原代細(xì)胞的培養(yǎng):
(1)原代細(xì)胞的培養(yǎng)方法
原代細(xì)胞的培養(yǎng)也叫初代培養(yǎng)是從供體取得組織細(xì)胞在體外進(jìn)行的培養(yǎng),是建立細(xì)胞系的步,是一項(xiàng)基本技術(shù)。
原代細(xì)胞接近和能反映體內(nèi)生長(zhǎng)特性,適宜用于敏感性試驗(yàn)、細(xì)胞分化等實(shí)驗(yàn)研究。
① 組織塊培養(yǎng)法
組織塊培養(yǎng)是常用、簡(jiǎn)便易行和成功率較高的原代培養(yǎng)方法。其基本方法是將剪成的小組織團(tuán)塊接種于培養(yǎng)瓶(或皿)中,瓶壁可預(yù)先涂以膠原薄層,以利于組織塊粘著于瓶壁,使周邊細(xì)胞能沿瓶壁向外生長(zhǎng)。
② 消化培養(yǎng)法
③ 懸浮細(xì)胞培養(yǎng)法
對(duì)于懸浮生長(zhǎng)的細(xì)胞,如白血病細(xì)胞、骨髓細(xì)胞、胸水和腹水中的癌細(xì)胞和細(xì)胞無(wú)需消化,可采用低速離心分離,直接培養(yǎng),或經(jīng)細(xì)胞分層液分離后接種培養(yǎng)。
④器官培養(yǎng)
器官培養(yǎng)是指從供體取得器官或組織塊后,不進(jìn)行組織分離而直接在體外的特定環(huán)境條件下培養(yǎng),器官培養(yǎng)可保持器官組織的相對(duì)完整性,可用于重點(diǎn)觀(guān)察細(xì)胞間的聯(lián)系、排列情況和相互影響,以及局部環(huán)境的生物調(diào)節(jié)作用。
人口腔成纖維細(xì)胞
商品屬性:
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組織來(lái)源
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口腔黏膜組織
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規(guī)格
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5×10?Cells/T25培養(yǎng)瓶
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細(xì)胞分類(lèi)
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人原代細(xì)胞
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培養(yǎng)條件
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氣相:空氣,95%;CO2,5%
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生長(zhǎng)特性
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貼壁培養(yǎng)
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細(xì)胞形態(tài)
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不規(guī)則細(xì)胞 長(zhǎng)梭形
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細(xì)胞簡(jiǎn)介:
口腔粘膜成纖維細(xì)胞是一類(lèi)分布于口腔頰粘膜結(jié)締組織的基質(zhì)細(xì)胞,在維持口腔頰粘膜組織的穩(wěn)態(tài)以及修復(fù)粘膜破損過(guò)程中起到至關(guān)重要的作用。
細(xì)胞特性:
1)細(xì)胞來(lái)源于人正??谇火つそM織。
2)細(xì)胞鑒定:Vimentin熒光染色為陽(yáng)性。
3)經(jīng)鑒定細(xì)胞純度高于90%。
4)不含有 HIV-1、 HBV、HCV、支原體、、酵母和。
5)細(xì)胞生長(zhǎng)方式:不規(guī)則細(xì)胞,長(zhǎng)梭形,貼壁培養(yǎng)。
推薦培養(yǎng)基:
我們推薦使用 delf 原代成纖維細(xì)胞培養(yǎng)體系 作為體外培養(yǎng)的培養(yǎng)基。

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非受體型蛋白磷酸酶7抗體 PTPN7
富含亮氨酸重復(fù)蛋白24抗體 LRRC24
乙醛脫氫酶家族3成員A1抗體 ALDH3A1
陰離子轉(zhuǎn)運(yùn)蛋白-1抗體 OAT1 / SLC22A6
TBX22蛋白抗體 TBX22
T細(xì)胞2識(shí)別黑色素瘤抗原抗體 HHAT
唾液酸轉(zhuǎn)移酶8D抗體 SIA8D
胃癌相關(guān)蛋白磷酸酶1抗體 SAP1
精子**相關(guān)蛋白3抗體 SPATA3
卷曲螺旋結(jié)構(gòu)域蛋白98抗體 CCDC98
ADP核糖基化因子1抗體 ARF1
AF750標(biāo)記的胞質(zhì)緊密粘連蛋白1/閉鎖小帶蛋白1抗體 ZO-1/TJP1, Alexa Flour 750 conjugated
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原代細(xì)胞的分離方法:
一、懸浮細(xì)胞的分離方法
組織材料若來(lái)自血液、羊水、胸水或腹水的懸液材料,簡(jiǎn)單的方法是采用1000r/min的低速離心10分鐘。經(jīng)離心后由于各種細(xì)胞的比重不同可在分層液中形成不同層,這樣可根據(jù)需要收獲目的細(xì)胞。
二、實(shí)體組織材料的分離方法
對(duì)于實(shí)體組織材料,由于細(xì)胞間結(jié)合緊密,為了使組織中的細(xì)胞充分分散,形成細(xì)胞懸液,可采用機(jī)械分散法(物理裂解)和消化分離法。
(一)機(jī)械分散法
特點(diǎn):簡(jiǎn)便、快速,但對(duì)組織機(jī)械損傷大,而且細(xì)胞分散效果差,適用于處理纖維成分少的軟組織。
(二)消化分離法
組織消化法是把組織剪切成較小團(tuán)塊(或糊狀),應(yīng)用酶的生化作用和非酶的化學(xué)作用進(jìn)一步使細(xì)胞間的橋連結(jié)構(gòu)松動(dòng),使團(tuán)塊膨松,由塊狀變成絮狀,此時(shí)再采用機(jī)械法,用吸管吹打分散或電磁攪拌或在搖珠瓶中振蕩,使細(xì)胞團(tuán)塊得以較充分的分散,制成少量細(xì)胞群團(tuán)和大量單個(gè)細(xì)胞的細(xì)胞懸液,接種培養(yǎng)后,細(xì)胞容易貼壁生長(zhǎng)。
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