兔視網(wǎng)膜微血管內(nèi)皮細(xì)胞
商品屬性:
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組織來源
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視網(wǎng)膜
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規(guī)格
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5×10?Cells/T25培養(yǎng)瓶
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細(xì)胞分類
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兔原代細(xì)胞
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培養(yǎng)條件
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氣相:空氣,95%;CO2,5%
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生長特性
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貼壁
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細(xì)胞形態(tài)
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內(nèi)皮細(xì)胞樣
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細(xì)胞簡介:
兔視網(wǎng)膜微血管內(nèi)皮細(xì)胞分離自視網(wǎng)膜組織;視網(wǎng)膜居于眼球壁的內(nèi)層,是一層透明的薄膜。視網(wǎng)膜由色素上皮層和視網(wǎng)膜感覺層組成,兩層間在病理情況下可分開,稱為視網(wǎng)膜脫離。色素上皮層與脈絡(luò)膜緊密相連,由色???上皮細(xì)胞組成,它們具有支持和營養(yǎng)光感受器細(xì)胞、遮光、散熱以及再生和修復(fù)等作用。組織學(xué)上視網(wǎng)膜分為10層,由外向內(nèi)分別為:色素上皮層、視錐、視桿細(xì)胞層、外界膜、外顆粒層、外叢狀層、內(nèi)顆粒層、內(nèi)叢狀層、神經(jīng)節(jié)細(xì)胞層、神經(jīng)纖維層、內(nèi)界膜。視網(wǎng)膜內(nèi)層為襯于血管膜內(nèi)面的一層薄膜,有感光作用;后部鼻側(cè)有一視神經(jīng)。視網(wǎng)膜上的感覺層是由三個(gè)神經(jīng)元組成。神經(jīng)元是視細(xì)胞層,專司感光,它包括錐細(xì)胞和桿細(xì)胞。視桿細(xì)胞主要在離中心凹較遠(yuǎn)的視網(wǎng)膜上,而視錐細(xì)胞則在中心凹處多。層叫雙節(jié)細(xì)胞,約有10到數(shù)百個(gè)視細(xì)胞通過雙節(jié)細(xì)胞與一個(gè)神經(jīng)節(jié)細(xì)胞相聯(lián)系,負(fù)責(zé)聯(lián)絡(luò)作用。第三層叫節(jié)細(xì)胞層,專管傳導(dǎo)。視網(wǎng)膜是一層菲薄的但又非常復(fù)雜的結(jié)構(gòu),它貼于眼球的后壁部,傳遞來自視網(wǎng)膜感受器沖動(dòng)的神經(jīng)纖維跨越視網(wǎng)膜表面,經(jīng)由視神經(jīng)到達(dá)出口。視網(wǎng)膜的分辨力是不均勻的,在黃斑區(qū),其分辨能力強(qiáng)。它是組成血管腔面單層扁平上皮樣細(xì)胞,它所產(chǎn)生和分泌的生物活性物質(zhì)對(duì)維持血管張力、調(diào)節(jié)血壓、抗血栓形成等有重要作用,在視網(wǎng)膜血管的發(fā)病機(jī)制中有重要病理生理學(xué)意義。由于從不同的組織和器官獲得的內(nèi)皮細(xì)胞具有不同的特性,在腦和視網(wǎng)膜中,這些內(nèi)皮細(xì)胞具有內(nèi)屏障的功能,在調(diào)節(jié)血管生理狀態(tài),釋放血管活性物質(zhì)以及新生血管的形成中發(fā)揮著重要作用,體外分離培養(yǎng)RCEC對(duì)研究視網(wǎng)膜血管性發(fā)展的病理生理機(jī)制以及的早期防治具有重要臨床意義。
方法簡介:
實(shí)驗(yàn)室分離的兔視網(wǎng)膜微血管內(nèi)皮細(xì)胞采用膠原酶-中性蛋白酶混合消化法結(jié)合密度梯度離心法、后通過內(nèi)皮細(xì)胞培養(yǎng)基培養(yǎng)篩選制備而來,細(xì)胞總量約為5×10?cells/瓶。
質(zhì)量檢測
實(shí)驗(yàn)室分離的兔視網(wǎng)膜微血管內(nèi)皮細(xì)胞經(jīng)CD31熒光鑒定,純度可達(dá)90%以上,且不含有HIV-1、HBV、HCV、支原體、、酵母和等。
培養(yǎng)信息:
包被條件:PLL(0.1mg/ml),明膠(0.1%)
