原代細胞的培養(yǎng)：
(1)原代細胞的培養(yǎng)方法
原代細胞的培養(yǎng)也叫初代培養(yǎng)是從供體取得組織細胞在體外進行的培養(yǎng)，是建立細胞系的步，是一項基本技術(shù)。
原代細胞接近和能反映體內(nèi)生長特性，適宜用于敏感性試驗、細胞分化等實驗研究。
① 組織塊培養(yǎng)法
組織塊培養(yǎng)是常用、簡便易行和成功率較高的原代培養(yǎng)方法。其基本方法是將剪成的小組織團塊接種于培養(yǎng)瓶(或皿)中，瓶壁可預(yù)先涂以膠原薄層，以利于組織塊粘著于瓶壁，使周邊細胞能沿瓶壁向外生長。
② 消化培養(yǎng)法
③ 懸浮細胞培養(yǎng)法
對于懸浮生長的細胞，如白血病細胞、骨髓細胞、胸水和腹水中的癌細胞和細胞無需消化，可采用低速離心分離，直接培養(yǎng)，或經(jīng)細胞分層液分離后接種培養(yǎng)。
④器官培養(yǎng)
器官培養(yǎng)是指從供體取得器官或組織塊后，不進行組織分離而直接在體外的特定環(huán)境條件下培養(yǎng)，器官培養(yǎng)可保持器官組織的相對完整性，可用于重點觀察細胞間的聯(lián)系、排列情況和相互影響，以及局部環(huán)境的生物調(diào)節(jié)作用。
兔腎小管上皮細胞
商品屬性：
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組織來源
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腎
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規(guī)格
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5×10?Cells/T25培養(yǎng)瓶
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細胞分類
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兔原代細胞
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培養(yǎng)條件
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氣相：空氣，95%；CO2，5%
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生長特性
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貼壁
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細胞形態(tài)
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上皮細胞樣
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細胞簡介：
兔腎小管上皮細胞分離自腎組織；腎臟是機體的重要器官，它的基本功能是**尿液，借以體內(nèi)代謝產(chǎn)物及某些廢物、毒物，同時經(jīng)重吸收功能保留水份及其他有用物質(zhì)，如葡萄糖、蛋白質(zhì)、氨基酸、鈉離子、鉀離子、等，以調(diào)節(jié)水、電解質(zhì)平衡及維護酸堿平衡。腎臟同時還有功能，**腎素、促紅細胞**素、活性維生素D3、前列腺素、激肽等，又為機體部分的降解場所和腎外的靶器官。腎臟的這些功能，保證了機體內(nèi)環(huán)境的穩(wěn)定，使新陳代謝得以正常進行。腎小管是機體腎臟器官上與腎小囊壁層相連的一條細長上皮性小管，具有重吸收（reabsorption）和排泌作用。腎小管按不同的形態(tài)結(jié)構(gòu)、分布位置和功能分成近端小管、髓袢和遠端小管三部分；近端小管可分為直部和曲部，曲部也稱為近曲小管，位于皮質(zhì)迷路內(nèi)，于腎小體附近高度蟠曲；遠端小管曲部也稱為遠曲小管，位于皮質(zhì)迷路內(nèi)。腎小管上皮細胞是腎小管外面的一層細胞，腎小管上皮細胞的分離、培養(yǎng)是研究腎臟的一項重要技術(shù)，目前該細胞分離方法有酶分離法、化學(xué)分離法篩網(wǎng)分離法、顯微解剖分離法、流式細胞儀分離法等。