原代細(xì)胞的培養(yǎng)：
(1)原代細(xì)胞的培養(yǎng)方法
原代細(xì)胞的培養(yǎng)也叫初代培養(yǎng)是從供體取得組織細(xì)胞在體外進(jìn)行的培養(yǎng)，是建立細(xì)胞系的步，是一項(xiàng)基本技術(shù)。
原代細(xì)胞接近和能反映體內(nèi)生長特性，適宜用于敏感性試驗(yàn)、細(xì)胞分化等實(shí)驗(yàn)研究。
① 組織塊培養(yǎng)法
組織塊培養(yǎng)是常用、簡便易行和成功率較高的原代培養(yǎng)方法。其基本方法是將剪成的小組織團(tuán)塊接種于培養(yǎng)瓶(或皿)中，瓶壁可預(yù)先涂以膠原薄層，以利于組織塊粘著于瓶壁，使周邊細(xì)胞能沿瓶壁向外生長。
② 消化培養(yǎng)法
③ 懸浮細(xì)胞培養(yǎng)法
對于懸浮生長的細(xì)胞，如白血病細(xì)胞、骨髓細(xì)胞、胸水和腹水中的癌細(xì)胞和細(xì)胞無需消化，可采用低速離心分離，直接培養(yǎng)，或經(jīng)細(xì)胞分層液分離后接種培養(yǎng)。
④器官培養(yǎng)
器官培養(yǎng)是指從供體取得器官或組織塊后，不進(jìn)行組織分離而直接在體外的特定環(huán)境條件下培養(yǎng)，器官培養(yǎng)可保持器官組織的相對完整性，可用于重點(diǎn)觀察細(xì)胞間的聯(lián)系、排列情況和相互影響，以及局部環(huán)境的生物調(diào)節(jié)作用。
大鼠股動脈內(nèi)皮細(xì)胞
商品屬性：
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組織來源
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股動脈組織
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規(guī)格
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5×10?Cells/T25培養(yǎng)瓶
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細(xì)胞分類
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大鼠原代細(xì)胞
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培養(yǎng)條件
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氣相：空氣，95%；CO2，5%
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生長特性
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貼壁培養(yǎng)
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細(xì)胞形態(tài)
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鋪路石狀細(xì)胞
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細(xì)胞簡介：
股動脈是下肢動脈的主干，由髂外動脈延續(xù)而來。在腹股溝韌帶中點(diǎn)的深面入股三角。在股三角內(nèi)，股動脈先位于股靜脈的外側(cè)，逐漸從外側(cè)跨到股靜脈的前方，下行入收肌管，再穿收肌腱裂孔至腘窩，易名腘動脈。
股動脈在腹股溝中點(diǎn)處位置表淺，可摸到搏動，是臨床上急救壓迫止血和進(jìn)行穿刺的部位。股動脈動脈內(nèi)皮細(xì)胞組成了動脈內(nèi)壁，并持續(xù)受到血流剪切應(yīng)力的影響。內(nèi)皮細(xì)胞在切應(yīng)力的作用下，分泌不同的內(nèi)皮因子并進(jìn)而影響血管收縮和生長。
主動脈內(nèi)皮細(xì)胞也調(diào)節(jié)細(xì)胞黏附分子的表達(dá)來控制和**調(diào)節(jié)炎癥反應(yīng)和組織纖維化。體外培養(yǎng)的原代股動脈內(nèi)皮細(xì)
細(xì)胞特性：
1）組織來源于實(shí)驗(yàn)動物的正常股動脈組織。
2)細(xì)胞鑒定：血管假性血友病因子（vWF）熒光染色為陽性。
3)經(jīng)鑒定細(xì)胞純度高于90%。
4)不含有 HIV-1、 HBV、HCV、支原體、、酵母和。
5)細(xì)胞生長方式：鋪路石狀細(xì)胞，不規(guī)則細(xì)胞，貼壁培養(yǎng)。
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Gastrokine 2蛋白抗體 Gastrokine 2
G蛋白偶聯(lián)嘌呤受體p2y12抗體 P2Y12
鈉/鉀轉(zhuǎn)運(yùn)ATP酶相互作用蛋白4抗體 NKAIN4
內(nèi)皮細(xì)胞的分化蛋白6抗體 EDG6
多藥耐藥相關(guān)蛋白1抗體 MRP1/ABCC1
泛素特異性蛋白酶SENP7抗體 SENP7
鴨肝炎病毒VP1抗體 Duck Hepatitis Virus VP1
胰島素受體底物-3抗體 IRS3
SARS冠狀病毒2 Spike S2抗體 SARS-CoV-2
(2019-nCoV) Spike protein S2
SNAPC3蛋白抗體 SNAPC3
鐵蛋白Fe65樣蛋白1抗體 APBB2
突觸結(jié)合蛋白5抗體 Synaptotagmin 5
剪接調(diào)控蛋白129抗體 SFRS2IP
金屬磷酸酯酶1抗體 MPPED1
5號染色體開放閱讀框54抗體 C5orf54
AF680標(biāo)記的胞質(zhì)緊密粘連蛋白1/閉鎖小帶蛋白1抗體 ZO-1/TJP1, Alexa Flour 680 conjugated
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大鼠股動脈內(nèi)皮細(xì)胞Kelch樣蛋白2抗體
KLHL2
軟骨中間層蛋白CILP2抗體
CILP2
原代細(xì)胞的分離方法：
一、懸浮細(xì)胞的分離方法
組織材料若來自血液、羊水、胸水或腹水的懸液材料，簡單的方法是采用1000r/min的低速離心10分鐘。經(jīng)離心后由于各種細(xì)胞的比重不同可在分層液中形成不同層，這樣可根據(jù)需要收獲目的細(xì)胞。
二、實(shí)體組織材料的分離方法
對于實(shí)體組織材料，由于細(xì)胞間結(jié)合緊密，為了使組織中的細(xì)胞充分分散，形成細(xì)胞懸液，可采用機(jī)械分散法（物理裂解）和消化分離法。
（一）機(jī)械分散法
特點(diǎn):簡便、快速,但對組織機(jī)械損傷大，而且細(xì)胞分散效果差,適用于處理纖維成分少的軟組織。
（二）消化分離法
組織消化法是把組織剪切成較小團(tuán)塊（或糊狀），應(yīng)用酶的生化作用和非酶的化學(xué)作用進(jìn)一步使細(xì)胞間的橋連結(jié)構(gòu)松動，使團(tuán)塊膨松，由塊狀變成絮狀，此時(shí)再采用機(jī)械法，用吸管吹打分散或電磁攪拌或在搖珠瓶中振蕩，使細(xì)胞團(tuán)塊得以較充分的分散，制成少量細(xì)胞群團(tuán)和大量單個細(xì)胞的細(xì)胞懸液，接種培養(yǎng)后，細(xì)胞容易貼壁生長。
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