原代細(xì)胞的培養(yǎng)：
(1)原代細(xì)胞的培養(yǎng)方法
原代細(xì)胞的培養(yǎng)也叫初代培養(yǎng)是從供體取得組織細(xì)胞在體外進行的培養(yǎng)，是建立細(xì)胞系的步，是一項基本技術(shù)。
原代細(xì)胞接近和能反映體內(nèi)生長特性，適宜用于敏感性試驗、細(xì)胞分化等實驗研究。
① 組織塊培養(yǎng)法
組織塊培養(yǎng)是常用、簡便易行和成功率較高的原代培養(yǎng)方法。其基本方法是將剪成的小組織團塊接種于培養(yǎng)瓶(或皿)中，瓶壁可預(yù)先涂以膠原薄層，以利于組織塊粘著于瓶壁，使周邊細(xì)胞能沿瓶壁向外生長。
② 消化培養(yǎng)法
③ 懸浮細(xì)胞培養(yǎng)法
對于懸浮生長的細(xì)胞，如白血病細(xì)胞、骨髓細(xì)胞、胸水和腹水中的癌細(xì)胞和細(xì)胞無需消化，可采用低速離心分離，直接培養(yǎng)，或經(jīng)細(xì)胞分層液分離后接種培養(yǎng)。
④器官培養(yǎng)
器官培養(yǎng)是指從供體取得器官或組織塊后，不進行組織分離而直接在體外的特定環(huán)境條件下培養(yǎng)，器官培養(yǎng)可保持器官組織的相對完整性，可用于重點觀察細(xì)胞間的聯(lián)系、排列情況和相互影響，以及局部環(huán)境的生物調(diào)節(jié)作用。
兔神經(jīng)干細(xì)胞
商品屬性：
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組織來源
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腦
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規(guī)格
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5×10?Cells/T25培養(yǎng)瓶
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細(xì)胞分類
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兔原代細(xì)胞
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培養(yǎng)條件
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氣相：空氣，95%；CO2，5%
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生長特性
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懸浮
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細(xì)胞形態(tài)
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球形
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細(xì)胞簡介：
兔神經(jīng)干細(xì)胞分離自腦皮層組織；大腦分左右兩個半球，大腦皮質(zhì)（灰質(zhì)）覆蓋著每個大腦半球的大部分，它是神經(jīng)元胞體集中的地方。內(nèi)部則是由神經(jīng)纖維或髓鞘構(gòu)成的白質(zhì)。每一個半球都有三個面，即外側(cè)面（約占整個皮質(zhì)面積的1/3）、內(nèi)側(cè)面和底面（占2/3的面積）；半球表面有很多深淺不等的溝或裂，溝或裂之間的隆起叫回，它們大大增加了大腦的表面積；大腦外側(cè)面重要的溝、裂有大腦外側(cè)裂、頂枕裂和中央溝。由于三溝裂之界隔，使大腦皮質(zhì)組分為額葉、頂葉、顳葉、枕葉四大部分。神經(jīng)干細(xì)胞具有分化為神經(jīng)神經(jīng)元、星形膠質(zhì)細(xì)胞和少突膠質(zhì)細(xì)胞的能力，能自我更新，并足以提供大量腦組織細(xì)胞的細(xì)胞群。神經(jīng)干細(xì)胞是一類具有分裂潛能和自更新能力的母細(xì)胞，它可以通過不對等的分裂方式產(chǎn)生神經(jīng)組織的各類細(xì)胞。需要強調(diào)的是，在腦脊髓等所有神經(jīng)組織中，不同的神經(jīng)干細(xì)胞類型產(chǎn)生的子代細(xì)胞種類不同，分布也不同。神經(jīng)干細(xì)胞作為干細(xì)胞的一種，它具有其它所有干細(xì)胞的基本特征：具有自我維持和自我更新能力，具有多種分化潛能，具有分化為本系統(tǒng)大部分類型細(xì)胞的能力，這種自我更新和分化潛能可以維持相當(dāng)長的時間甚至終生，對損傷和具有反應(yīng)能力。神經(jīng)干細(xì)胞在、損傷狀態(tài)下具有增殖、遷移，并向神經(jīng)細(xì)胞、星形膠質(zhì)細(xì)胞和少突膠質(zhì)細(xì)胞分化的能力，已成為神經(jīng)系統(tǒng)損傷修復(fù)和再生研究的熱點，體外建立穩(wěn)定的神經(jīng)干細(xì)胞培養(yǎng)模型是其基礎(chǔ)和臨床應(yīng)用的前提。神經(jīng)干細(xì)胞在培養(yǎng)3-4d后，可形成神經(jīng)球，神經(jīng)球在培養(yǎng)基中呈懸浮生長，予以更換半量培基，1周后用吸管輕柔吹打球形克隆成為小的神經(jīng)球和單細(xì)胞懸液，將部分細(xì)胞接種到新的培養(yǎng)瓶中，2×105個細(xì)胞/瓶，每7-10d傳代1次，每隔3d離心更換半量培養(yǎng)基1次，培養(yǎng)條件不變。
