原代細(xì)胞的培養(yǎng)：
(1)原代細(xì)胞的培養(yǎng)方法
原代細(xì)胞的培養(yǎng)也叫初代培養(yǎng)是從供體取得組織細(xì)胞在體外進(jìn)行的培養(yǎng)，是建立細(xì)胞系的步，是一項(xiàng)基本技術(shù)。
原代細(xì)胞接近和能反映體內(nèi)生長(zhǎng)特性，適宜用于敏感性試驗(yàn)、細(xì)胞分化等實(shí)驗(yàn)研究。
① 組織塊培養(yǎng)法
組織塊培養(yǎng)是常用、簡(jiǎn)便易行和成功率較高的原代培養(yǎng)方法。其基本方法是將剪成的小組織團(tuán)塊接種于培養(yǎng)瓶(或皿)中，瓶壁可預(yù)先涂以膠原薄層，以利于組織塊粘著于瓶壁，使周邊細(xì)胞能沿瓶壁向外生長(zhǎng)。
② 消化培養(yǎng)法
③ 懸浮細(xì)胞培養(yǎng)法
對(duì)于懸浮生長(zhǎng)的細(xì)胞，如白血病細(xì)胞、骨髓細(xì)胞、胸水和腹水中的癌細(xì)胞和細(xì)胞無(wú)需消化，可采用低速離心分離，直接培養(yǎng)，或經(jīng)細(xì)胞分層液分離后接種培養(yǎng)。
④器官培養(yǎng)
器官培養(yǎng)是指從供體取得器官或組織塊后，不進(jìn)行組織分離而直接在體外的特定環(huán)境條件下培養(yǎng)，器官培養(yǎng)可保持器官組織的相對(duì)完整性，可用于重點(diǎn)觀察細(xì)胞間的聯(lián)系、排列情況和相互影響，以及局部環(huán)境的生物調(diào)節(jié)作用。
兔肝實(shí)質(zhì)細(xì)胞
商品屬性：
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組織來(lái)源
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肝臟
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規(guī)格
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5×10?Cells/T25培養(yǎng)瓶
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細(xì)胞分類(lèi)
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兔原代細(xì)胞
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培養(yǎng)條件
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氣相：空氣，95%；CO2，5%
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生長(zhǎng)特性
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貼壁
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細(xì)胞形態(tài)
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上皮細(xì)胞樣
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細(xì)胞簡(jiǎn)介：
兔肝實(shí)質(zhì)細(xì)胞分離自肝臟組織；肝臟是身體內(nèi)以代謝功能為主的一個(gè)器官，并在身體里面起著去氧化、儲(chǔ)存肝糖、分泌性蛋白質(zhì)的合成等作用；肝臟也**消化系統(tǒng)中之膽汁。肝臟是機(jī)體內(nèi)臟里大的器官，位于機(jī)體中的腹部位置，在右側(cè)橫隔膜之下，位于膽囊之前端且于右邊腎臟的前方，胃的上方。肝臟是機(jī)體消化系統(tǒng)中大的消化腺，為一紅棕色的V字形器官。肝臟是尿素合成的主要器官，又是新陳代謝的重要器官。肝臟在機(jī)體位置和形態(tài)結(jié)構(gòu)：肝臟位于右上腹，隱藏在右側(cè)膈下和肋骨深面，大部分肝為肋弓所復(fù)蓋，僅在腹上區(qū)、右肋弓間露出并直接接觸腹前壁，肝上面則與膈及腹前壁相接。肝實(shí)質(zhì)細(xì)胞是指具有肝功能的單位，是肝臟的基本組成單位之一。肝實(shí)質(zhì)細(xì)胞與主要病生理變化：急性肝炎、肝硬化、肝膿腫。肝實(shí)質(zhì)細(xì)胞屬于中高度分化細(xì)胞，生長(zhǎng)營(yíng)養(yǎng)需求高，在體外存活時(shí)間短；細(xì)胞呈圓形或多角形，核大而圓，居中，常染色質(zhì)豐富，部分有雙核或多倍體核。肝臟作為體內(nèi)重要的器官，在整個(gè)物質(zhì)代謝過(guò)程中具有廣泛而多樣的作用。
