原代細(xì)胞的培養(yǎng):
(1)原代細(xì)胞的培養(yǎng)方法
原代細(xì)胞的培養(yǎng)也叫初代培養(yǎng)是從供體取得組織細(xì)胞在體外進(jìn)行的培養(yǎng),是建立細(xì)胞系的步,是一項(xiàng)基本技術(shù)。
原代細(xì)胞接近和能反映體內(nèi)生長(zhǎng)特性,適宜用于敏感性試驗(yàn)、細(xì)胞分化等實(shí)驗(yàn)研究。
① 組織塊培養(yǎng)法
組織塊培養(yǎng)是常用、簡(jiǎn)便易行和成功率較高的原代培養(yǎng)方法。其基本方法是將剪成的小組織團(tuán)塊接種于培養(yǎng)瓶(或皿)中,瓶壁可預(yù)先涂以膠原薄層,以利于組織塊粘著于瓶壁,使周邊細(xì)胞能沿瓶壁向外生長(zhǎng)。
② 消化培養(yǎng)法
③ 懸浮細(xì)胞培養(yǎng)法
對(duì)于懸浮生長(zhǎng)的細(xì)胞,如白血病細(xì)胞、骨髓細(xì)胞、胸水和腹水中的癌細(xì)胞和細(xì)胞無(wú)需消化,可采用低速離心分離,直接培養(yǎng),或經(jīng)細(xì)胞分層液分離后接種培養(yǎng)。
④器官培養(yǎng)
器官培養(yǎng)是指從供體取得器官或組織塊后,不進(jìn)行組織分離而直接在體外的特定環(huán)境條件下培養(yǎng),器官培養(yǎng)可保持器官組織的相對(duì)完整性,可用于重點(diǎn)觀察細(xì)胞間的聯(lián)系、排列情況和相互影響,以及局部環(huán)境的生物調(diào)節(jié)作用。
兔脂肪細(xì)胞
商品屬性:
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組織來源
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脂肪
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規(guī)格
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5×10?Cells/T25培養(yǎng)瓶
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細(xì)胞分類
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兔原代細(xì)胞
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培養(yǎng)條件
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氣相:空氣,95%;CO2,5%
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生長(zhǎng)特性
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貼壁
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細(xì)胞形態(tài)
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梭形、多角形、圓形
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細(xì)胞簡(jiǎn)介:
兔脂肪細(xì)胞分離自脂肪組織;脂肪組織主要由大量群集的脂肪細(xì)胞構(gòu)成,聚集成團(tuán)的脂肪細(xì)胞由薄層疏松結(jié)締組織分隔成小葉;貯存的脂肪,在需要時(shí)可迅速分解成甘油和脂肪酸,經(jīng)血液輸送到各組織以供利用。它們影響胰島素敏感性、血壓水平、內(nèi)皮功能、纖溶活動(dòng)及炎癥反應(yīng),參與多種重要病理生理過程;脂肪組織已由過去單純作為能量?jī)?chǔ)存的器官而成為一個(gè)極其重要的系統(tǒng)。脂肪細(xì)胞分為白色脂肪細(xì)胞和褐色(棕色)脂肪細(xì)胞,常呈白色,在嬰幼兒期大量增殖,到青春期數(shù)量達(dá)到,此后數(shù)量一般不再增加。細(xì)胞內(nèi)含有大量富含脂肪的小泡,稱為脂質(zhì)泡,富含光面內(nèi)質(zhì)網(wǎng)。此外,還有一種褐色脂肪細(xì)胞,在動(dòng)物體內(nèi)主要存在于肩胛骨間、頸背部、腋窩、縱隔及腎臟周圍,含有高度團(tuán)縮的褐色脂肪,作用是將脂質(zhì)分解產(chǎn)熱,調(diào)節(jié)體內(nèi)脂質(zhì)比例。
方法簡(jiǎn)介:
