原代細胞的培養(yǎng)：
(1)原代細胞的培養(yǎng)方法
原代細胞的培養(yǎng)也叫初代培養(yǎng)是從供體取得組織細胞在體外進行的培養(yǎng)，是建立細胞系的步，是一項基本技術(shù)。
原代細胞接近和能反映體內(nèi)生長特性，適宜用于敏感性試驗、細胞分化等實驗研究。
① 組織塊培養(yǎng)法
組織塊培養(yǎng)是常用、簡便易行和成功率較高的原代培養(yǎng)方法。其基本方法是將剪成的小組織團塊接種于培養(yǎng)瓶(或皿)中，瓶壁可預(yù)先涂以膠原薄層，以利于組織塊粘著于瓶壁，使周邊細胞能沿瓶壁向外生長。
② 消化培養(yǎng)法
③ 懸浮細胞培養(yǎng)法
對于懸浮生長的細胞，如白血病細胞、骨髓細胞、胸水和腹水中的癌細胞和細胞無需消化，可采用低速離心分離，直接培養(yǎng)，或經(jīng)細胞分層液分離后接種培養(yǎng)。
④器官培養(yǎng)
器官培養(yǎng)是指從供體取得器官或組織塊后，不進行組織分離而直接在體外的特定環(huán)境條件下培養(yǎng)，器官培養(yǎng)可保持器官組織的相對完整性，可用于重點觀察細胞間的聯(lián)系、排列情況和相互影響，以及局部環(huán)境的生物調(diào)節(jié)作用。
大鼠下丘腦神經(jīng)元細胞
商品屬性：
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組織來源
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腦組織
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規(guī)格
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5×10?Cells/T25培養(yǎng)瓶
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細胞分類
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大鼠原代細胞
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培養(yǎng)條件
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氣相：空氣，95%；CO2，5%
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生長特性
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貼壁
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細胞形態(tài)
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神經(jīng)元細胞樣
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細胞簡介：
大鼠下丘腦神經(jīng)元細胞分離自下丘腦；下丘腦又稱丘腦下部，位于大腦腹面、丘腦的下方，是調(diào)節(jié)內(nèi)臟活動和活動的較神經(jīng)所在。下丘腦自前向后可分三部﹐即前部（又名視前區(qū)和視上區(qū)）﹑中部（結(jié)節(jié)區(qū)）和后部（體區(qū)）。下丘腦具有許多細胞核團和纖維束﹐與神經(jīng)系統(tǒng)的其它部位具有密切的相互聯(lián)系。它不僅通過神經(jīng)和血管途徑調(diào)節(jié)腦垂體前﹑后葉的分泌和釋放﹐而且還參與調(diào)節(jié)自主神經(jīng)系統(tǒng)﹐如控制水鹽代謝﹑調(diào)節(jié)體溫﹑攝食﹑睡眠﹑生殖、內(nèi)臟活動以及情緒等。下丘腦神經(jīng)元與來自其他部位的神經(jīng)纖維有廣泛的突觸聯(lián)系，可以接受很多神經(jīng)沖動，為系統(tǒng)和神經(jīng)系統(tǒng)的中心。它們能調(diào)節(jié)垂體前葉功能，合成神經(jīng)垂體及控制自主神經(jīng)和植物神經(jīng)功能。故提取下丘腦神經(jīng)元進行體外培養(yǎng)，建立下丘腦神經(jīng)元體外實驗平臺具有重要意義。
