兔主動(dòng)脈外膜成纖維細(xì)胞
商品屬性:
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組織來(lái)源
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主動(dòng)脈
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規(guī)格
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5×10?Cells/T25培養(yǎng)瓶
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細(xì)胞分類
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兔原代細(xì)胞
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培養(yǎng)條件
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氣相:空氣,95%;CO2,5%
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生長(zhǎng)特性
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貼壁
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細(xì)胞形態(tài)
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成纖維細(xì)胞樣
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細(xì)胞簡(jiǎn)介:
兔主動(dòng)脈外膜成纖維細(xì)胞分離自主動(dòng)脈血管外膜組織;血管外膜是由疏松結(jié)締組織組成,其中含螺旋狀或縱向分布的彈性纖維和膠原纖維。血管壁的結(jié)締組織細(xì)胞以成纖維細(xì)胞為主,當(dāng)血管受損傷時(shí),成纖維細(xì)胞具有修復(fù)外膜的能力???有的動(dòng)脈中膜和外膜的交界處,有密集的彈性纖維組成的外彈性膜。成纖維細(xì)胞(Fibroblast)是疏松結(jié)締組織的主要細(xì)胞成分,由胚胎時(shí)期的間充質(zhì)細(xì)胞分化而來(lái)。成纖維細(xì)胞較大,輪廓清楚,多為突起的紡錘形或星形的扁平狀結(jié)構(gòu),其細(xì)胞核呈規(guī)則的卵圓形,核仁大而明顯。成纖維細(xì)胞功能活動(dòng)旺盛,細(xì)胞質(zhì)嗜弱堿性,具明顯的蛋白質(zhì)合成和分泌活動(dòng),在一定條件下,它可以實(shí)現(xiàn)跟纖維細(xì)胞的互相轉(zhuǎn)化;成纖維細(xì)胞對(duì)不同程度的細(xì)胞變性、壞死和組織缺損的修復(fù)有著十分重要的作用。剛分離的血管外膜成纖維細(xì)胞呈圓形、折光性良好,懸浮于培養(yǎng)基中。30min細(xì)胞貼壁,其中部分開始伸出偽足,表現(xiàn)為小的突起;6h后細(xì)胞基本貼壁完全,伸展成梭形,胞核清晰,分布較均勻,散在生長(zhǎng),不聚集成團(tuán);細(xì)胞生長(zhǎng)迅速,5-7天即呈融合狀態(tài),細(xì)胞排列緊密,有的交叉重疊生長(zhǎng),平坦、胞體較大,細(xì)胞質(zhì)透明,細(xì)胞核較大,呈橢圓形,顏色淡。細(xì)胞融合,并彼此連接成網(wǎng)狀;細(xì)胞呈突起的紡錘形或星形的扁平分布。血管外膜成纖維細(xì)胞是血管外膜的主要組成細(xì)胞之一,其主要生理功能合成和釋放細(xì)胞外基質(zhì)以及組織損傷后及時(shí)大量聚集修復(fù)損傷組織。
方法簡(jiǎn)介:
實(shí)驗(yàn)室分離的兔主動(dòng)脈外膜成纖維細(xì)胞采用胰蛋白酶-膠原酶混合酶消化后差速貼壁制備而來(lái),細(xì)胞總量約為5×10?cells/瓶。
質(zhì)量檢測(cè)
實(shí)驗(yàn)室分離的兔主動(dòng)脈外膜成纖維細(xì)胞經(jīng)Vimentin熒光鑒定,純度可達(dá)90%以上,且不含有HIV-1、HBV、HCV、支原體、、酵母和等。
培養(yǎng)信息:
培養(yǎng)基:含FBS、生長(zhǎng)添加劑、Penicillin、Streptomycin等
換液頻率:每2-3天換液一次
生長(zhǎng)特性:貼壁
細(xì)胞形態(tài):成纖維細(xì)胞樣
傳代特性:可傳3-5代左右;3代以內(nèi)狀態(tài)佳
消化液:0.25%胰蛋白酶
培養(yǎng)條件:氣相:空氣,95%;CO2,5%