實(shí)驗(yàn)室分離的兔脂肪細(xì)胞采用膠原酶-胰酶聯(lián)合消化法獲得前脂肪細(xì)胞,經(jīng)成脂誘導(dǎo)培養(yǎng)基誘導(dǎo)培養(yǎng)制備而來,細(xì)胞總量約為5×10?cells/瓶。
質(zhì)量檢測(cè)
實(shí)驗(yàn)室分離的兔脂肪細(xì)胞經(jīng)油紅O染色檢測(cè),純度可達(dá)90%以上,且不含有HIV-1、HBV、HCV、支原體、、酵母和等。
培養(yǎng)信息:
包被條件:PLL(0.1mg/ml)
培養(yǎng)基:含FBS、生長(zhǎng)添加劑、Penicillin、Streptomycin等
換液頻率:每2-3天換液一次
生長(zhǎng)特性:貼壁
細(xì)胞形態(tài):梭形、多角形、圓形
傳代特性:屬于終末分化細(xì)胞;屬于不增殖細(xì)胞群
消化液:0.25%胰蛋白酶
培養(yǎng)條件:氣相:空氣,95%;CO2,5%
兔脂肪細(xì)胞體外培養(yǎng)周期有限;建議使用配套的生長(zhǎng)培養(yǎng)基及正確的操作方法來培養(yǎng),以此保證該細(xì)胞的佳培養(yǎng)狀態(tài)。

公司正在出售的產(chǎn)品:
小鼠抗(ADH)elisa檢測(cè)試劑盒
小鼠c-jun elisa檢測(cè)試劑盒
4-氨基-3-肼基-5巰基-1,2,4-三氮唑(AHMT)
組織超氧化物陰離子熒光法定量檢測(cè)試劑盒
尿酸測(cè)試盒 50管/48樣
比色法
小鼠內(nèi)皮抑素(ES)elisa檢測(cè)試劑盒
大鼠谷氨酸脫羧酶自身抗體IgG(GAD-Ab-IgG)elisa檢測(cè)試劑盒
組織基質(zhì)金屬(MMP-2)活性熒光定量檢測(cè)試劑盒
人分泌型卷曲相關(guān)蛋白2(SFRP2)elisa分析檢測(cè)試劑盒
Flag Tag標(biāo)簽單克隆抗體 Flag Tag
GLOD4蛋白抗體 GLOD4
酶動(dòng)力蛋白3抗體 Dynamin 3
鈉依賴性脯氨酸轉(zhuǎn)運(yùn)PROT抗體 SLC6A7
毒蕈堿型乙酰膽堿受體M5抗體 CHRM5
二磷酸3核苷酸酶抗體 BPNT1
血管緊張素結(jié)合蛋白抗體 AGTBP/NLN
煙酸磷酸NAPRT1抗體 NAPRT1
RNA結(jié)合蛋白LIN28抗體 Lin28
SCYL結(jié)合蛋白1抗體 SCYL1BP1
碳水化合物磺基轉(zhuǎn)移酶10抗體 CHST10
源蛋白UNCX抗體 UNCX
甲狀腺受體相互作用11抗體 TRIP11/TRIP230
腱調(diào)蛋白/軟骨調(diào)節(jié)素樣1蛋白抗體 TNMD
2號(hào)染色體開放閱讀框50抗體 C2orf50
7號(hào)染色體開放閱讀框27抗體 C7orf27
大鼠糖類抗原125(CA125)elisa檢測(cè)試劑盒
兔脂肪細(xì)胞人蛋白精氨酸脫亞氨酶4(PADI4)elisa檢測(cè)試劑盒
磷脂酶D2(Phospholipase
D2)活性熒光定量檢測(cè)試劑盒
小鼠血清淀粉樣P物質(zhì)(SAP)elisa檢測(cè)試劑盒
大鼠克拉拉細(xì)胞蛋白(CC16)elisa檢測(cè)試劑盒
原代細(xì)胞的分離方法:
一、懸浮細(xì)胞的分離方法
組織材料若來自血液、羊水、胸水或腹水的懸液材料,簡(jiǎn)單的方法是采用1000r/min的低速離心10分鐘。經(jīng)離心后由于各種細(xì)胞的比重不同可在分層液中形成不同層,這樣可根據(jù)需要收獲目的細(xì)胞。
二、實(shí)體組織材料的分離方法
對(duì)于實(shí)體組織材料,由于細(xì)胞間結(jié)合緊密,為了使組織中的細(xì)胞充分分散,形成細(xì)胞懸液,可采用機(jī)械分散法(物理裂解)和消化分離法。
(一)機(jī)械分散法
特點(diǎn):簡(jiǎn)便、快速,但對(duì)組織機(jī)械損傷大,而且細(xì)胞分散效果差,適用于處理纖維成分少的軟組織。
(二)消化分離法
組織消化法是把組織剪切成較小團(tuán)塊(或糊狀),應(yīng)用酶的生化作用和非酶的化學(xué)作用進(jìn)一步使細(xì)胞間的橋連結(jié)構(gòu)松動(dòng),使團(tuán)塊膨松,由塊狀變成絮狀,此時(shí)再采用機(jī)械法,用吸管吹打分散或電磁攪拌或在搖珠瓶中振蕩,使細(xì)胞團(tuán)塊得以較充分的分散,制成少量細(xì)胞群團(tuán)和大量單個(gè)細(xì)胞的細(xì)胞懸液,接種培養(yǎng)后,細(xì)胞容易貼壁生長(zhǎng)。
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