腎小管上皮細胞主要功能：①腎小管上皮細胞重吸收原尿中幾乎全部的葡萄糖和氨基酸；②排泌非營養(yǎng)物質(zhì)進入終尿；③細胞能分泌炎癥介質(zhì)如細胞因子和趨化因子，通過產(chǎn)生IL-8或直接趨化白細胞參與急性炎癥反應(yīng)；④移植腎炎癥和新月體腎炎中PTEpiC表達IL-2R和MHC-Ⅱ類抗原，這說明腎小管上皮細胞參與腎損傷的發(fā)生。隨著對腎間質(zhì)纖維化機制研究的日漸加深，腎小管上皮細胞（RTECs）在其中的作用日益被人們重視。因此，提供良好的腎小管上皮細胞模型，在腎小管間質(zhì)的發(fā)病機制和篩選的研究中是非常重要的。
方法簡介：
實驗室分離的兔腎小管上皮細胞采用先機械研磨過不銹鋼網(wǎng)篩分離得到腎小管、后用膠原酶消化，結(jié)合上皮細胞培養(yǎng)基培養(yǎng)篩選制備而來，細胞總量約為5×10?cells/瓶。
質(zhì)量檢測
實驗室分離的兔腎小管上皮細胞經(jīng)Cytokeratin-18熒光鑒定，純度可達90%以上，且不含有HIV-1、HBV、HCV、支原體、、酵母和等。
培養(yǎng)信息：
包被條件：鼠尾膠原Ⅰ（2-5μg/cm2）
培養(yǎng)基：含FBS、生長添加劑、Penicillin、Streptomycin等
換液頻率：每2-3天換液一次
生長特性：貼壁
細胞形態(tài)：上皮細胞樣
傳代特性：可傳1-2代
消化液：0.25%胰蛋白酶
培養(yǎng)條件：氣相：空氣，95%；CO2，5%
兔腎小管上皮細胞體外培養(yǎng)周期有限；建議使用配套的生長培養(yǎng)基及正確的操作方法來培養(yǎng)，以此保證該細胞的佳培養(yǎng)狀態(tài)。
公司正在出售的產(chǎn)品：
雞Toll樣受體4(TLR4)elisa分析檢測試劑盒
MITD1蛋白抗體
MITD1
1號染色體開放閱讀框31抗體
C1orf31
小鼠饑餓(GHRL)elisa分析檢測試劑盒
大鼠補體C5a（C5a）elisa檢測試劑盒
細胞磷脂皮爾斯（Pearse）染色試劑盒
人白介素18結(jié)合蛋白(IL-18BP)elisa檢測試劑盒
磷脂爬行酶3抗體
PLSCR3
皮膚T細胞虜獲趨化因子抗體
CCL27
轉(zhuǎn)錄因子Tbx3抗體 Anti-TBX3
腺苷單磷酸活化蛋白激酶γ2抗體 Anti-PRKAG2/AMPKγ2
絲氨酸/蘇氨酸蛋白激酶18 Anti-PLK4/STK18
鈉碘轉(zhuǎn)運體蛋白8抗體 Anti-SLC5A8
Cy5標記的兔抗人IgG H&L F(ab')2
Rabbit Anti-Human
IgG F(ab')? / Cy5
減數(shù)分裂內(nèi)切酶EME1抗體
EME1
人白介素17F(IL-17F)elisa分析檢測試劑盒
IL-17FELISAKit
豬骨鈣素/骨谷氨酸蛋白(OT/BGP)elisa分析檢測試劑盒
PorcineOsteocalcinELISAkit
猴子N端前腦鈉素(NT-proBNP)elisa分析檢測試劑盒
兔腎小管上皮細胞Hermansky-Pudlak綜合征蛋白3抗體
HPS3
細胞分裂周期蛋白16抗體
APC6
原代細胞的分離方法：
一、懸浮細胞的分離方法
組織材料若來自血液、羊水、胸水或腹水的懸液材料，簡單的方法是采用1000r/min的低速離心10分鐘。經(jīng)離心后由于各種細胞的比重不同可在分層液中形成不同層，這樣可根據(jù)需要收獲目的細胞。
二、實體組織材料的分離方法
對于實體組織材料，由于細胞間結(jié)合緊密，為了使組織中的細胞充分分散，形成細胞懸液，可采用機械分散法（物理裂解）和消化分離法。
（一）機械分散法
特點:簡便、快速,但對組織機械損傷大，而且細胞分散效果差,適用于處理纖維成分少的軟組織。
（二）消化分離法
組織消化法是把組織剪切成較小團塊（或糊狀），應(yīng)用酶的生化作用和非酶的化學(xué)作用進一步使細胞間的橋連結(jié)構(gòu)松動，使團塊膨松，由塊狀變成絮狀，此時再采用機械法，用吸管吹打分散或電磁攪拌或在搖珠瓶中振蕩，使細胞團塊得以較充分的分散，制成少量細胞群團和大量單個細胞的細胞懸液，接種培養(yǎng)后，細胞容易貼壁生長。
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