原代細胞的培養(yǎng)：
(1)原代細胞的培養(yǎng)方法
原代細胞的培養(yǎng)也叫初代培養(yǎng)是從供體取得組織細胞在體外進行的培養(yǎng)，是建立細胞系的步，是一項基本技術。
原代細胞接近和能反映體內生長特性，適宜用于敏感性試驗、細胞分化等實驗研究。
① 組織塊培養(yǎng)法
組織塊培養(yǎng)是常用、簡便易行和成功率較高的原代培養(yǎng)方法。其基本方法是將剪成的小組織團塊接種于培養(yǎng)瓶(或皿)中，瓶壁可預先涂以膠原薄層，以利于組織塊粘著于瓶壁，使周邊細胞能沿瓶壁向外生長。
② 消化培養(yǎng)法
③ 懸浮細胞培養(yǎng)法
對于懸浮生長的細胞，如白血病細胞、骨髓細胞、胸水和腹水中的癌細胞和細胞無需消化，可采用低速離心分離，直接培養(yǎng)，或經細胞分層液分離后接種培養(yǎng)。
④器官培養(yǎng)
器官培養(yǎng)是指從供體取得器官或組織塊后，不進行組織分離而直接在體外的特定環(huán)境條件下培養(yǎng)，器官培養(yǎng)可保持器官組織的相對完整性，可用于重點觀察細胞間的聯(lián)系、排列情況和相互影響，以及局部環(huán)境的生物調節(jié)作用。
小鼠附睪上皮細胞
商品屬性：
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組織來源
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附睪
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規(guī)格
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5×10?Cells/T25培養(yǎng)瓶
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細胞分類
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小鼠原代細胞
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培養(yǎng)條件
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氣相：空氣，95%??CO2，5%
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生長特性
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貼壁
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細胞形態(tài)
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上皮細胞樣
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細胞簡介：
小鼠附睪上皮細胞分離自附睪組織；附睪（Epididymis）是一個由曲折、細小的管子構成的器官，一端接著輸精管（Ductusdeferens），一端接著睪丸（Testis）的曲細精管，具體結構主要包括輸出小管和附睪管。附睪緊貼睪丸的上端和后緣，可分為頭、體、尾三部。精子離開睪丸后通過輸出小管進入附睪。附睪具有暫存精液并分泌附睪液營養(yǎng)精子的功能，以促進精子的進一步成熟附睪的功能是暫存精子，促進精子的進一步成熟。精子在附睪內獲得運動能力，總共停留8～17天，終達到功能上的成熟。在這個過程中，精子除了自身的因素，還受到附睪微環(huán)境的影響，這包括了一系列的物理、化學變化和精子形態(tài)的改變?？梢哉f，附睪微環(huán)境正常穩(wěn)定是附睪發(fā)揮促成熟這一功能的必要條件。若附睪的功能發(fā)生異常，精子則不能成熟，引起不育。附睪上皮含有主細胞、基細胞、亮細胞等幾種類型細胞。基細胞，其頂部離附睪管腔有一定距離，在附睪各部分，其形態(tài)沒有差別，一般認為是貯備細胞；另一種主細胞，是維持附睪生理功能的物質基礎，在各區(qū)段的主細胞形態(tài)結構差別很大，這也反映出各區(qū)段的生理功能的差異。