方法簡介：
實驗室分離的兔神經(jīng)干細(xì)胞采用胰蛋白酶消化后差速貼壁，結(jié)合神經(jīng)干細(xì)胞培養(yǎng)基培養(yǎng)篩選制備而來，總量約為5×10?cells/瓶。
質(zhì)量檢測
實驗室分離的兔神經(jīng)干細(xì)胞經(jīng)Nestin熒光鑒定，純度可達90%以上，且不含有HIV-1、HBV、HCV、支原體、、酵母和等。
培養(yǎng)信息：
培養(yǎng)基：含B-27 Supplement、EGF、bFGF、Penicillin、Streptomycin等
換液頻率：每2-3天換液一次
生長特性：懸浮
細(xì)胞形態(tài)：球形
傳代特性：可傳2-3代
消化液：0.25%胰蛋白酶，Accutase
培養(yǎng)條件：氣相：空氣，95%；CO2，5%
兔神經(jīng)干細(xì)胞體外培養(yǎng)周期有限；建議使用配套的生長培養(yǎng)基及正確的操作方法來培養(yǎng)，以此保證該細(xì)胞的佳培養(yǎng)狀態(tài)。
公司正在出售的產(chǎn)品：
大鼠肝X受體α(LXRα)elisa檢測試劑盒
Caspase 9 活性檢測試劑盒20T
小鼠二肽基肽酶Ⅳ(DPPⅣ)elisa檢測試劑盒
雞1,3-βD葡葡糖苷酶(1,3-βD glucosidase)elisa檢測試劑盒免費代測
人體腫瘤β－catenin突變巢式分析試劑盒
小鼠活化素A(ACV-A)elisa分析檢測試劑盒
大鼠丙二醛(MDA)elisa分析檢測試劑盒
石蠟切片磷脂皮爾斯（Pearse）直接染色試劑盒
人白介素17B(IL17B)elisa檢測試劑盒
CULLIN抗體 C10orf46
DNA甲基轉(zhuǎn)移酶-3α抗體 Dnmt3a
磷酸化白介素2受體β（CD122）鏈抗體 phospho-IL2 Receptor beta (Tyr364)
磷酸化核基質(zhì)結(jié)合區(qū)結(jié)合蛋白1抗體 Phospho-SATB1 (Ser47)
半乳糖凝集素3單克隆抗體 Galectin 3
丙型肝炎病毒NS4B（65kDa）抗體 Hepatitis C Virus RNA-directed RNA polymerase
線粒體核糖體蛋白L4抗體 MRPL4
相互作用蛋白FHL2抗體 FHL2
NKR-P1G抗體 Klrb1
p40蛋白抗體 p40/RABEPK
三磷酸腺苷受體受體P2X2抗體 P2X2
神經(jīng)生長因子誘導(dǎo)蛋白抗體 VGF
核蛋白9 / Ran結(jié)合蛋白M單克隆抗體 RANBP9
核糖體合成蛋白BOP1抗體 BOP1
周期素G2抗體 CCNG2
轉(zhuǎn)運蛋白SEC23抗體 SEC23
?石蠟切片組織COLLAGEN III蛋白表達NBT顯色光學(xué)顯微鏡檢測試劑盒
兔神經(jīng)干細(xì)胞大鼠SHC轉(zhuǎn)化蛋白1(SHC1)elisa分析檢測試劑盒
SHC1 ELISA kit
人胱天蛋白酶12(Casp-12)elisa分析檢測試劑盒
Casp-12ELISAKit
原代細(xì)胞的分離方法：
一、懸浮細(xì)胞的分離方法
組織材料若來自血液、羊水、胸水或腹水的懸液材料，簡單的方法是采用1000r/min的低速離心10分鐘。經(jīng)離心后由于各種細(xì)胞的比重不同可在分層液中形成不同層，這樣可根據(jù)需要收獲目的細(xì)胞。
二、實體組織材料的分離方法
對于實體組織材料，由于細(xì)胞間結(jié)合緊密，為了使組織中的細(xì)胞充分分散，形成細(xì)胞懸液，可采用機械分散法（物理裂解）和消化分離法。
（一）機械分散法
特點:簡便、快速,但對組織機械損傷大，而且細(xì)胞分散效果差,適用于處理纖維成分少的軟組織。
（二）消化分離法
組織消化法是把組織剪切成較小團塊（或糊狀），應(yīng)用酶的生化作用和非酶的化學(xué)作用進一步使細(xì)胞間的橋連結(jié)構(gòu)松動，使團塊膨松，由塊狀變成絮狀，此時再采用機械法，用吸管吹打分散或電磁攪拌或在搖珠瓶中振蕩，使細(xì)胞團塊得以較充分的分散，制成少量細(xì)胞群團和大量單個細(xì)胞的細(xì)胞懸液，接種培養(yǎng)后，細(xì)胞容易貼壁生長。
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