組DNA、PCR產物等），或者提供樣品，我們制備模板。
2、引物設計
多聚賴氨酸包被液客戶提供上、下游引物，或者提供目的基因的相關信息（基因序列、Genebank accession number擴增產物的用途等），我公司提供免費的引物設計及合成。核酸電泳及回收 XY60904一站式RNA電泳套裝10次XY90317一站式DNA尿素-PAGE電泳套裝30次XY70606一站式miRNA尿素-PAGE電泳套裝30次XY100205一站式DNA非變性PAGE電泳套裝30次XY51210超快核酸電泳液干粉20L|50LXY100211TAE電泳液，50×250mL|2500mLXY90313TBE電泳液，10×250mL|2500mLXY100816堿性膠電泳液，10×250mLXY3150RNA電泳液，10×100mL|250mLXY3690DNA上樣液，6×10mL(A)|10mL(B)XY3130三合一RNA上樣液1.5mL(A)|1.5mL(B)XY101222DNA堿性膠上樣液1.5mL|10mLXY70608miRNA尿素-PAGE上樣液1.5mL|10mLXY100874DNA尿素-PAGE上樣液1.5mL|10mLXY100875DNA 非變性PAGE上樣液1.5mL|10mLXY3280SYBR GreenⅠ，電泳級50μLXY61201耐熱型SYBR染料，電泳級50μLXY70303綠如藍核酸染料(UV型)0.5mL|1.5mLXY121002綠如藍核酸染料(可見光型)10mLXY81104超快核酸銀染試劑盒1000mLXY100808溴化乙錠干粉1gXY3180溴化乙錠溶液1.5mLXY3092溴化乙錠**劑100次XY70503DNA電泳分子量標準50次XY111107DNA電泳分子量標準(2)50次XY90602DNA電泳分子量標準(3)50次XY120654Southern專用DNA Marker20次(A)|20次(B)XY90101大片段DNA分子量標準50μgXY130960超螺旋DNA分子量標準100uLXY70605miRNA電泳分子量標準30次XY3120微量RNA助沉劑0.1mLXY131187Acryl DNA助沉劑1mLXY131188彩色Acryl DNA助沉劑1gXY131189分子生物學級糖原干粉1gXY131190分子生物學級糖原溶液1mLXY50903微量核酸沉淀劑10mLXY60402超快非醇核酸沉淀劑30次|100次XY110801核酸濃縮劑30mLXY80204柱式RNA純化試劑盒50次XY90211低載量PCR片段純化試劑盒50次|100次XY90212高載量PCR片段純化試劑盒50次|100次XY100201海量PCR片段純化試劑盒5次XY8091996孔板PCR片段純化回收試劑盒(離心法)1次|5次XY60202柱式DNA膠回收試劑盒50次|100次XY90506膠回收及PCR片段純化兩用試劑盒50次|100次XY60706一管式DNA膠回收試劑30次|100次XY60601DNA UV防護劑3gXY70908DNA PAGE膠回收試劑盒30次|100次XY80202柱式DNA PAGE膠回收試盒50次XY80401柱式OLIGO回收試劑盒50次XY70604miRNA PAGE膠回收試劑盒40次XY80203柱式miRNA PAGE膠回收試劑盒50次XY81105瓊脂糖100gXY130835低熔點瓊脂糖2.5g|5gXY100864丙烯酰胺溶液(干粉型)200mLXY100877甲叉雙丙烯酰胺25gXY100880四甲基乙二胺1.5mLXY100879過硫酸銨0.1g×10XY100873尿素100gXY100933MOPS(電泳級)100gXY80935剝離硅烷50mLXY90308親和硅烷25mLXY90503電泳級甘油100mLXY100934電泳級二甲苯藍FF溶液10mLXY100882電泳級溴酚藍溶液10mLXY100948電泳級橙黃G溶液10mLXY130965PAGE膠長加樣槍頭1盒XY130966水飽和正丁醇10mLXY130967預混型丙烯酰胺-甲叉雙丙烯干粉(19:1)100gXY130968預混型丙烯酰胺-甲叉雙丙烯干粉(29:1)100g 核酸擴增(PCR)