除上皮細胞外，附睪的管壁組織結構也有規(guī)律性的變化，附睪管起始段平滑肌有自發(fā)地節(jié)律性收縮，而尾部平滑肌就沒有這種特點，僅在射精一瞬間出現強烈的節(jié)律收縮。作為負責提供適合精子成熟微環(huán)境的附睪，具有活躍的分泌與吸收功能。其中，附睪上皮的電解質和水分的轉運，對保持附睪內合適的離子濃度和酸堿度，為精子成熟提供適宜的環(huán)境起著相當重要的作用。睪丸的支持細胞每天能產生大量睪網液，如一只公羊每天約能分泌40毫升睪網液，而從附睪排出的只不過幾百微升，也就是說睪丸分泌液有99%被附睪上皮重新吸收回體內。動物實驗表明，結扎輸精管時睪丸不會腫脹，但若結扎睪丸輸出小管，睪丸天就會腫脹，這就充分證實了附睪存在著強有力的吸收功能，但是重新吸收的意義尚不清楚。體外培養(yǎng)附睪上皮細胞對精子的發(fā)育、成熟，不孕不育，附睪生理基礎功能研究具有重要意義。
方法簡介：
實驗室分離的小鼠附睪上皮細胞采用膠原酶消化結合差速貼壁法制備而來，細胞總量約為5×10?cells/瓶。
質量檢測
實驗室分離的小鼠附睪上皮細胞經PCK熒光鑒定，純度可達90%以上，且不含有HIV-1、HBV、HCV、支原體、、酵母和等。
培養(yǎng)信息：
包被條件：鼠尾膠原Ⅰ（2-5μg/cm2）
培養(yǎng)基：含FBS、EGF、Hydrocortisone、腎上腺素、甲狀腺素、Insulin、Transferrin、Selenium Solution、Penicillin、Streptomycin等
換液頻率：每2-3天換液一次
生長特性：貼壁
細胞形態(tài)：上皮細胞樣
傳代特性：可傳1-2代
消化液：0.25%胰蛋白酶
培養(yǎng)條件：氣相：空氣，95%；CO2，5%
小鼠附睪上皮細胞體外培養(yǎng)周期有限；建議使用配套的生長培養(yǎng)基及正確的操作方法來培養(yǎng)，以此保證該細胞的佳凞?凞
公司正在出售的產品：
ColⅣELISAKIT
Hermansky-Pudlak綜合征蛋白3抗體
HPS3
細胞分裂周期蛋白16抗體
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大鼠胱天蛋白酶7(CASP7)elisa分析檢測試劑盒
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MAP7D3蛋白抗體
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Desmocollin 4
沉默調節(jié)蛋白1抗體 Anti-SIRT1
鳥嘌呤核苷酸交換因子抗體 Anti-RCBTB1/CLLD7
核仁蛋白C23抗體 Anti-Nucleolin/C23
信號通路Wnt5a抗體 Anti-WNT5A
TIP30蛋白抗體
TIP30
死亡因子4樣蛋白2抗體
Mortality Factor 4
like 2
脫髓鞘相關蛋白SH3TC2N抗體 Anti-SH3TC2
修補相關蛋白PTCHD3抗體 Anti-PTCHD3
親環(huán)蛋白（親環(huán)素）PPIG抗體 Anti-PPIG
干燥綜合征相關蛋白2抗體 Anti-TROVE-2/SSA2
FITC標記小鼠IgG（型對照)
小鼠附睪上皮細胞核蛋白相互作用蛋白1抗體
KPNA1
BATF2蛋白抗體
BATF2
原代細胞的分離方法：
一、懸浮細胞的分離方法
組織材料若來自血液、羊水、胸水或腹水的懸液材料，簡單的方法是采用1000r/min的低速離心10分鐘。經離心后由于各種細胞的比重不同可在分層液中形成不同層，這樣可根據需要收獲目的細胞。
二、實體組織材料的分離方法
對于實體組織材料，由于細胞間結合緊密，為了使組織中的細胞充分分散，形成細胞懸液，可采用機械分散法（物理裂解）和消化分離法。
（一）機械分散法
特點:簡便、快速,但對組織機械損傷大，而且細胞分散效果差,適用于處理纖維成分少的軟組織。
（二）消化分離法
組織消化法是把組織剪切成較小團塊（或糊狀），應用酶的生化作用和非酶的化學作用進一步使細胞間的橋連結構松動，使團塊膨松，由塊狀變成絮狀，此時再采用機械法，用吸管吹打分散或電磁攪拌或在搖珠瓶中振蕩，使細胞團塊得以較充分的分散，制成少量細胞群團和大量單個細胞的細胞懸液，接種培養(yǎng)后，細胞容易貼壁生長。
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