方法簡介：
公司實驗室分離的大鼠下丘腦神經(jīng)元細胞采用胰蛋白酶消化法結(jié)合神經(jīng)元培養(yǎng)基培養(yǎng)、化學(xué)試劑抑制法篩選制備而來，細胞總量約為5×105cells/瓶。
質(zhì)量檢測
公司實驗室分離的大鼠下丘腦神經(jīng)元細胞經(jīng)β-Tubulin熒光鑒定，純度可達90%以上，且不含有HIV-1、HBV、HCV、支原體、、酵母和等。
培養(yǎng)信息：
包被條件 PLL（0.1mg/ml）
培養(yǎng)基 含B-27 Supplement、Penicillin、Streptomycin等
換液頻率 每2-3天換液一次
生長特性 貼壁
細胞形態(tài) 神經(jīng)元細胞樣
傳代特性 屬于終末分化細胞；屬于不增殖細胞群
消化液 0.25%胰蛋白酶
培養(yǎng)條件 氣相：空氣，95%；CO2，5%
公司正在出售的產(chǎn)品：
FⅨELISAKit
大鼠β位淀粉樣前體蛋白裂解酶1(BACE1)elisa分析檢測試劑盒
BACE1 ELISA Kit
人黑色素瘤標(biāo)記物(MART/Melan-A)elisa分析檢測試劑盒
MART/Melan-AELISAKit
p53靶蛋白3抗體 Anti-TP53TG3
RAS癌基因家族蛋白RAB40C抗體 Anti-RAB40C
2型神經(jīng)纖維瘤抗體 Anti-NF2/Neurofibromin 2
神經(jīng)生長因子誘導(dǎo)蛋白抗體 Anti-VGF/Nerve growth factor inducible
羊水通道蛋白5(AQP5)elisa分析檢測試劑盒
AQP5 ELISA kit
人苯丙酸諾龍/苯丙酸去甲睪酮(NP)elisa分析檢測試劑盒
NPELISAKit
細胞PDGF-B蛋白表達熒光定量檢測試劑盒
三碘甲狀腺原氨酸(T3)elisa分析檢測試劑盒
動物細胞基因組DNA分離試劑盒
小鼠谷氨酰胺合成酶(GS)elisa檢測試劑盒
軸索過度生長抑制因子B受體抗體
Nogo B receptor
通用轉(zhuǎn)錄因子ⅡA亞基1/TFIIA-α抗體
GTF2A1 alpha
磷酸化白細胞介素1受體銜接蛋白抗體 Anti-phospho-TIRAP(Tyr86)
磷酸化蛋白激酶樣內(nèi)質(zhì)網(wǎng)激酶抗體 Anti-Phospho-PERK(Thr980)
穿孔素抗體 Anti-Perforin
細胞粘附分子伴侶蛋白2抗體 Anti-Sidekick 2
Cy5.5標(biāo)記的小鼠抗豚鼠IgG H&L
大鼠下丘腦神經(jīng)元細胞大鼠泛素結(jié)合酶UBC5 elisa分析檢測試劑盒
Rat
ubiquitin-conjugating enzyme UBC5 ELISA Kit
山羊骨堿性磷酸酶(BALP)elisa分析檢測試劑盒
BALPELISAKit
原代細胞的分離方法：
一、懸浮細胞的分離方法
組織材料若來自血液、羊水、胸水或腹水的懸液材料，簡單的方法是采用1000r/min的低速離心10分鐘。經(jīng)離心后由于各種細胞的比重不同可在分層液中形成不同層，這樣可根據(jù)需要收獲目的細胞。
二、實體組織材料的分離方法
對于實體組織材料，由于細胞間結(jié)合緊密，為了使組織中的細胞充分分散，形成細胞懸液，可采用機械分散法（物理裂解）和消化分離法。
（一）機械分散法
特點:簡便、快速,但對組織機械損傷大，而且細胞分散效果差,適用于處理纖維成分少的軟組織。
（二）消化分離法
組織消化法是把組織剪切成較小團塊（或糊狀），應(yīng)用酶的生化作用和非酶的化學(xué)作用進一步使細胞間的橋連結(jié)構(gòu)松動，使團塊膨松，由塊狀變成絮狀，此時再采用機械法，用吸管吹打分散或電磁攪拌或在搖珠瓶中振蕩，使細胞團塊得以較充分的分散，制成少量細胞群團和大量單個細胞的細胞懸液，接種培養(yǎng)后，細胞容易貼壁生長。
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