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細胞簡介：
兔海綿體平滑肌細胞分離自海綿體組織；海綿體，又稱海綿體肌，是硬的平滑肌和結締組織。海綿體是一種勃起組織，外面包有堅厚的白膜，內部由結締組織和平滑肌組成海綿狀支架，其腔隙與血管相通。它主要包括海綿體內皮細胞、平滑肌細胞和成纖維細胞3種細胞成分。其中平滑肌細胞和成纖維細胞鑲嵌于海綿體細胞外基質的膠原中，在消化海綿體組織時，膠原酶的作用主要是松解海綿體內皮細胞與基膜的聯(lián)系，破壞海綿體內皮細胞間的緊密連接。因此可用膠原酶分離出海綿體平滑肌細胞。平滑肌，是非橫紋肌的肌肉組織。分布在人體動脈和靜脈血管壁、膀胱、、男性和女性生殖道、消化道、呼吸道、眼睛的睫狀肌和虹膜。平滑肌細胞原代分離培養(yǎng)3天后，可見細胞貼壁伸展，細胞形態(tài)大小不一，呈梭形、不規(guī)則形、三角形或扇形，核卵圓形、居中；2周后細胞匯合，多數(shù)細胞伸展呈長梭形，胞漿豐富，有分枝狀突起，細胞平行排列成單層或部分區(qū)域多層重疊生長，高低起伏；細胞密度低時，常交織成網狀；密度高時，則排列為旋渦狀或柵欄狀。傳代后細胞生長較快，4-6天即可匯合，并保持上述形態(tài)學特征和生長特點。
商品屬性：
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產品名稱
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兔海綿體平滑肌細胞
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種屬
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兔
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組織來源
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海綿體
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規(guī)格
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5×10?Cells/T25培養(yǎng)瓶
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貨號
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A01X2115
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細胞形態(tài)
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成纖維細胞樣
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培養(yǎng)條件
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氣相：空氣，95%；CO2，5%
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生長特性
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貼壁
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方法簡介：
實驗室分離的兔海綿體平滑肌細胞采用膠原酶消化法結合差速貼壁法制備而來，細胞總量約為5×10?cells/瓶。
質量檢測
實驗室分離的兔海綿體平滑肌細胞經α-SMA熒光鑒定，純度可達90%以上，且不含有HIV-1、HBV、HCV、支原體、、酵母和等。
培養(yǎng)信息：
培養(yǎng)基：含FBS、生長添加劑、Penicillin、Streptomycin等
換液頻率：每2-3天換液一次
生長特性：貼壁
細胞形態(tài)：成纖維細胞樣
傳代特性：可傳3-5代左右；3代以內狀態(tài)佳
消化液：0.25%胰蛋白酶
培養(yǎng)條件：氣相：空氣，95%；CO2，5%
兔海綿體平滑肌細胞體外培養(yǎng)周期有限；建議使用配套的生長培養(yǎng)基及正確的操作方法來培養(yǎng)，以此保證該細胞的佳培養(yǎng)狀態(tài)。
原代細胞的培養(yǎng)條件：
① 靜置貼壁細胞(包括半貼壁細胞的培養(yǎng))培養(yǎng)
a 細胞要通過充分漂洗，以盡量除去消化液的毒性
b 細胞接種時濃度要稍大一些，至少為5×108細胞/L。
c 培養(yǎng)基可用Eagle(MEM Corning 10-010-CVR)或DMEM(Corning 10-013-CVR)培養(yǎng)。
d 胎牛血清濃度為10%-80%。
e 應在37℃5% CO2的培養(yǎng)箱中培養(yǎng)。。
f 在起始的2天中盡量減少振蕩，以防止剛貼壁的細胞發(fā)生脫落，漂浮。
g 待細胞基本貼壁伸展并逐漸形成網狀，應將原代細胞換液
h 用骨髓或外周血中的懸浮細胞經靜置培養(yǎng)1周時，應將細胞懸液經低速離心后換液。
② 懸浮細胞的培養(yǎng)要求
a 原代培養(yǎng)時要盡量去除紅細胞
b 短期培養(yǎng)，可在含10%小牛血清的RPMI1640培養(yǎng)基中進行
c 細胞濃度可在5-8×109/L范圍內，進行分瓶試驗。
d 長期培養(yǎng)時，細胞中要加入生長因子，白血病細胞中要加入少量的原患者血清，以利細胞生長。
f 細胞換液一般每隔3天需半量換液一次
g 細胞傳代一般待細胞增殖加快、細胞密度較高時才能進行。
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