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質(zhì)粒提取中的振蕩到底該怎么振蕩?
日期:2025-10-27 14:57
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摘要:
質(zhì)粒提取中的振蕩到底該怎么振蕩?
基本上我都是把管子上下顛倒7-8次,不需要太過用力。如果你用qiagen的試劑盒,直到溶液絮狀沉淀全部由藍變白即可。之后在冰上放置15分鐘讓其分層就可以離心了。有的時候肉眼看不見沉淀未必就沒有沉淀,可以在加酒精洗脫的時候移到小管子里高速離心(14000r)2-5分鐘也許就可以看見了。
如果你是普通試劑盒做中抽或者小抽,根據(jù)個人經(jīng)驗,雙手捏住大離心管頂端和底部,上下緩慢輕柔顛倒離心管。記住一定要將離心管顛倒來混勻。你說加完三液后用力才有沉淀,會不會是你在加二...
質(zhì)粒提取中的振蕩到底該怎么振蕩?
基本上我都是把管子上下顛倒7-8次,不需要太過用力。如果你用qiagen的試劑盒,直到溶液絮狀沉淀全部由藍變白即可。之后在冰上放置15分鐘讓其分層就可以離心了。有的時候肉眼看不見沉淀未必就沒有沉淀,可以在加酒精洗脫的時候移到小管子里高速離心(14000r)2-5分鐘也許就可以看見了。
如果你是普通試劑盒做中抽或者小抽,根據(jù)個人經(jīng)驗,雙手捏住大離心管頂端和底部,上下緩慢輕柔顛倒離心管。記住一定要將離心管顛倒來混勻。你說加完三液后用力才有沉淀,會不會是你在加二液的時候就么有混勻呢?我以往都是那么操作混勻的,效果都很好。
"輕柔的振蕩"——不是動作溫柔而幅度小。關(guān)于這個問題,我的分子生物學老師告訴我:“兩手分別持離心管兩端,使其水平(注意蓋子要蓋緊),靠左右手的捻動,使離心管自轉(zhuǎn),邊轉(zhuǎn)邊使管子輪流向兩惻有一定角度傾斜。轉(zhuǎn)時要緩慢,而傾斜不要過于劇烈,看到管內(nèi)呈現(xiàn)大量絮狀物時才放置在冰上;待管內(nèi)已分成絮狀物與澄清的液體兩層時即可離心。你的問題不是”很用力的激烈振蕩,卻有沉淀,”,而“很輕柔的振蕩,沒有沉淀”,而是輕柔的不夠力度。你如果劇烈,“跑電泳還有結(jié)果”應(yīng)該是偶然而不是必然。我這樣提了N次,毫無問題。