方法簡(jiǎn)介：
實(shí)驗(yàn)室分離的兔肝實(shí)質(zhì)細(xì)胞采用混合酶灌流消化、反復(fù)低速離心制備而來(lái)，細(xì)胞總量約為5×10?cells/瓶。
質(zhì)量檢測(cè)
實(shí)驗(yàn)室分離的兔肝實(shí)質(zhì)細(xì)胞經(jīng)Cytokeratin-18熒光鑒定，純度可達(dá)90%以上，且不含有HIV-1、HBV、HCV、支原體、、酵母和等。
培養(yǎng)信息：
包被條件：鼠尾膠原Ⅰ（2-5μg/cm2）
培養(yǎng)基：含FBS、生長(zhǎng)添加劑、Penicillin、Streptomycin等
換液頻率：每2-3天換液一次
生長(zhǎng)特性：貼壁
細(xì)胞形態(tài)：上皮細(xì)胞樣
傳代特性：可傳1代，不建議傳代
消化液：0.25%胰蛋白酶
培養(yǎng)條件：氣相：空氣，95%；CO2，5%
兔肝實(shí)質(zhì)細(xì)胞體外培養(yǎng)周期有限；建議使用配套的生長(zhǎng)培養(yǎng)基及正確的操作方法來(lái)培養(yǎng)，以此保證該細(xì)胞的佳培養(yǎng)狀態(tài)。
公司正在出售的產(chǎn)品：
小鼠甘露聚糖結(jié)合凝集素關(guān)聯(lián)絲氨酸蛋白酶1(MASP1)elisa檢測(cè)試劑盒
亞麻酸（C18:3）含量試劑盒
制備海藻糖比色法定量檢測(cè)試劑盒
組織及血液堿性磷酸酶（AKP/ALP）測(cè)試盒
大鼠葉酸(FA)elisa檢測(cè)試劑盒
小鼠補(bǔ)體1抑制因子(C1INH)elisa檢測(cè)試劑盒
大鼠Agouti相關(guān)蛋白(AGRP)elisa分析檢測(cè)試劑盒
細(xì)胞分泌型堿性磷酸酶化學(xué)發(fā)光法定量檢測(cè)試劑盒
人Ⅰ型膠原交聯(lián)羧基末端肽(CTX-I)elisa檢測(cè)試劑盒免費(fèi)代測(cè)
中期因子/肝素結(jié)合生長(zhǎng)因子抗體 Midkine
腫瘤抑制基因NME2抗體 Nm23-H2/NME2
干擾素α4抗體 IFNA4
孤菲肽受體/痛敏肽受體抗體 Nociceptin receptor
KPNA3蛋白抗體 KPNA3
MAPK/ERK激酶3抗體 MEKK3
熱反應(yīng)蛋白12抗體 HRSP12
絨毛蛋白重組兔單克隆抗體 villin
Bruton激酶抑制劑蛋白抗體 IBTK
CD3D重組兔單克隆抗體 CD3D
李斯特菌菌體蛋白抗體 Listeria tropina
磷酸化Crk p38抗體 phospho-CRK (Tyr221)
γ谷氨酰半胱氨酸合成酶抗體 GCLC
白介素1α/IL-1α抗體 IL-1 Alpha Propeptide
細(xì)胞色素P450 2A13抗體 CYP2A13
腺苷A2b受體/神經(jīng)生長(zhǎng)因子1受體抗體 ADORA2B
大鼠堿性成纖維生長(zhǎng)因子(bFGF)elisa檢測(cè)試劑盒
兔肝實(shí)質(zhì)細(xì)胞高效液相色譜法（HPLC）定量檢測(cè)試劑盒
兔白介素1βelisa檢測(cè)試劑盒
大鼠檸檬酸合酶(CS)elisa檢測(cè)試劑盒
細(xì)胞衰老特異性脂褐素靛酚原位染色試劑盒
原代細(xì)胞的分離方法：
一、懸浮細(xì)胞的分離方法
組織材料若來(lái)自血液、羊水、胸水或腹水的懸液材料，簡(jiǎn)單的方法是采用1000r/min的低速離心10分鐘。經(jīng)離心后由于各種細(xì)胞的比重不同可在分層液中形成不同層，這樣可根據(jù)需要收獲目的細(xì)胞。
二、實(shí)體組織材料的分離方法
對(duì)于實(shí)體組織材料，由于細(xì)胞間結(jié)合緊密，為了使組織中的細(xì)胞充分分散，形成細(xì)胞懸液，可采用機(jī)械分散法（物理裂解）和消化分離法。
（一）機(jī)械分散法
特點(diǎn):簡(jiǎn)便、快速,但對(duì)組織機(jī)械損傷大，而且細(xì)胞分散效果差,適用于處理纖維成分少的軟組織。
（二）消化分離法
組織消化法是把組織剪切成較小團(tuán)塊（或糊狀），應(yīng)用酶的生化作用和非酶的化學(xué)作用進(jìn)一步使細(xì)胞間的橋連結(jié)構(gòu)松動(dòng)，使團(tuán)塊膨松，由塊狀變成絮狀，此時(shí)再采用機(jī)械法，用吸管吹打分散或電磁攪拌或在搖珠瓶中振蕩，使細(xì)胞團(tuán)塊得以較充分的分散，制成少量細(xì)胞群團(tuán)和大量單個(gè)細(xì)胞的細(xì)胞懸液，接種培養(yǎng)后，細(xì)胞容易貼壁生長(zhǎng)。
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