原代細胞的培養(yǎng)：
(1)原代細胞的培養(yǎng)方法
原代細胞的培養(yǎng)也叫初代培養(yǎng)是從供體取得組織細胞在體外進行的培養(yǎng)，是建立細胞系的步，是一項基本技術。
原代細胞接近和能反映體內(nèi)生長特性，適宜用于敏感性試驗、細胞分化等實驗研究。
① 組織塊培養(yǎng)法
組織塊培養(yǎng)是常用、簡便易行和成功率較高的原代培養(yǎng)方法。其基本方法是將剪成的小組織團塊接種于培養(yǎng)瓶(或皿)中，瓶壁可預先涂以膠原薄層，以利于組織塊粘著于瓶壁，使周邊細胞能沿瓶壁向外生長。
② 消化培養(yǎng)法
③ 懸浮細胞培養(yǎng)法
對于懸浮生長的細胞，如白血病細胞、骨髓細胞、胸水和腹水中的癌細胞和細胞無需消化，可采用低速離心分離，直接培養(yǎng)，或經(jīng)細胞分層液分離后接種培養(yǎng)。
④器官培養(yǎng)
器官培養(yǎng)是指從供體取得器官或組織塊后，不進行組織分離而直接在體外的特定環(huán)境條件下培養(yǎng)，器官培養(yǎng)可保持器官組織的相對完整性，可用于重點觀察細胞間的聯(lián)系、排列情況和相互影響，以及局部環(huán)境的生物調(diào)節(jié)作用。
小鼠膀胱上皮細胞
商品屬性：
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組織來源
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膀胱組織
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規(guī)格
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5×10?Cells/T25培養(yǎng)瓶
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細胞分類
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小鼠原代細胞
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培養(yǎng)條件
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氣相：空氣，95%；CO2，5%
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生長特性
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貼壁培養(yǎng)
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細胞形態(tài)
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鋪路石狀細胞
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細胞簡介：
膀胱壁由三層組織組成，由內(nèi)外為粘膜層、肌層和外膜。其中，粘膜層為極薄的一層移行上皮組織，和輸尿管及尿道黏膜彼此連貫。體外培養(yǎng)膀胱上皮細胞不僅為組織工程膀胱，尿道提供種植細胞的必要手段，也是研究移行上皮細胞腫瘤發(fā)生和的基礎與前提。
細胞特性：
1）組織來源于實驗動物的正常膀胱組織。
2)細胞鑒定：廣譜角蛋白(PCK)熒光染色為陽性。
3)經(jīng)鑒定細胞純度高于90%。
4)不含有 HIV-1、 HBV、HCV、支原體、、酵母和。
5)細胞生長方式：鋪路石狀細胞，不規(guī)則細胞，貼壁培養(yǎng)。
推薦培養(yǎng)基：
我們推薦使用 DELF原代 上皮 細胞培養(yǎng)體系 作為該細胞的培養(yǎng)基。
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微管相關末端結(jié)合蛋白2抗體 EB2
細胞凋亡水解酶樣蛋白1抗體 CRNKL1
SIKE1蛋白抗體 SIKE1
TIP30蛋白抗體 TIP30
AF680標記的I型膠原單克隆抗體 Collagen I, Alexa
Fluor 680 conjugated
AF750標記的過氧化酶活化受體γ抗體 PPAR Gamma, Alexa Fluor 750 conjugated
結(jié)腸癌抗原3抗體 SDCCAG3
精子形成相關凋亡蛋白2抗體 TSARG2/SPATA4
有絲分裂原和應激活化型蛋白激酶1抗體 MSK1
載脂蛋白L4抗體 APOL4
紡錘體樣蛋白3抗體 SPIN3
富含亮氨酸蛋白LRP130抗體 LRP130/LRPPRC
G蛋白偶聯(lián)受體70抗體 GPR70
HER4抗體 ErbB4
鳥苷酸激酶GMK抗體 GUK1
趨化因子受體1抗體 CX3CR1
大鼠腎上腺總RNA
小鼠膀胱上皮細胞鞘氨醇激酶1抗體 Anti-SPHK1
Cy3標記的兔抗雞IgM
Rabbit Anti-Chicken
IgM / Cy3
CAST1蛋白抗體
原代細胞的分離方法：
一、懸浮細胞的分離方法
組織材料若來自血液、羊水、胸水或腹水的懸液材料，簡單的方法是采用1000r/min的低速離心10分鐘。經(jīng)離心后由于各種細胞的比重不同可在分層液中形成不同層，這樣可根據(jù)需要收獲目的細胞。
二、實體組織材料的分離方法
對于實體組織材料，由于細胞間結(jié)合緊密，為了使組織中的細胞充分分散，形成細胞懸液，可采用機械分散法（物理裂解）和消化分離法。
（一）機械分散法
特點:簡便、快速,但對組織機械損傷大，而且細胞分散效果差,適用于處理纖維成分少的軟組織。
（二）消化分離法
組織消化法是把組織剪切成較小團塊（或糊狀），應用酶的生化作用和非酶的化學作用進一步使細胞間的橋連結(jié)構(gòu)松動，使團塊膨松，由塊狀變成絮狀，此時再采用機械法，用吸管吹打分散或電磁攪拌或在搖珠瓶中振蕩，使細胞團塊得以較充分的分散，制成少量細胞群團和大量單個細胞的細胞懸液，接種培養(yǎng)后，細胞容易貼壁生長。
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