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細胞簡介:
兔輸尿管上皮細胞分離自輸尿管組織;輸尿管上接腎盂,下連膀胱,是一對細長的管道,呈扁圓柱狀,位于腹膜后,為一肌肉粘膜所組成管狀結構,沿腰大肌內側的前方垂直下降進入骨盆。輸尿管有三個狹窄部:一個在腎盂與輸尿管移行處(輸尿管起始處);一個在越過小骨盆入口處;后一個在進入膀胱壁的內部。這些狹窄是結石、及壞死組織容易停留的部位。輸尿管——膀胱連接處有一種特殊結構,即瓦耳代爾鞘,它能有效地防止膀胱內尿液返流到輸尿管。臨床上將輸尿管分為上、中、下三段,也可稱為腹段、盆段、膀胱段。其中,腹段自腎盂輸尿管交界處,到跨越髂動脈處;盆段,自髂動脈到膀胱壁;膀胱段,自膀胱壁內斜行至膀胱粘膜、輸尿管開口。輸尿管管壁分為4層,黏膜層、固有層、肌層、外膜。黏膜層表面為移行上皮,約有4-5層細胞;固有層由細密的結締組織構成,內含膠原纖維和少量彈性纖維;輸尿管肌層主要由內縱和外環(huán)兩層平滑肌組成;外膜為疏松結締組織,營養(yǎng)血管由外膜進入輸尿管。其中,輸尿管上皮細胞主要分布于黏膜層。
商品屬性:
產品名稱
兔輸尿管上皮細胞
種屬
兔
組織來源
尿道
規(guī)格
5×10?Cells/T25培養(yǎng)瓶
貨號
A01X2083
細胞形態(tài)
上皮細胞樣
培養(yǎng)條件
氣相:空氣,95%;CO2,5%
生長特性
貼壁
方法簡介:
實驗室分離的兔輸尿管上皮細胞采用先中性蛋白酶消化、然后機械分離法使輸尿管分層、后膠原酶消化,并通過上皮細胞培養(yǎng)基培養(yǎng)篩選制備而來,細胞總量約為5×10?cells/瓶。
質量檢測
實驗室分離的兔輸尿管上皮細胞經PCK熒光鑒定,純度可達90%以上,且不含有HIV-1、HBV、HCV、支原體、、酵母和等。
培養(yǎng)信息:
包被條件:鼠尾膠原Ⅰ(2-5μg/cm2)
培養(yǎng)基:含FBS、生長添加劑、Penicillin、Streptomycin等
換液頻率:每2-3天換液一次
生長特性:貼壁
細胞形態(tài):上皮細胞樣
傳代特性:可傳1-2代
消化液:0.25%胰蛋白酶
培養(yǎng)條件:氣相:空氣,95%;CO2,5%
兔輸尿管上皮細胞體外培養(yǎng)周期有限;建議使用配套的生長培養(yǎng)基及正確的操作方法來培養(yǎng),以此保證該細胞的佳培養(yǎng)狀態(tài)。
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信息
原代細胞的培養(yǎng)條件:
① 靜置貼壁細胞(包括半貼壁細胞的培養(yǎng))培養(yǎng) a 細胞要通過充分漂洗,以盡量除去消化液的毒性 b 細胞接種時濃度要稍大一些,至少為5×108細胞/L。 c 培養(yǎng)基可用Eagle(MEM Corning 10-010-CVR)或DMEM(Corning 10-013-CVR)培養(yǎng)。 d 胎牛血清濃度為10%-80%。 e 應在37℃5% CO2的培養(yǎng)箱中培養(yǎng)。。 f 在起始的2天中盡量減少振蕩,以防止剛貼壁的細胞發(fā)生脫落,漂浮。 g 待細胞基本貼壁伸展并逐漸形成網狀,應將原代細胞換液 h 用骨髓或外周血中的懸浮細胞經靜置培養(yǎng)1周時,應將細胞懸液經低速離心后換液。 ② 懸浮細胞的培養(yǎng)要求 a 原代培養(yǎng)時要盡量去除紅細胞 b 短期培養(yǎng),可在含10%小牛血清的RPMI1640培養(yǎng)基中進行 c 細胞濃度可在5-8×109/L范圍內,進行分瓶試驗。 d 長期培養(yǎng)時,細胞中要加入生長因子,白血病細胞中要加入少量的原患者血清,以利細胞生長。 f 細胞換液一般每隔3天需半量換液一次 g 細胞傳代一般待細胞增殖加快、細胞密度較高時才能進行。