兔主動(dòng)脈外膜成纖維細(xì)胞體外培養(yǎng)周期有限;建議使用配套的生長(zhǎng)培養(yǎng)基及正確的操作方法來(lái)培養(yǎng),以此保證該細(xì)胞的佳培養(yǎng)狀態(tài)。
原代細(xì)胞的培養(yǎng):
(1)原代細(xì)胞的培養(yǎng)方法
原代細(xì)胞的培養(yǎng)也叫初代培養(yǎng)是從供體取得組織細(xì)胞在體外進(jìn)行的培養(yǎng),是建立細(xì)胞系的步,是一項(xiàng)基本技術(shù)。
原代細(xì)胞接近和能反映體內(nèi)生長(zhǎng)特性,適宜用于敏感性試驗(yàn)、細(xì)胞分化等實(shí)驗(yàn)研究。
① 組織塊培養(yǎng)法
組織塊培養(yǎng)是常用、簡(jiǎn)便易行和成功率較高的原代培養(yǎng)方法。其基本方法是將剪成的小組織團(tuán)塊接種于培養(yǎng)瓶(或皿)中,瓶壁可預(yù)先涂以膠原薄層,以利于組織塊粘著于瓶壁,使周邊細(xì)胞能沿瓶壁向外生長(zhǎng)。
② 消化培養(yǎng)法
③ 懸浮細(xì)胞培養(yǎng)法
對(duì)于懸浮生長(zhǎng)的細(xì)胞,如白血病細(xì)胞、骨髓細(xì)胞、胸水和腹水中的癌細(xì)胞和細(xì)胞無(wú)需消化,可采用低速離心分離,直接培養(yǎng),或經(jīng)細(xì)胞分層液分離后接種培養(yǎng)。
④器官培養(yǎng)
器官培養(yǎng)是指從供體取得器官或組織塊后,不進(jìn)行組織分離而直接在體外的特定環(huán)境條件下培養(yǎng),器官培養(yǎng)可保持器官組織的相對(duì)完整性,可用于重點(diǎn)觀察細(xì)胞間的聯(lián)系、排列情況和相互影響,以及局部環(huán)境的生物調(diào)節(jié)作用。
原代細(xì)胞的分離方法:
一、懸浮細(xì)胞的分離方法
組織材料若來(lái)自血液、羊水、胸水或腹水的懸液材料,簡(jiǎn)單的方法是采用1000r/min的低速離心10分鐘。經(jīng)離心后由于各種細(xì)胞的比重不同可在分層液中形成不同層,這樣可根據(jù)需要收獲目的細(xì)胞。
二、實(shí)體組織材料的分離方法
對(duì)于實(shí)體組織材料,由于細(xì)胞間結(jié)合緊密,為了使組織中的細(xì)胞充分分散,形成細(xì)胞懸液,可采用機(jī)械分散法(物理裂解)和消化分離法。
(一)機(jī)械分散法
特點(diǎn):簡(jiǎn)便、快速,但對(duì)組織機(jī)械損傷大,而且細(xì)胞分散效果差,適用于處理纖維成分少的軟組織。
(二)消化分離法
組織消化法是把組織剪切成較小團(tuán)塊(或糊狀),應(yīng)用酶的生化作用和非酶的化學(xué)作用進(jìn)一步使細(xì)胞間的橋連結(jié)構(gòu)松動(dòng),使團(tuán)塊膨松,由塊狀變成絮狀,此時(shí)再采用機(jī)械法,用吸管吹打分散或電磁攪拌或在搖珠瓶中振蕩,使細(xì)胞團(tuán)塊得以較充分的分散,制成少量細(xì)胞群團(tuán)和大量單個(gè)細(xì)胞的細(xì)胞懸液,接種培養(yǎng)后,細(xì)胞容易貼壁生長(zhǎng)。
公司正在出售的產(chǎn)品:
人基膜聚糖/內(nèi)腔蛋白(LUM)elisa分析檢測(cè)試劑盒
LIN7A蛋白抗體
LIN7A
細(xì)胞分裂相關(guān)蛋白CSTF64T抗體
CSTF2T
小鼠腦源性神經(jīng)生長(zhǎng)因子(BDNF)elisa檢測(cè)試劑盒
大鼠谷氨酰胺合成酶(GLUL)elisa檢測(cè)試劑盒
組織基質(zhì)金屬(MMP-1)活性比色法定量檢測(cè)試劑盒
人肺炎衣原體抗原(Cpn)elisa檢測(cè)試劑盒免費(fèi)代測(cè)
背板膠質(zhì)乙酰酯酶抗體
NOTUM
通用轉(zhuǎn)錄因子3A
GTF3A
tRNA剪接內(nèi)切酶2抗體 Anti-TSEN2
凋亡相關(guān)蛋白4抗體 Anti-PDCD4
磷酸化蛋白激酶C抗體 Anti-phospho-PRKCA(Thr637)
細(xì)胞外基質(zhì)底物反應(yīng)蛋白2抗體 Anti-SPON2/M spondin/Mindin
磷酸化視網(wǎng)膜母細(xì)胞瘤相關(guān)蛋白1抗體
Phospho-Rb (Ser608)
嗅覺受體5D13抗體
OR5D13
X射線修復(fù)交叉互補(bǔ)蛋白4抗體 Anti-XRCC4
核仁和紡錘體相關(guān)蛋白1抗體 Anti-NUSAP1
RFESD蛋白抗體 Anti-RFESD
PSD95結(jié)合蛋白2抗體 Anti-SAPAP2/DLGAP2
大鼠β2糖蛋白1抗體IgA/G/M(β2-GP1 IgA/G/M)elisa分析檢測(cè)試劑盒
兔主動(dòng)脈外膜成纖維細(xì)胞艾滋病病毒p24抗體
HIV1 p24
α2巨球蛋白樣蛋白1抗體
α2ML1
A2ML1
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