原代細(xì)胞的培養(yǎng)：
(1)原代細(xì)胞的培養(yǎng)方法
原代細(xì)胞的培養(yǎng)也叫初代培養(yǎng)是從供體取得組織細(xì)胞在體外進(jìn)行的培養(yǎng)，是建立細(xì)胞系的步，是一項基本技術(shù)。
原代細(xì)胞接近和能反映體內(nèi)生長特性，適宜用于敏感性試驗(yàn)、細(xì)胞分化等實(shí)驗(yàn)研究。
① 組織塊培養(yǎng)法
組織塊培養(yǎng)是常用、簡便易行和成功率較高的原代培養(yǎng)方法。其基本方法是將剪成的小組織團(tuán)塊接種于培養(yǎng)瓶(或皿)中，瓶壁可預(yù)先涂以膠原薄層，以利于組織塊粘著于瓶壁，使周邊細(xì)胞能沿瓶壁向外生長。
② 消化培養(yǎng)法
③ 懸浮細(xì)胞培養(yǎng)法
對于懸浮生長的細(xì)胞，如白血病細(xì)胞、骨髓細(xì)胞、胸水和腹水中的癌細(xì)胞和細(xì)胞無需消化，可采用低速離心分離，直接培養(yǎng)，或經(jīng)細(xì)胞分層液分離后接種培養(yǎng)。
④器官培養(yǎng)
器官培養(yǎng)是指從供體取得器官或組織塊后，不進(jìn)行組織分離而直接在體外的特定環(huán)境條件下培養(yǎng)，器官培養(yǎng)可保持器官組織的相對完整性，可用于重點(diǎn)觀察細(xì)胞間的聯(lián)系、排列情況和相互影響，以及局部環(huán)境的生物調(diào)節(jié)作用。
人脾小梁平滑肌細(xì)胞
商品屬性：
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組織來源
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脾臟組織
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規(guī)格
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5×10?Cells/T25培養(yǎng)瓶
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細(xì)胞分類
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人原代細(xì)胞
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培養(yǎng)條件
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氣相：空氣，95%；CO2，5%
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生長特性
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貼壁培養(yǎng)
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細(xì)胞形態(tài)
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長梭形細(xì)胞
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細(xì)胞簡介：
脾是重要的器官，有造血、濾血、衰老血細(xì)胞及參與反應(yīng)等功能。也是細(xì)胞遷移和接受抗原刺激后發(fā)生應(yīng)到、產(chǎn)生效應(yīng)分子的重要場所。
脾由被膜、小梁、白髓、紅髓、邊緣區(qū)幾部分組成。其中，小梁間的網(wǎng)狀組織結(jié)構(gòu)則形成了脾組織的細(xì)微支架。小梁內(nèi)的平滑肌細(xì)胞可以通過舒張或伸縮調(diào)節(jié)脾的含血量。
細(xì)胞特性：
1） 細(xì)胞來源于人正常脾臟組織。
2) 細(xì)胞鑒定：α-SMA熒光染色為陽性。
3) 經(jīng)鑒定細(xì)胞純度高于90%。
4) 不含有 HIV-1、 HBV、HCV、支原體、、酵母和。
5) 細(xì)胞生長方式：長梭形細(xì)胞，貼壁培養(yǎng)。
推薦培養(yǎng)基：
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神經(jīng)營養(yǎng)因子受體相互作用因子1抗體 Nrif1
食道癌相關(guān)基因抗體 SPINK7
NSUN5P2蛋白抗體 NSUN5P2
Pacific Blue標(biāo)記小鼠CD11b單克隆抗體 mouse
CD11b/Pacific Blue
轉(zhuǎn)錄因子SOX5抗體 SOX5
組氨酸富含脯氨酸糖蛋白抗體 HPRG
核孔復(fù)合體蛋白抗體 NUP107
核有絲分裂器NuMA蛋白抗體 NUMA1
鋅指蛋白346抗體 ZNF346
鋅指蛋白72抗體 ZFP72
補(bǔ)體C1qα鏈多肽重組兔單克隆抗體 C1QA
成熟T細(xì)胞增殖蛋白1抗體 CMC4
DNA聚合酶γ/DNA pol γ抗體 POLG
ECT2L蛋白抗體 ECT2L
磷酸化紅細(xì)胞膜條帶4.1蛋白抗體 phospho-EPB41 (Tyr418 + Tyr660)
磷酸化-絲裂原活化蛋白激酶p38抗體（P-p38 MAPK） Phospho-P38 MAPK (Thr180 + Tyr182)
蛋白質(zhì)轉(zhuǎn)印印跡膜萘酚藍(lán)黑（NBB）染色試劑盒
人脾小梁平滑肌細(xì)胞鉀離子通道蛋白家族成員1抗體
KCNE1
真核翻譯起始因子2C3抗體
Argonaute 3
原代細(xì)胞的分離方法：
一、懸浮細(xì)胞的分離方法
組織材料若來自血液、羊水、胸水或腹水的懸液材料，簡單的方法是采用1000r/min的低速離心10分鐘。經(jīng)離心后由于各種細(xì)胞的比重不同可在分層液中形成不同層，這樣可根據(jù)需要收獲目的細(xì)胞。
二、實(shí)體組織材料的分離方法
對于實(shí)體組織材料，由于細(xì)胞間結(jié)合緊密，為了使組織中的細(xì)胞充分分散，形成細(xì)胞懸液，可采用機(jī)械分散法（物理裂解）和消化分離法。
（一）機(jī)械分散法
特點(diǎn):簡便、快速,但對組織機(jī)械損傷大，而且細(xì)胞分散效果差,適用于處理纖維成分少的軟組織。
（二）消化分離法
組織消化法是把組織剪切成較小團(tuán)塊（或糊狀），應(yīng)用酶的生化作用和非酶的化學(xué)作用進(jìn)一步使細(xì)胞間的橋連結(jié)構(gòu)松動，使團(tuán)塊膨松，由塊狀變成絮狀，此時再采用機(jī)械法，用吸管吹打分散或電磁攪拌或在搖珠瓶中振蕩，使細(xì)胞團(tuán)塊得以較充分的分散，制成少量細(xì)胞群團(tuán)和大量單個細(xì)胞的細(xì)胞懸液，接種培養(yǎng)后，細(xì)胞容易貼壁生長。
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