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細(xì)胞簡介:

兔支氣管上皮細(xì)胞分離自支氣管組織;支氣管(Bronchi),是指由氣管分出的各級分枝,由氣管分出的**支氣管,即左、右主支氣管。左主支氣管與右主支氣管相比較,前者較細(xì)長,走向傾斜;后者較粗短,走向較前者略直,所以經(jīng)氣管墮入的異物多進(jìn)入右主支氣管。支氣管和氣管還有以區(qū)別就是,氣管是以“C”型的氣管軟骨為支架,而支氣管不是。支氣管上皮是氣道與外界環(huán)境接觸的道防線,不僅是各種病原體、炎癥介質(zhì)作用的靶細(xì)胞,還作為效應(yīng)細(xì)胞合成、釋放多種炎性介質(zhì)和細(xì)胞因子,從而參與氣道炎癥及反應(yīng)。支氣管上皮細(xì)胞在**、慢性阻塞性肺、肺癌、肺囊性纖維化以及一些感染性呼吸道的發(fā)病機制中均起著重要的作用。體外培養(yǎng)的原代支氣管上皮細(xì)胞因與體內(nèi)組織在形態(tài)結(jié)構(gòu)和功能活動上存在很大的相似性,因此,在基礎(chǔ)及臨床研究中極為重要。
商品屬性:
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產(chǎn)品名稱
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兔支氣管上皮細(xì)胞
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種屬
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兔
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組織來源
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支氣管
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規(guī)格
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5×10?Cells/T25培養(yǎng)瓶
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貨號
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A01X2013
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細(xì)胞形態(tài)
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上皮細(xì)胞樣
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培養(yǎng)條件
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氣相:空氣,95%;CO2,5%
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生長特性
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貼壁
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方法簡介:
實驗室分離的兔支氣管上皮細(xì)胞采用-中性蛋白酶混合消化法結(jié)合機械刮刷并通過上皮細(xì)胞培養(yǎng)基培養(yǎng)篩選制備而來,細(xì)胞總量約為5×10?cells/瓶。
質(zhì)量檢測
實驗室分離的兔支氣管上皮細(xì)胞經(jīng)PCK熒光鑒定,純度可達(dá)90%以上,且不含有HIV-1、HBV、HCV、支原體、、酵母和等。
培養(yǎng)信息:
包被條件:鼠尾膠原Ⅰ(2-5μg/cm2)
培養(yǎng)基:含FBS、生長添加劑、Penicillin、Streptomycin等
換液頻率:每2-3天換液一次
生長特性:貼壁
細(xì)胞形態(tài):上皮細(xì)胞樣
傳代特性:可傳1-2代
消化液:0.25%胰蛋白酶
培養(yǎng)條件:氣相:空氣,95%;CO2,5%
兔支氣管上皮細(xì)胞體外培養(yǎng)周期有限;建議使用配套的生長培養(yǎng)基及正確的操作方法來培養(yǎng),以此保證該細(xì)胞的佳培養(yǎng)狀態(tài)。
原代細(xì)胞的培養(yǎng)條件:

① 靜置貼壁細(xì)胞(包括半貼壁細(xì)胞的培養(yǎng))培養(yǎng)
a 細(xì)胞要通過充分漂洗,以盡量除去消化液的毒性
b 細(xì)胞接種時濃度要稍大一些,至少為5×108細(xì)胞/L。
c 培養(yǎng)基可用Eagle(MEM Corning 10-010-CVR)或DMEM(Corning 10-013-CVR)培養(yǎng)。
d 胎牛血清濃度為10%-80%。
e 應(yīng)在37℃5% CO2的培養(yǎng)箱中培養(yǎng)。。
f 在起始的2天中盡量減少振蕩,以防止剛貼壁的細(xì)胞發(fā)生脫落,漂浮。
g 待細(xì)胞基本貼壁伸展并逐漸形成網(wǎng)狀,應(yīng)將原代細(xì)胞換液
h 用骨髓或外周血中的懸浮細(xì)胞經(jīng)靜置培養(yǎng)1周時,應(yīng)將細(xì)胞懸液經(jīng)低速離心后換液。
② 懸浮細(xì)胞的培養(yǎng)要求
a 原代培養(yǎng)時要盡量去除紅細(xì)胞
b 短期培養(yǎng),可在含10%小牛血清的RPMI1640培養(yǎng)基中進(jìn)行
c 細(xì)胞濃度可在5-8×109/L范圍內(nèi),進(jìn)行分瓶試驗。
d 長期培養(yǎng)時,細(xì)胞中要加入生長因子,白血病細(xì)胞中要加入少量的原患者血清,以利細(xì)胞生長。
f 細(xì)胞換液一般每隔3天需半量換液一次
g 細(xì)胞傳代一般待細(xì)胞增殖加快、細(xì)胞密度較高時才能進(jìn)行。
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