培養(yǎng)基:含FBS、生長添加劑、Penicillin、Streptomycin等
換液頻率:每2-3天換液一次
生長特性:貼壁
細(xì)胞形態(tài):內(nèi)皮細(xì)胞樣
傳代特性:可傳2-3代
消化液:0.25%胰蛋白酶
培養(yǎng)條件:氣相:空氣,95%;CO2,5%
兔視網(wǎng)膜微血管內(nèi)皮細(xì)胞體外培養(yǎng)周期有限;建議使用配套的生長培養(yǎng)基及正確的操作方法來培養(yǎng),以此保證該細(xì)胞的佳培養(yǎng)狀態(tài)。
原代細(xì)胞的培養(yǎng):
(1)原代細(xì)胞的培養(yǎng)方法
原代細(xì)胞的培養(yǎng)也叫初代培養(yǎng)是從供體取得組織細(xì)胞在體外進(jìn)行的培養(yǎng),是建立細(xì)胞系的步,是一項(xiàng)基本技術(shù)。
原代細(xì)胞接近和能反映體內(nèi)生長特性,適宜用于敏感性試驗(yàn)、細(xì)胞分化等實(shí)驗(yàn)研究。
① 組織塊培養(yǎng)法
組織塊培養(yǎng)是常用、簡便易行和成功率較高的原代培養(yǎng)方法。其基本方法是將剪成的小組織團(tuán)塊接種于培養(yǎng)瓶(或皿)中,瓶壁可預(yù)先涂以膠原薄層,以利于組織塊粘著于瓶壁,使周邊細(xì)胞能沿瓶壁向外生長。
② 消化培養(yǎng)法
③ 懸浮細(xì)胞培養(yǎng)法
對(duì)于懸浮生長的細(xì)胞,如白血病細(xì)胞、骨髓細(xì)胞、胸水和腹水中的癌細(xì)胞和細(xì)胞無需消化,可采用低速離心分離,直接培養(yǎng),或經(jīng)細(xì)胞分層液分離后接種培養(yǎng)。
④器官培養(yǎng)
器官培養(yǎng)是指從供體取得器官或組織塊后,不進(jìn)行組織分離而直接在體外的特定環(huán)境條件下培養(yǎng),器官培養(yǎng)可保持器官組織的相對(duì)完整性,可用于重點(diǎn)觀察細(xì)胞間的聯(lián)系、排列情況和相互影響,以及局部環(huán)境的生物調(diào)節(jié)作用。
原代細(xì)胞的分離方法:
一、懸浮細(xì)胞的分離方法
組織材料若來自血液、羊水、胸水或腹水的懸液材料,簡單的方法是采用1000r/min的低速離心10分鐘。經(jīng)離心后由于各種細(xì)胞的比重不同可在分層液中形成不同層,這樣可根據(jù)需要收獲目的細(xì)胞。
二、實(shí)體組織材料的分離方法
對(duì)于實(shí)體組織材料,由于細(xì)胞間結(jié)合緊密,為了使組織中的細(xì)胞充分分散,形成細(xì)胞懸液,可采用機(jī)械分散法(物理裂解)和消化分離法。
(一)機(jī)械分散法
特點(diǎn):簡便、快速,但對(duì)組織機(jī)械損傷大,而且細(xì)胞分散效果差,適用于處理纖維成分少的軟組織。
(二)消化分離法
組織消化法是把組織剪切成較小團(tuán)塊(或糊狀),應(yīng)用酶的生化作用和非酶的化學(xué)作用進(jìn)一步使細(xì)胞間的橋連結(jié)構(gòu)松動(dòng),使團(tuán)塊膨松,由塊狀變成絮狀,此時(shí)再采用機(jī)械法,用吸管吹打分散或電磁攪拌或在搖珠瓶中振蕩,使細(xì)胞團(tuán)塊得以較充分的分散,制成少量細(xì)胞群團(tuán)和大量單個(gè)細(xì)胞的細(xì)胞懸液,接種培養(yǎng)后,細(xì)胞容易貼壁生長。
公司正在出售的產(chǎn)品:
水樣中汞離子(Hg2+)濃度測試盒
小鼠輔肌動(dòng)蛋白α2(ACTN2)elisa檢測試劑盒
大鼠Klotho蛋白(KL)elisa檢測試劑盒
全組織組織化學(xué)AP酶聯(lián)NBT/BCIP間接檢測試劑盒(含AP二抗)
人c-jun elisa檢測試劑盒
小鼠睫狀神經(jīng)營養(yǎng)因子(CNTF)elisa檢測試劑盒
大鼠促腎上腺皮質(zhì)素釋放結(jié)合蛋白(CRHBP)elisa檢測試劑盒
血液一氧化氮(NO)活性比色法定量檢測試劑盒
人丙烯醛(ACR)elisa檢測試劑盒
6型膠原蛋白α5抗體 COL6A5
ADCK4蛋白抗體 ADCK4
甲狀腺受體α抗體 Thyroid hormone receptor
alpha
堿性螺旋-環(huán)-螺旋轉(zhuǎn)錄因子SCXA抗體 SCXA
RNA結(jié)合蛋白56抗體 TAF15/RBP56
SCN2A抗體 SCN2A
肽酰甘氨酸2羥化酶抗體 PAM/Peptidylglycine 2 hydroxylase
通用轉(zhuǎn)錄因子IIA樣因子抗體 ALF
GARNL3蛋白抗體 GARNL3
G蛋白偶合受體激酶2抗體 GRK2
鉬輔因子合成蛋白3抗體 MOCS3
內(nèi)皮素轉(zhuǎn)化酶1抗體 ECE1
多型性腺瘤基因1蛋白抗體 PLAG1
泛素特異性蛋白酶52抗體 USP52/Pan2
血影蛋白A鏈非紅細(xì)胞型抗體 Spectrin alpha chain, non-erythrocytic 1
抑制素結(jié)合蛋白抗體 IGSF1
谷氨酸測試盒 50管/48樣
紫外比色法
兔視網(wǎng)膜微血管內(nèi)皮細(xì)胞MAMDC2蛋白抗體
MAMDC2
三磷酸腺苷依賴解旋酶DDX3抗體
DDX3
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