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細(xì)胞簡介：
小鼠骨骼肌微血管內(nèi)皮細(xì)胞分離自四肢肌肉組織；骨骼肌又稱橫紋肌，肌肉中的一種，約占全身重量的40%。骨骼肌纖維為長柱形的多核細(xì)胞，肌膜的外面有基膜緊密貼附。屬于橫紋肌，橫紋肌還包括心肌與內(nèi)臟橫紋肌，其中骨骼肌主要分布于四肢。每塊肌肉都是具有一定形態(tài)、結(jié)構(gòu)和功能的器官，有豐富的血管、分布，在軀體神經(jīng)支配下收縮或舒張，進(jìn)行隨意運(yùn)動。微血管又稱。分布于各種組織和細(xì)胞間的微細(xì)的血管。介于微動脈和微靜脈之間。平均直徑7-9微米，數(shù)量極多，成網(wǎng)狀分布。管壁由一層內(nèi)皮細(xì)胞及一薄層基膜組成，厚約0.5微米?；ね饷嬗斜咏Y(jié)締組織，其中有纖維細(xì)胞、巨噬細(xì)胞和周細(xì)胞等。細(xì)的微血管由一個內(nèi)皮細(xì)胞圍成管腔，較粗的微血管由2-3個內(nèi)皮細(xì)胞圍成。分布于肌肉組織、神經(jīng)組織和結(jié)締組織中的微血管，內(nèi)皮細(xì)胞間為縫隙連接（縫隙寬150埃），稱連續(xù)微血管。血管內(nèi)皮細(xì)胞在器官和組織的結(jié)構(gòu)和功能上起著非常重要的作用。并與多種的發(fā)生與發(fā)展有關(guān)。近年來血管內(nèi)皮細(xì)胞在炎癥、休克等一系列病理生理改變中的重要性愈來愈受到人們的重視。研究發(fā)現(xiàn)，不同來源的內(nèi)皮細(xì)胞在生物學(xué)特征、結(jié)構(gòu)和功能等方面均存在一定差別，而同是微血管內(nèi)皮細(xì)胞，它們又存在器官和組織的特異性。骨骼肌組織是動物體內(nèi)含量多的組織，肌肉組織供血豐富，是研究內(nèi)皮細(xì)胞功能和血管**的理想靶組織。
商品屬性：
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產(chǎn)品名稱
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小鼠骨骼肌微血管內(nèi)皮細(xì)胞
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種屬
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小鼠
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組織來源
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骨骼肌
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規(guī)格
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5×10?Cells/T25培養(yǎng)瓶
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貨號
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A01X1918
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細(xì)胞形態(tài)
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內(nèi)皮細(xì)胞樣
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培養(yǎng)條件
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氣相：空氣，95%；CO2，5%
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生長特性
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貼壁
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方法簡介：
實(shí)驗(yàn)室分離的小鼠骨骼肌微血管內(nèi)皮細(xì)胞采用膠原酶消化結(jié)合差速貼壁法、培養(yǎng)基篩選制備而來，細(xì)胞總量約為5×10?cells/瓶。
質(zhì)量檢測
實(shí)驗(yàn)室分離的小鼠骨骼肌微血管內(nèi)皮細(xì)胞經(jīng)CD31熒光鑒定，純度可達(dá)90%以上，且不含有HIV-1、HBV、HCV、支原體、、酵母和等。
培養(yǎng)信息：
包被條件：PLL（0.1mg/ml），明膠（0.1%）
培養(yǎng)基：含FBS、生長添加劑、Penicillin、Streptomycin等
換液頻率：每2-3天換液一次
生長特性：貼壁
細(xì)胞形態(tài)：內(nèi)皮細(xì)胞樣
傳代特性：可傳2-3代
消化液：0.25%胰蛋白酶
培養(yǎng)條件：氣相：空氣，95%；CO2，5%
小鼠骨骼肌微血管內(nèi)皮細(xì)胞體外培養(yǎng)周期有限；建議使用配套的生長培養(yǎng)基及正確的操作方法來培養(yǎng)，以此保證該細(xì)胞的佳培養(yǎng)狀態(tài)。
原代細(xì)胞的培養(yǎng)條件：
① 靜置貼壁細(xì)胞(包括半貼壁細(xì)胞的培養(yǎng))培養(yǎng)
a 細(xì)胞要通過充分漂洗，以盡量除去消化液的毒性
b 細(xì)胞接種時(shí)濃度要稍大一些，至少為5×108細(xì)胞/L。
c 培養(yǎng)基可用Eagle(MEM Corning 10-010-CVR)或DMEM(Corning 10-013-CVR)培養(yǎng)。
d 胎牛血清濃度為10%-80%。
e 應(yīng)在37℃5% CO2的培養(yǎng)箱中培養(yǎng)。。
f 在起始的2天中盡量減少振蕩，以防止剛貼壁的細(xì)胞發(fā)生脫落，漂浮。
g 待細(xì)胞基本貼壁伸展并逐漸形成網(wǎng)狀，應(yīng)將原代細(xì)胞換液
h 用骨髓或外周血中的懸浮細(xì)胞經(jīng)靜置培養(yǎng)1周時(shí)，應(yīng)將細(xì)胞懸液經(jīng)低速離心后換液。
② 懸浮細(xì)胞的培養(yǎng)要求
a 原代培養(yǎng)時(shí)要盡量去除紅細(xì)胞
b 短期培養(yǎng)，可在含10%小牛血清的RPMI1640培養(yǎng)基中進(jìn)行
c 細(xì)胞濃度可在5-8×109/L范圍內(nèi)，進(jìn)行分瓶試驗(yàn)。
d 長期培養(yǎng)時(shí)，細(xì)胞中要加入生長因子，白血病細(xì)胞中要加入少量的原患者血清，以利細(xì)胞生長。
f 細(xì)胞換液一般每隔3天需半量換液一次
g 細(xì)胞傳代一般待細(xì)胞增殖加快、細(xì)胞密度較高時(shí)才能進(jìn)行。
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